针灸对缺血性脑卒中血管新生相关信号通路影响研究进展

宋祖贤，曹　奕，王　琳

（1.安徽中医药大学2014级硕士研究生，安徽 合肥 230038；2.安徽中医药大学第二附属医院，安徽 合肥 230061）

针灸对缺血性脑卒中血管新生相关信号通路影响研究进展

宋祖贤1，曹奕2，王琳2

（1.安徽中医药大学2014级硕士研究生，安徽 合肥 230038；2.安徽中医药大学第二附属医院，安徽 合肥 230061）

缺血性脑卒中的治疗有多种方法，如神经保护、抗凝、溶栓、增加血容量、外科手术及康复治疗等。而针灸治疗缺血性脑卒中具有显著的疗效。针刺既可改善缺血区脑组织的能量代谢与血液循环，发挥脑保护作用，又可以激活脑组织不同区域，提高视觉皮层区域脑组织血氧饱和度［1］。针灸治疗还具有影响某些信号通路，促进血管新生，抗自由基氧化等作用。缺血性损伤在内皮祖细胞及细胞因子的综合作用下可以促进新生血管的形成。在脑缺血病程中，神经血管单元因长时间缺血缺氧而发生坏死和凋亡，因此及时恢复血供、开放侧支循环及促进血管新生十分重要。血管新生是指在原有血管基础上，通过内皮细胞芽生，血管分裂、分支而形成复杂血管网络，并使其功能与局部需要相适应的过程。研究显示内皮组细胞、细胞因子等因素均与血管新生有密切联系［2］。

1　缺血性脑卒中与相关信号通路

Notch信号通路。娄远蕾等［3］实验发现脑缺血后脑组织缺血皮质区NICD蛋白的表达明显的上调，提示Notch信号通路参与了脑缺血后血管新生过程的调控。有研究表明抑制Notch信号衰减的内脂素可以有效地诱导体内体外的血管生成［4］。Notch能够有效地调控VEGF受体的表达，该受体是血管密度的关键调控因子，Notch信号的缺失或异位激活可分别导致血管密度的增加或者减低［5］。Notch1在调节内皮细胞VEGFR-1中扮演重要角色，其功能可能表现为血管生成及病理生理等方面［6］。王拯等［7］认为Notch信号通路与其他信号通路，如血管内皮生长因子，BMP-SMAD及细胞外基质分子交互作用共同协调血管新生的过程。当人体急性创伤或急性缺血再灌注损伤时，阻断Notch信号通路可以促进血管生成［8］。内皮细胞中的Notch信号活性与VEGF-VEGFR/Dll4-Notch这一信号回路处于动态平衡，从而可以保证正常的血管萌芽和血管网络构建。此信号还能够影响细胞外基质成分的生成和分布，具有稳定血管壁的作用，进而调控动静脉分化的作用［9］。Notch信号分子在血管内皮细胞中均有良好的表达，能够诱导内皮细胞发生、分化［10］。激活Jagged1/Notch3可以促进新生血管生成，提高缺血区域的血流灌注［11］。激活Dll4同样可以促进缺血区的血管生成［12］。

Sonic hedgehog（Shh）信号通路。范层层［13］等观测到缺血性脑卒中可以上调Shh信号通路成分在大鼠侧脑室下带（SVZ）区的表达，提示Shh信号通路可能对于参与卒中后神经再生的机制具有调控作用。Renault等［14］发现，Shh可以促进毛细血管形态发生，诱导内皮细胞迁移，并且在内皮细胞上Shh是通过Rho途径而非经典的Gli途径调节血管生成。

其他信号通路。在神经细胞中JNK通路随着p-MKK4、p-JNK和p-c-Jun表达增加而被激活，调节JNK信号通路在介导细胞凋亡中可以发挥重要的作用［15］。Toll样受体（Toll like receptors，TLRs）作为炎症信号受体，其信号通路在脑缺血发生后引发的炎症级联反应过程中起到重要作用，与炎症介质表达关系密切［16］。武菲等［17］等发现，经典Wnt信号通路抑制剂Dkk-1参与缺血神经损伤的病理生理过程，Wnt信号在调节成体神经干细胞对称性分裂中发挥作用。薛金龙等［18］研究表明大鼠造模后可激活了Wnt信号通路发挥保护神经，促进神经发生的作用。

