蛋鸡肿瘤病的诊断与鉴别技术概述

任忆秋王 重刘承军　王海丽

（1.东昌府区畜牧兽医局，山东聊城 252000；

2.聊城市畜牧兽医技术服务中心，山东聊城 252000；

3.聊城职业技术学院，山东聊城 25200）

蛋鸡肿瘤病的诊断与鉴别技术概述

任忆秋1王 重1刘承军2王海丽3*

（1.东昌府区畜牧兽医局，山东聊城 252000；

2.聊城市畜牧兽医技术服务中心，山东聊城 252000；

3.聊城职业技术学院，山东聊城 25200）

肿瘤性疾病是威胁养禽业的重要疾病，给养禽业造成的损失较大。本文就国内蛋鸡肿瘤病的的流行情况和临床鉴别进行了总结，为蛋鸡养殖者提供参考。

蛋鸡；肿瘤病；鉴别；概述

随着养禽业规模养殖的不断扩大，蛋鸡肿瘤性疾病呈高发态势，较突出病种有马立氏克病（MD）、淋巴白血病（AL）以及网状内皮组织增生症（RE），因免疫抑制作用危害，给蛋鸡养殖业造成重大的损失。该疾病具有病死率较高，发病原因多，临床症状复杂等特点，特别是肿瘤性疾病混合感染或继发其他疾病，生产中往往造成更大经济损失。

1 蛋鸡肿瘤性疾病的流行情况

肿瘤病在我国蛋鸡养殖场中均有不同程度的存在，具有野毒毒力增强、发病日龄提前、混合感染普遍等特点。

1.1 马立氏克病

近年来，我国发生MD 免疫失败和分离强毒力毒株的报道不断增多，已分离出马立克氏病超强毒。随着生产中MDV 毒力的不断增强，出现马立克氏病超（特）超强毒亦已变为可能。研究表明，MDV 毒力逐年变强与饲养密度过大、疫苗免疫压力上升和非规范免疫普遍等因素有关。据报道，在一定地区对蛋鸡实施低剂量MD疫苗接种的鸡场过度集中，以及生物安全措施存在明显漏洞时，MDV 的毒力逐渐变异增强，从温和型向超（特）超强毒演变。高毒力的毒株趋向于在更短的时间内导致淋巴细胞的增生以及延长感染到排毒的时间，且部分免疫鸡群仍可暴发，使用火鸡疱疹病毒疫苗（HVT）的保护效果甚微。在存在免疫抑制病或管理条件差的情况下，甚至CVI988 疫苗的保护率也有所降低。需要注意的是，尽管部分接种CVI988 疫苗的蛋鸡场责怨MD 肿瘤带来的死亡率明显增加，少数达到10%。但在这些发病鸡群中，肿瘤通常发生较晚，18 ～ 24 周龄才开始出现，且大多数表现为弥漫性的小的肿瘤结节而不是大的肿瘤结节或肿瘤块，在形态上很难与禽白血病病毒（ALV-J）和网状内皮症病毒（REV）的肿瘤相区别。据报道，在肿瘤发病率较高的鸡场送检的病鸡中，不同致瘤病毒的共感染现象相当常见，单纯MD 感染时肿瘤发生率小于5%，而MD 与REV 混合感染则肿瘤发生率却大大提升，通常在8% 以上。有报道显示，山东和河北等地肿瘤发病鸡群中，有一半以上同时存在着MDV 和REV 的共感染。另外，我国最近分离到一些ALV - -J 毒株的致病力明显增强，导致发病日龄提前，值得对该病加以关注。在我们对临床病料的检测实例中，多次发现ALV -J 与REV 存在明显的共感染现象。目前，REV与其他肿瘤病毒的共感染是相当普遍的。实际上，在流行病学调查中，REV 与其他非肿瘤性病毒如鸡传染性贫血病毒（CAV）或呼肠孤病毒（REO）的共感染也非常普遍。REV感染本身固然能诱发肿瘤，但可能更重要的是，由REV 感染造成的免疫抑制会大大减低其他疫苗如MD 疫苗的免疫效果，也会加强MDV 或ALV 的致肿瘤作用。严重发生MD 和ALV-J亚型肿瘤的鸡群都并发REV 感染，REV 在肿瘤中检出率在30%以上，目前已接近50%。或许我们会发起疑问，为什么近年来在我国鸡群中有这么高的REV分离率？这确实是一个值得我们认真对待的问题。目前，由商品胚（非SPF 鸡胚）制备的MD 疫苗或鸡痘疫苗等活苗存在污染外源病原的现象，特别是一些免疫抑制性病原，如REV、ALV、CAV 等，除本身导致发病引起肿瘤外，还可造成免疫抑制，影响疫苗的免疫应答，进而出现免疫失败。据报道，目前国内活苗中REV 的污染率可达38. 8%，由其所致的肿瘤情况已有多起报道。因此，一定要选择正规生产厂家用SPF 鸡胚制备的疫苗，这样才能尽最大可能降低MD 和其他疾病的发生。

2 诊断方法

对于单一、典型的病例，根据病理组织切片，结合流行病学特点可对MD 和AL 作出初步鉴别诊断。通常情况下，MD 肿瘤以大小和形态不一的T 淋巴细胞瘤为主，发病高峰在3 月龄以下，鸡只出现虹膜炎、四肢麻痹、坐骨神经或臂神经肿胀等症状。ALV的A、B、C 和D 亚型可引发经典的白血病肿瘤，主要为形态大小均一的B 淋巴细胞瘤；J 亚型主要导致骨髓样细胞瘤，发病高峰在4～5 月龄以后。需要注意的是，REV 既能诱发在宏观上和微观上都与MD肿瘤相似的T 细胞淋巴瘤，又可导致与AL 的B 淋巴细胞瘤和骨髓样细胞瘤相似的复杂形态的肿瘤，临床上很难将其与MD 和AL 相区分，也使得基于临床症状的诊断非常不确实。目前，国内外专家已形成共识，即靠单一的病理学检查已很难对家禽肿瘤病作出正确的鉴别诊断，需要依靠综合应用不同的实验室检测方法进行确诊。可用于诊断肿瘤病的方法很多，例如常规病理切片、聚合酶链式反应（PCR）、免疫组化法、核酸探针技术等。常规病理切片是用H. E 染色组织切片，镜下观察肿瘤组织的细胞类型，确定是T 淋巴细胞、B 淋巴细胞、骨髓样瘤细胞还是网状内皮细胞等。目前，免疫组织化学已被引入肿瘤病的检测，该法需要使用单克隆抗体，将固定的组织切片用病毒特异性抗体免疫染色。例如单抗做免疫组化学染色可检测MD 转化细胞上表达的MDV 抗原，能排除ALV 或REV，对MD肿瘤具有诊断意义。近年来，人们对MDV、ALV 和REV 的检测还采用了PCR 法，与传统的诊断方法相比，PCR 技术具有快速、敏感、特异的特点。对肿瘤组织提取DNA，分别用相应的特异性核酸引物做PCR 扩增，即可确定鸡群中存在哪一种或哪几种病原感染。此外，核酸探针检测也可用于疾病的诊断，通过提取肿瘤组织DNA，分别用不同病毒特异性核酸探针作斑点分子杂交，以确定鸡群中存在哪一种或哪几种病原感染。

［1］ 韦平，何秀苗，王桂军，等.鸡肿瘤病快速鉴别诊断技术的建立［J］.扬州大学学报：农业与生命科学版，2002，23（2）：1-5.