浅析平基槭叶内生物活性含量动态变化

董效文（山西农业大学，山西 030801）



浅析平基槭叶内生物活性含量动态变化

董效文
（山西农业大学，山西 030801）

摘要：本文以6年生平基槭苗木为试材，对其叶内生物活性(黄酮、绿原酸、叶绿素、Vc)物质含量进行年动态变化研究。结果表明：平基槭在年生长发育过程中，黄酮和叶绿素的含量变化呈“M”状。黄酮含量变化分别出现在6月和8月，而8月达到全年最高值；叶绿素两个高峰却分别出现在6月和9月，6月为全年最高值。绿原酸、Vc含量变化分别是在6月和7月达到全年的最高值，都呈现先升后降的抛物线形。

关键词：平基槭；黄酮；绿原素；叶绿素；VC

平基槭[1]是槭树科槭树属的落叶乔木，在我国东北、黄河及长江流域省区大量种植，它在绿化、天然林保护、防风固沙等方面应用广泛。近年来，由于它的叶内含多种生物活性成分极具有食用、药用价值，越来越受到人们的关注和重视。本试验通过对其叶内黄酮、绿原酸、叶绿素、Vc含量进行年动态变化的研究，探索其各指标含量的变化，为平基槭叶更好地开发提供理论依据。

1　材料和方法

1.1试验材料

选6年生平基槭苗木于2015年4—10月，在山西省榆次市林业局苗圃进行取样测定，每月取样1次，摘取植株中上部叶片，用无离子水冲净，滤纸吸干叶面水分后置冰箱待测。

1.2测定方法

1.2.1黄酮含量测定[1-3]

取各处理5～8个叶片恒温烘干，研碎过筛，称0.30 g，用70％ C2H5OH 10 mL水浴（70～75 ℃）浸提6 h，70％ C2H5OH定容，放1 mL于容量瓶，再加70％ C2H5OH 4 mL，和0.3 mLNaNO2溶液混匀放置5 min，加0.3 mL Al（NO3）3溶液置6 min后，再加NaOH 2 mL摇匀，用70％ C2H5OH定容置10 min，在500 nm条件下比色，标准曲线法得黄酮含量。

1.2.2绿原酸含量测定[4]

称样品0.30 g，用95％ C2H5OH 10 mL在水浴（70～75 ℃）浸提6 h，放入容量瓶，再用95％ C2H5OH定容，放3 mL于容量瓶，再用C2H5OH（95％）定容，在324 nm条件下进行比色测定，标准曲线得绿原酸含量。

1.2.3叶绿素含量测定[5]

取0.05 g叶片，研碎放具塞试管中，加95％ C2H5OH 10 mL浸泡，避光至叶变白，取上清液在663 nm、645 nm条件下测吸光度。

1.2.4Vc含量测定[6-7]

（1） 取标准抗坏血酸溶液2 mL加8 mL 2％草酸，用DCIP（2,6-二氯吲哚酚钠）溶液滴定至终点，根据已知抗坏血酸和DCIP用量，计算滴定度即1 mL DCIP相当于抗坏血酸的mg数。计算公式如下：

W=（V-V1）×T×b×100/B×a

W为100 g样品中含抗坏血酸的mg数；V1为滴定空白用DCIP mL数；V为滴定样品用DCIP mL数；T为滴定度；B为测定用样品液mL数；b为样品液V总；a为样品g数。

（2） 取切碎叶片0.5 g，加少许草酸研匀放入容量瓶，加ZnSO41 mL，再加1 mL K4[Fe（CN）6]，最后用H2C2O4定容过滤。取10 mL过滤液放三角瓶中，用标定好的DCIP盐溶液滴定，至桃红色15 s不褪色即可，记下用量。取H2C2O410 mL，用DCIP作空白滴定。

2　结果与分析

2.1平基槭叶内生理指标的年动态变化

2.1.1平基槭叶内黄酮、绿原酸含量的变化

图1中显示， 从4月10日到6月10日，黄酮含量增长很快，达到第1个小高峰，为5.113％， 7月黄酮含量略有下降， 到8月10日达到第2个高峰，也是全年最高值，为5.998％，随后至10月含量下降为3.893％，总体变化为“M”状；而绿原酸含量变化不同于黄酮，它由生长初期的2.197％，到6月达最高峰，绿原酸含量为4.402％，总体表现先上升后下降的趋势，到10月时，绿原酸含量为2.336％，但还是比4月10日的高0.139个百分点。