2　针灸对血管新生相关信号通路的影响

体针。姚建宁等［19］认为曲池、足三里等穴位可以明显的改善MCAO大鼠的神经功能缺损症状，降低脑梗死范围，炎症反应能够明显的缓解，电针调控NF-KB信号通路，抑制炎症因子分泌来实现对脑缺血的治疗等机制可能与此相关。胥虹贝等［20］用线栓法建立大鼠大脑中动脉阻塞脑缺血模型取“百会”穴及左侧“四关”穴为相应电针穴位，研究表明电针可通过上调局灶脑缺血/再灌注大鼠脑缺血皮质区eNOS和金属基质蛋白酶的表达，从而促进血管再生。徐晓明等［21］等发现，电针水沟穴能促进缺血大鼠脑内血管内皮细胞CD34的表达，促进微血管密度的增加，故增加了血管新生的力度。丁玲等［22］以线栓法复制大鼠MCAO模型，使用电针对百会、水沟、足三里穴进行刺激，使大鼠梗死灶周围BFGF表达显著上调，ES表达明显下降，提示针灸可能通过双向调节血管生成促进因子及血管生成抑制因子，促进血管新生，改善缺血区半暗带的血供，促进缺血后的神经功能恢复。张珊珊等［23］采用线栓法制备SD大鼠局灶脑缺血再灌注模型，取双侧“合谷”穴为电针穴位可提高p-AKT1表达水平，加强PI3K/AKT通路激活，促进EPCs归巢至缺血组织区，从而促进血管再生。

头针。唐强等［24］采用头穴丛刺疗法与康复治疗及模型组相对比，针康治疗组mNSS评分降低（P＜0.05），bFGF蛋白表达升高（P＜0.05），AS蛋白表达降低（P＜0.05）。针康法可通过上调bFGF蛋白表达和下调AS蛋白表达，促使血管新生，减轻缺血性脑损伤，加快脑卒中后期受损脑组织的修复，从而促进缺血性脑卒中神经功能恢复。朱路文等［25］采用头穴丛刺与现代康复技术的结合，利用头穴丛刺能够透过颅骨，刺激大脑皮层，直达责任病灶;从而促进脑缺血区半暗区VEGF、LN的表达，进一步促进脑缺血后微血管的再生，改善血脑屏障的通透性。杨敏等［26］采用改进的线栓法制做永久性大脑中动脉闭塞模型，选取顶颞后斜线、顶颞前斜线，与模型组比较，头皮针组各时间点大鼠脑组织VEGF含量增多，ES含量减少，得出头针可能通过上调缺血区VEGF的表达、下调ES来引导脑缺血再灌注后的血管新生，有利于改善缺血半影区血液供应和促进神经功能恢复。

眼针。宓丹等［27］采用改良线栓法制备局灶性脑缺血再灌注模型用眼针进行治疗，定位取肝区、上焦区、下焦区、肾区。发现眼针可以通过上调VEGF、VEGFR2及其mRNA的表达，促进微血管新生。赵丹玉等［28］对局灶性脑缺血再灌注大鼠模型进行眼针刺激能够抑制TLR4及MyD88的表达，抑制炎症因子的表达而减轻其炎症反应，从而达到对脑皮层组织的保护目的。许秀洪等［29］参照Longa法复制局灶脑缺血再灌注模型，表里经配穴电针组取表里经配穴的足三里、三阴交和尺泽、合谷行电针治疗。发现表里经配穴法可以调控JNK信号通路，下调p-JNK表达，减轻细胞凋亡，保护大脑神经元。

3　小　结

近年来，越来越多的研究发现多种信号通路在血管生成中发挥重要作用，但目前对缺血性脑卒中的研究多以实验为主，临床研究较少，因此还应更多地结合现代科学技术，在不违背医学伦理学的前提下开展临床研究，从而为治疗缺血性脑血管疾病提供帮助。同时，针刺治疗的手法多样，穴位各异，故应以中医基础理论为指导结合现代科学技术手段，运用循证医学方法，寻找出有效又系统规范的针灸治疗方案，提高脑梗死治疗效果。

［1］ 沈俊明，詹宇豪，张文丽.太冲、合谷穴对脑缺血作用机制的研究进展［J］.医学综述，2016，22（2）：329-331.

［2］ CHIBA S.Notch signaling in stem cell systems［J］. Stem Cells，2006，24（11）：2437-2447.

［3］ 娄远蕾，匡助才，鲁友明，等.大鼠脑缺血后Notch分子上调调控血管新生［J］.基础医学与临床，2015，35（1）：97-98.

［4］ YH BAE，HJ PARK，SR KIM，et al.Notch1 mediates visfatin-induced FGF-2 up-regulation and endothelial angiogenesis［J］.Cardiovasc Res，2011，89（2）：436-445.

［5］ GRIDLEY T. Notch signaling in vascular development and physiology［J］.Development，2007，134（15）：2709-2718.

［6］ Y FUNAHASHI，CJ SHAWBER，M VORONTCHIKHIN，et al.Notch regulates the angiogenic response via induction of VEGFR-1［J］. Blood，2010，116（26）：6133-6143

［7］ 王拯，张莛蔚，韩向龙.Notch信号通路调控下的血管形成［J］.中国组织工程研究，2015，19（46）：7498-7503.

