梅毒实验室检测研究进展

●卢欣 王金霞 尚峨 王迎

梅毒实验室检测研究进展

●卢欣 王金霞 尚峨 王迎

目前梅毒的实验室检测技术主要分为病原体检测、血清学检测、分子生物学检测三类，各有其优缺点，本文就梅毒实验室检测技术做一综述。

梅毒；检测；进展；病原体；血清学；分子生物学

梅毒（Syphilis）是由梅毒螺旋体（Treponema pallidum，TP）引起的一种慢性、接触性人类性传播疾病，与结核、麻风并称世界三大慢性传染病。梅毒的防治主要在于早发现、早诊断和早治疗。目前临床上主要依据患者的流行病学史、临床症状和体征、实验室检测等三方面的综合信息给出梅毒的诊断，而梅毒导致的皮肤损害等临床症状不典型，极易与其他疾病混淆，其实验室检测便显得尤为重要。

1 梅毒病原体检测

梅毒病原体检测是早期梅毒诊断的主要方法。特别是在一期和二期梅毒早期患者体内梅毒螺旋体抗体尚未产生或数量较少时，病灶处梅毒螺旋体的检测便显得尤为重要。检测包括暗视野显微镜检查，活体组织检查和多功能显微诊断仪检查等方法。

（1）暗视野显微镜（Dark field microscope，DFM）法 用500×暗视野显微镜观察，在暗背景下梅毒螺旋体呈白色，运动快速或缓慢围绕长轴旋转，此法要求所用物镜的数值孔径须在1.00-1.25之间，且镜头、载玻片、盖玻片必须清洁无尘。

（2）免疫荧光染色法 根据抗原抗体特异性反应，将梅毒螺旋体用异硫氰酸荧光素标记的抗梅毒螺旋体抗血清或单克隆抗体染色后，在荧光显微镜下可观察到黄绿色荧光。

2 梅毒血清学试验

梅毒血清学试验是梅毒诊断的最主要的实验室检查方法，根据所用抗原不同可分为两类。

（1）梅毒螺旋体非特异性抗体试验用心磷脂作抗原，测定血清中抗心磷脂抗体，即反应素。包括康、瓦氏试验，性病研究实验室试验( VDRL) ，快速血浆反应素环状卡片实验( RPR) ，不加热血清反应素试验(USR) ，甲苯胺红不加热血清反应素试验(TRUST)

其中最常用TRUST。由于反应素并非只存在于梅毒患者体内，在很多疾病过程中机体也会产生类似抗原抗体，也可造成假阳性的结果，如疟疾、结核和麻风等; 此外，怀孕、老年人、结缔组织疾病、肿瘤和吸毒等都可能造成非螺旋体检查的假阳性。目前多数医院列作梅毒的常规筛查试验。由于患者经治疗后反应素消失或阴转，因此这类试验可观察疗效，复发及再感染，但其敏感性高而特异性较低。此类试验适于二期梅毒，而不适于诊断一、三期梅毒，包括潜伏梅毒、神经梅毒。

（2）梅毒螺旋体特异性抗体试验用活的或死的梅毒螺旋体或它的某些特异肽段来作抗原测定抗螺旋体抗体。传统方法包括荧光密螺旋体抗体吸收试验(FTAABS)，梅毒螺旋体血球凝集试验(TPHA) ，梅毒螺旋体明胶凝集试验(TPPA)，梅毒螺旋体酶联免疫吸附试验(TP-ELISA) ，这类试验敏感性和特异性均高，一般用作确认试验。检测血清中抗梅毒螺旋体IgG 或IgM 抗体。该抗体即使患者经过足够治疗，仍能长期存在，甚至终身不消失，血清反应持续存在阳性，因此，不能用于观察疗效。

3 分子生物学检测

随着分子生物学技术的发展，应用聚合酶链反应（PCR）检测梅毒螺旋体DNA已在临床上逐步得到应用。PCR 诊断一期梅毒的灵敏度最高。是目前诊断梅毒螺旋体的先进方法。此法主要是针对编码梅毒螺旋体特异性抗原的DNA开放编码区而建立的体外DNA 扩增试验，检测标本为血（血清、全血）、羊水、脑脊液、尿、皮损材料（分泌物、组织）等。PCR技术是梅毒血清学检测的有益补充。但当前的PCR技术仍存在引物的非特异性、对部分标本敏感度低、实验室及操作人员要求较高等缺点，使应用受到了一定限制。由于梅毒基因有多个分型，即使采用常规的PCR 方法检测也可能出现假阴性。

4 小结及展望

梅毒的实验室检测方法各有其优缺点，但目前还没有任何一种方法能完全满足临床要求，但我们相信随着检测技术的不断发展，必将出现一种简便、快速、准确、低成本的新型诊断方法，使梅毒患者得以早诊断、早治疗，最终全面控制梅毒流行。

（作者单位：北京中医药大学东直门医院）

[1]CABE A，ROLLIN B，PIERRE-FRANCOIS S，et a1．Reemergence ofsyphilis in Martinique，2001-2008［J］． Emerg Infect Dis，2010，16( 1) : 106-109．

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