猪伪狂犬病的诊断

王 锋

(浙江省宁海县动物卫生监督所,浙江宁海 315600)

猪伪狂犬病的诊断

王 锋

(浙江省宁海县动物卫生监督所,浙江宁海 315600)

通过对发生在浙江省宁波市某猪场的一起猪伪狂犬病的诊治,从猪伪狂犬病的诊断技术,预防措施对猪伪狂犬病进行了较全面的介绍,以期为猪伪狂犬病的预防和治疗提供参考。

猪;伪狂犬病;诊断

1 猪伪狂犬病的诊断技术

提高猪伪狂犬病的诊断技术以及诊断准确率是养猪业防控猪伪狂犬病的先决条件，只有早发现和早防控才能更加有效地避免养猪业遭受巨大的经济损失。目前有关猪伪狂犬病的诊断技术主要有以下几个方面。

1.1 临床诊断

临床诊断就是根据典型的临床症状、流行病学特点、病理剖检、发病史等信息判断猪只是否患有猪伪狂犬病的过程。不同生长时期、不同性别的猪只患病后的临床症状不同。孕期母猪患病后会出现流产甚至是产死胎的现象；仔猪感染后则会出现发热、呕吐、厌食、呼吸困难等临床症状，其中2～3周的仔猪的死亡率高达100%；公猪感染会出现繁殖力下降等症状。隐性感染的公猪没有明显的临床症状，需要进行实验室诊断确诊，以便及时隔离已感染猪只，控制感染的蔓延。

1.2 病原学诊断

病原学诊断包括病毒分离与鉴定和动物实回归验。病毒分离与鉴定就是采集病样的脑、扁桃体、肾和脾等组织剪碎后研磨，经灭菌处理且加有抗生素的平衡盐溶液或生理盐水稀释后接种在培养成单层的适宜细胞上，观察直至出现特征性细胞病变。一般情况下，2～5d即可分离到病毒。有病变的细胞用H.E染色，镜检可观察到嗜酸性核内包涵体，也可进一步以电镜等方法鉴定。动物回归实验就是把从猪的部分组织上分离出的病毒接种到实验鼠身上，经过实验后发现，实验鼠在经过超过十代的繁殖后，所有的鼠类均出现了典型病毒，并可以在医学电镜下观察到明显的伪狂犬病病毒的存在。

1.3 分子生物学方法

分子生物学诊断技术是近些年发展起来的，主要是根据病毒的特异性进行诊断，目前基本所有的流行性传染病都可以利用分子生物学诊断技术进行诊断。当伪狂犬病毒处于隐性状态时，仅靠临床诊断方法是无法准确判别的，此时分子生物学诊断技术便可以根据伪狂犬病病毒的敏感性以及特异性进行最为细致的判别，从而可以将病猪及时的隔离，保障养殖户的经济效益。目前所采用的分子生物学诊断技术主要包括核酸探针技术、聚合酶链反应技术（PCR）、基因芯片技术以及环介导等温扩增技术，其中核酸探针技术主要是依靠DNA杂交，从而检测病毒的存在；而聚合酶联反应技术适合PRV临床诊断以及流行病学调查且检查速度较快。PCR技术又包括常规PCR、鉴别PCR和定量PCR。基因芯片技术是基于PCR技术的多核酸杂交的原理，从而进行基因检测，判断病毒的存在；环介导等温扩增技术利用DNA扩增技术可快速检测伪狂犬病病毒的存在。

1.4 免疫学诊断

免疫学诊断是指采用血清学反应的方法，对某些疾病进行的诊断。主要是利用抗原抗体特异性结合的性质，用已知的抗原测定患者血清中的未知抗体，来诊断患者是否患某种传染病，也可用已知的抗体测定患者血清中是否含有相应的抗原，来诊断疾病。检测猪伪狂犬病病毒的方法有免疫荧光技术（FA）、反向间接血凝（抑制）试验（RPHA/RPHI）、单抗夹心ELISA、双抗夹心ELISA；检测猪伪狂犬病病毒抗体的方法有血凝和血凝抑制试验（HA-HI）、微量血清中和试验（MSN）、免疫电泳技术（IE）、琼脂免疫扩散试验（AGID）、间接ELISA、竞争ELISA。中和试验主要是诊断隐性感染，检测的特异性比较高、反应灵敏，但可操作性低；凝集性试验主要通过利用抗原的特异性来检测伪狂犬病病毒的存在，其中常用的辅助品为琼脂、乳胶以及血凝剂来检测抗原的存在；而标记抗体技术主要通过标记抗体，从而观测病原体的存在，其中利用荧光进行标记以及酶的特异性来观测抗体；利用血清诊断技术的准确度相对较高。

2 防治措施

2.1 隔离消毒

猪只发病后要及时进行隔离和治疗，以免传染造成更大的损失。对病猪猪舍要及时进行清洗和消毒，每天用1%喷雾灵溶液带猪消毒；舍外墙壁、道路用4%NaOH溶液喷雾消毒。将工作服、鞋、帽等用消毒液浸泡或高压灭菌消毒。对猪的流产胎儿、胎衣、死胎、木乃伊胎和病死猪尸体按《病死动物及产品深埋处理技术规范》深埋处理，污染物、排泄物也要做无害化处理。减少外来人员和车辆进入发病猪场，禁止场内人员串舍，防止人为扩散病原。

2.2 紧急免疫

一旦怀孕母猪出现猪伪狂犬病，要进行紧急免疫，免疫的对象是发病猪场的全场公猪、未发病母猪、哺乳仔猪、育肥猪。免疫疫苗的种类为伪狂犬病基因缺失弱毒活疫苗。疫苗注射的量根据猪只的种类和年龄来确定：一是成龄公猪、母猪。注射猪伪狂犬病灭活苗，用量为4头份/头，采用臀部肌肉注射。加强免疫在配种前和产前26d各用猪伪狂犬病灭活苗4头份/头加强免疫。二是小猪和育肥猪。注射猪伪狂犬病弱毒苗，用量为1头份/头，采用臀部肌肉注射。三是哺乳仔猪。可以于3～5日龄用猪伪狂犬病双基因缺失苗滴鼻、1头份/头。

3 治疗

一是对发病猪使用干扰素，稀释后按1ml/头肌注，同时按2ml/头注射抗病毒多肽，按0.12ml/kg·体重注射黄芪多糖注射液，然后再用头孢噻呋钠按3mg/kg·体重肌注，1次/d，连用3d。二是对高烧不退、病情严重的仔猪肌注安乃近、氨苄青霉素，1次/d，连用3～5d。三是防止继发感染，在每500kg饲料中加爱乐新500g、70%阿莫西林200g、强力霉素150g；每500kg饮水中加70%阿莫西林150g、多维250g、黄芪多糖250g，连用7d。经采取以上综合防治措施7d后，除个别病重仔猪死亡外，疫情得到有效控制。

[1] 彭金美，安同庆，赵鸿远，等.猪伪狂犬病病毒新流行株的分离鉴定及抗原差异性分析[J].中国预防兽医学报，2013，（1）：1-4.