［8］ 董丽，孔令蕊，王恬.Notch信号通路对免疫细胞的调节作用［J］.中国生物化学与分子生物学报，2013，29（12）：1106-1112.

［9］ 刘虎仙，雷永红，韩岩.Notch信号通路在组织血管化中的作用［J］.中国美容医学，2015，24（8）：83-86.

［10］ ISO T，HAMAMORI Y，KEDES L.Notch signaling in vascular development［J］.Arterioscler Thromb Vasc Biol，2003，23（4）：543-553.

［11］ ZENG H，LI L，CHEN J X.Overexpression of angiopoietin-1 increases CD133+/c-kit+ cells and reduces myocardial apoptosis in db /db mouse infarcted hearts［J］.PLoS One，2012，7（4）：e35905.

［12］ HUANG F，ZHU X，HU X Q，et al.Mesenchymal stem cells modified with miR-126 release angiogenic factors and activate Notch ligand Delta-like-4，enhancing ischemic angiogenesis and cell survival［J］. Int J Mol Med，2013，31（2）：484-492.

［13］ 范层层，杨琴，陈娜，等.局灶缺血性脑卒中大鼠侧脑室下带Shh信号通路成分的动态表达［J］.生命科学研究，2011，15（6）：524-529.

［14］ RENAULT MA，RONCALLI J，TONGERS J，et al.Sonic hedgehog induces angiogenesis via Rho kinase-dependent signaling in endothelial cells［J］.J Mol Cell Cardiol，2010，49（3）：490-498.

［15］ ANANDA SS，BABU PP.c-Jun N terminal kinases （JNK）are activated in the brain during the pathologof experimental cerbral malaria［J］. Neurosci Lett，2011，488（2）118-122.

［16］ ELTZSCHIG HK，ECKLE T.Ischemia and reperfusion-from mechanism to translation.Nat Med，2011，7（11）：1391-1401.

［17］ 武菲，张秋玲.神经干细胞与脑卒中后的神经发生［J］.生理科学进展，2012，43（3）：221-226.

［18］ 薛金龙，孙芳玲，刘婷婷，等.莫诺苷对局灶性脑缺血再灌注大鼠Wnt7a和APC表达的影响［J］.中国比较医学杂志，2014，24（9）：9-13.

［19］ 姚建宁，王鲜，柳维林，等.电针激活大脑中动脉闭塞大鼠miRNA调控NF-κB信号通路的机制研究［J］.中国康复医学杂志，2016，31（4）：388-393.

［20］ 胥虹贝，罗勇，朱艳含，等.电针通过eNOS促进局灶脑缺血/再灌注大鼠脑缺血皮质区血管再生［J］.中国组织化学与细胞化学杂志，2015，24（5）：381-387.

［21］ 徐晓明，尤艳利，舒适，等.电针对MCAO大鼠缺血半暗带血管新生的影响［J］.中国药物经济学，2014，9（z1）：31-33.

［22］ 丁玲，陈邦国，张晓明，等.电针对局灶性脑缺血再灌注大鼠脑组织bFGF、ES表达的影响［J］.光明中医，2012，27（5）：879-881.

［23］ 张珊珊，罗勇，武磊.PI3K/AKT通路在电针促进局灶脑缺血再灌注大鼠脑内血管再生中的作用［J］.第三军医大学学报，2010，32（23）：2488-2491.

［24］ 唐强，姜云飞，朱路文，等.针康法对局灶性脑缺血大鼠神经功能缺损及缺血区碱性成纤维细胞生长因子、血管抑制素蛋白表达的影响［J］.中国康复理论与实践，2015，21（10）：1151-1155.

［25］ 朱路文，唐强，李季，等.针康法对脑缺血大鼠脑组织VEGF、LN表达的影响［J］.针灸临床杂志，2015，31（10）：71-74.

［26］ 杨敏，陈邦国，梁超.头针对大鼠局灶性脑缺血再灌注后脑组织VEGF及ES表达的影响［J］.中国中医急症，2014，23（6）：1012-1013，1052.

［27］ 宓丹，马贤德，王建.眼针对局灶性脑缺血再灌注大鼠VEGF/VEGFR系统表达的影响［J］.山东大学学报（医学版），2013，51（2）：22-26，32.

［28］ 赵丹玉，苗兰英，曹阳，等.眼针对脑缺血再灌注损伤模型大鼠脑皮层组织TLR4、MyD88表达的影响［J］.中国老年学杂志，2016，36（7）：1547-1549.

［29］ 许秀洪，周国平，李春，等.表里经配穴法对脑缺血再灌注损伤大鼠海马细胞凋亡及JNK信号通路的影响［J］.广州中医药大学学报，2015，32（1）：76-80，186.

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1004-2814（2016）10-1039-02

曹 奕

2016-05-23