图1　平基槭叶片内黄酮、绿原酸含量年变化

从表1可看出：6月和8月对黄酮含量影响最大，而4月影响最小。经方差分析和多重比较，可知4月与5、6、7、8、9、10月；5月与6、7、8、9月存在极显著差异，6、7月分别与8、9、10月存在极显著差异，8月与9、10月存在极显著差异。

6月对绿原酸含量影响最大，9、10月分别与其它各时期间存在极显著差异，而9月与10月之间不存在差异。所以从不同时期黄酮、绿原酸含量差异显著性可知，它们和生长时期有关。

表1　不同月份平基槭叶内黄酮、绿原酸的含量比较　（％）

2.1.2平基槭叶内叶绿素、Vc含量的变化

由图2可知， 4—5月叶绿素含量增加缓慢，5—6月急剧上升达4.327 mg・g-1，6月后开始下降，到8月又开始上升，至9月达到第2次高峰达3.991 mg・g-1，之后又急速下降。由图3可知，生长前期从4月开始Vc含量急剧上升，至7月达到全年最高，含量达最大值657.02 mg・（100 g）-1，之后开始缓慢下降，10月至低谷103.56 mg・（100 g）-1。

图2　平基槭叶内叶绿素含量年变化

图3　平基槭叶内VC含量

表4　不同月份平基槭叶内叶绿素、Vc含量的比较

由表4可知，6月与9月叶绿素含量影响最大，10月含量达到最低， 6月与4、5、7、8、10月存在极显著差异，10月与5、6、7、9月存在极显著差异，9 与10月存在极显著差异；平基槭叶Vc含量6、7、8含量最高，6、7、8月分别与4、5、9、10月之间存极显著差异，6、7、8月之间差异不显著，4、5、9、10月之间差异也不显著，由上表数据可以看出，平基槭叶内的叶绿素和Vc含量与生长时期有很大关系。

3　讨论与结论

结果显示:（1）黄酮和叶绿素的含量变化呈“M”状，黄酮含量变化在6月达到一个小高峰，7月稍有下降，然后在8月达到全年最高值；而叶绿素两个高峰却分别出现在6月和9月。绿原酸含量变化在6月达到全年的最高值，Vc含量7月达到峰值，两者都呈现先上升后下降的抛物线形。（2）在平基槭的整个生长发育过程中，6月和8月对其叶内黄酮含量的影响最大，4月对黄酮含量的影响最小，且于8月达到最高，含量高达6.109％；而6月绿原酸含量达到最高，含量高达3.963％；叶绿素含量6月达到最大，含量高达4.327 mg・g-1；Vc含量7月达到全年最高，含量高达657.02mg・（100 g）-1。

试验表明,不论是出现一个还是两个峰值，可以认为它们含量变化与生长时期有密切关系，6—8月是速生期，叶片发育成熟，水分养分供应充足，树势旺盛，生物合成的有效成分保持在较高水平；之后硬化期树木生长减缓，相应合成有效成分的底物也在减少，所以8月以后黄酮、绿原酸、叶绿素和VC含量基本上呈现下降趋势。

参 考 文 献

[1] 牛春山.陕西树木志[M].北京:中国林业出版社，1990：728.

[2] 庄向平，虞杏英,杨更生,等.银杏叶中黄酮含量的测定和提取方法[J].中草药，1992，23（3）：122-124.

[3] 关红菱，刘先林，龚坚，等.不同季节银杏叶中总黄酮的测定[J].中草药，1995，26（8）：445.

[4] 陈秀珍.银杏叶不同生长期总黄酮的含量测定（简报）[J].广西植物，1988，8（4）：363-364.

[5] 王兰珍，马希汉，王姝清,等.元宝枫叶有效成分动态变化的研究[J]. 西北林学院学报，1997，12（4）：68-71.

[6] 李合生.植物生理生化实验原理和技术[M].北京：高等教育出版社，1999：134.

[7] 乔富廉.植物生理学实验分析测定技术[M].北京：中国农业科学技术出版社，2002：90-91.

作者简介：董效文（1992-），男，内蒙古自治区扎兰屯市人，主要从事森林培育工作。E-mail：guoaihua@163.com

收稿日期：2015-11-02

文章编号：1002-0659（2016）01-0004-03

中图分类号：S718.43

文献标识码：A