食品微生物检验内容及检测技术研究

食品微生物检验内容及检测技术研究

刘 杨 兴安盟食品药品检验所

随着我国综合国力的不断发展，社会生产力不断提高，人们的生活也变得越来越富裕，对美味食品的追求越来越高，在吃上投入的资金越来越多。鉴于此，一些不良商家以次充好、以假乱真，使食品安全问题频发，严重影响食品市场的正常秩序，随着一系列食品安全问题的发生，食品安全问题引起全社会的高度重视。为保证人民的人身安全，必须加大对食品安全检测的检测力度，防止食品安全问题发生，为人民群众创造良好的食品市场环境。经过政府和各科研单位的不懈努力，已研发出多种食品微生物检测技术，为食品安全作出极大的贡献。本文对高效液相色谱技术在快速检测食品微生物中的应用进行研究，从食品微生物检验内容及检测技术相关概述、变性高效色谱技术的原理、变性高效液相色谱技术特点和变性高效液相色谱技术在微生物方面的应用4方面进行具体的阐述。

食品微生物检验内容及检测技术相关概述

民以食为天，随着人们对吃的追求越来越高，市场上的食品变得多种多样、让人眼花缭乱，许多不法商贩从中嗅到了巨大的“商机”，想着大发食品的不义之财，以至于很多的过期回炉食品、假冒伪劣等不安全食品流入市场，威胁人们的人身安全。近年来食品安全问题频发，对人们的人身财产安全造成极大的危害，也酿成许多悲剧，引起社会各界的高度关注，为防止食品安全问题发生，保障人们的人身财产安全，社会各界对食品安全检测技术的研究投入极大，各科研单位经过多年努力，研究出有效的食品微生物检验内容和检测技术。

其中，食品微生物的检验内容主要有污染程度指示菌检验、致病菌检验，食品微生物的检测技术主要有分子生物学检测、抗体检测和免疫分析法检测、代谢学检测。目前我国食品微生物检测技术应用最广泛，同时也最便捷、准确度最高的检测技术是变性高效色谱技术，如今变性高效色谱技术已在食品微生物检测领域中广泛应用。本文以变性高效色谱技术为例，对食品微生物的检测技术进行简要分析。

变性高效色谱技术的原理

变性高效色谱技术分析原理较复杂，在高压条件下，溶质在固定相和流动相间进行连续多次交换，高效液相色谱技术利用溶质在两相间分配系数、亲和力、吸附力或分子大小不同引起排阻作用的差别使不同溶质得以分离，从而达到食品检测的目的。

变性高效液相色谱技术特点

变性高效液相色谱技术具有自身的特点，具体表现为：第一，检测结果准确度高，对于已知突变，准确度大于99%，对于未知的突变，准确度大于96%；第二，变性高效液相色谱技术的检测能够准确可靠地检测低水平的突变，灵敏度非常高，能够对食品样品中至少1/20的基因型进行检测；第三，能够分析异质性的样本从而检测混合样品；第四，由于该技术使用仪器进行自动化操作，因此操作容易；第五，检测过程中消耗品价格便宜，同时检测速度快，质量高，因此性价比非常高。

另外，变性高效液相色谱技术与其他技术如单链构象多态性和变形梯度凝胶电泳法相比，具有很多优势，它能够进行自动化控制，属于一种新型基因突变筛查技术，除PCR外，无需购买特殊试剂，也不需进行PCR引物修饰或者进行其他处理等，因此方便使用。

变性高效液相色谱技术在食品微生物方面的应用

在农产品微生物领域中的应用

随着市场竞争的日益激烈，农作物生产者为提高农产品产量而大量使用药物，生产出的食品带有药性，导致耐药性的微生物就相应出现，对人体造成极大危害。由于缺乏快速准确识别致病微生物的有效检测技术和有效临床手段，因此抗微生物治疗遇到很大困难。而变性高效液相色谱术在微生物耐药基因突变检测中得到广泛应用，能对耐药性相关的基因突变进行检测，且可靠性较高，为临床快速检测未知致病细菌奠定一定的基础。

在混合微生物样品的分离鉴定中的应用

食品中含有多种微生物，因此在检测和检定的工作中常涉及对混合样品中微生物的检测。对于那些含有多种混合的微生物的食品，在检测的过程要中要对所有的微生物进行检测，因此需要易操作且快速的变性高效液相色谱技术。通过变性高效液相色谱技术对DNA序列差异的特性结合细菌进行检测，然后在属和种的水平上鉴定细菌，对于难以鉴定的还需利用DNA靶点进行具体分析，由于细菌种类不同，会显示出特异的DHPLC峰型，准确地分离和鉴定食品中的微生物。变性高效液相色谱技术不仅能够应用于食物中的微生物检定，在食物中真菌、寄生虫和病毒等的检验过程中也发挥着非常重要的作用，可通过识别微生物和抗药基因突变保证食品的安全性。与传统的食品微生物检验技术相比，变性高效液相色谱技术具有很多优势，可弥补传统仅依靠表型进行识别的不足，可靠地从菌株水平来识别微生物，且检验检定的准确度高，应用前景非常好。