□ 冯 航 西安文理学院 生物与环境工程学院
洗洁精对蚕豆根尖细胞的微核诱导
□ 冯 航 西安文理学院 生物与环境工程学院
微核是真核生物细胞中一种异常结构,往往是细胞受辐射或化学药物的作用而产生的。已经证实微核率的大小是和用药的剂量或辐射累积效应呈正相关,这一点和染色体畸变的情况一样。所以可用简单的间期微核计数来代替繁杂的中期畸变染色体计数。
由于大量新的化合物的合成,原子能应用,各种工业废弃物的排出,使人们需要一套高度灵敏、操作简单的测试系统来监视环境变化。只有真核的测试系统更能直接推测诱变物对人类或其他高等生物的遗传危害,在这方面,微核测试是一种比较理想的方法。
随着人们生活水平的不断提高,各种洗涤剂相继问世。人工合成的洗涤剂成本低,去污强,使用范围越来越广泛。但是洗涤剂可通过皮肤渗透到血液中,使细胞染色体畸变,此外,合成洗涤剂废水排入水体后也会对环境造成破坏。利用蚕豆根尖作为实验材料进行微核测试,可准确显示各种处理诱变的效果。
实验材料
蚕豆种子、洗洁精、纱布,甲醇、冰醋酸、醋酸洋红、盐酸和硫酸铜均为分析纯。
实验方法
1 诱导萌发
将蚕豆种子在自来水中浸泡2 d,使其充分吸胀。将吸胀的种子平铺在湿纱布上保湿培养2 d,待大部分初生根长至2 cm左右即可用来检测。
2 根尖处理
每组选取生长良好,根长一致的6粒种子,分别放入待测液为自来水(阴性对照)、稀释500倍的洗洁精溶液、稀释300倍的洗洁精溶液、稀释100倍的洗洁精溶液、硫酸铜溶液(阳性对照)的溶液中,浸没处理24 h。
3 根尖恢复培养
将上述处理后的种子用蒸馏水冲洗3次,每次5 min,放入盛有自来水的培养皿中室温培养24 h。
4 镜检
将恢复培养后的种子取根尖固定、酸解后用醋酸洋红染色并压片。每组取1个效果较好的根尖临时装片,每个根尖计数500个细胞中的微核数并进行记录。
洗洁精对蚕豆根尖的影响
从实验可以看出,洗洁精处理过的蚕豆,表皮和根尖颜色、形态都发材料,考虑使用动物材料,比如小鼠、家兔等。这样更接近于人类生活,有更大的实际研究价值。
2 染色材料
染色材料不一定局限于一种,可以用其他生物染料来代替,比较染色效果,用染色效果最佳的一种染料。
3 染色时间
本次实验中,根尖染色时间略短,导致根尖制片后观察效果不佳,难以辨认微核。鉴于此实验现象及结果,建议可以适当延长染色时间,以便于观察。
4 制片方法
制作临时装片的技术方法可以有所改进,压片时一定要将根尖捣碎,生了不同程度的变化。表皮发黑、根尖发黄、变黑以及变软甚至腐烂。分析原因可能是蚕豆根尖经洗洁精诱变处理后,细胞发生脱水,从而导致根尖细胞死亡。
洗洁精对蚕豆根尖细胞微核率的影响
洗洁精对蚕豆根尖细胞微核率的影响结果见表1,由表1可知,不同浓度的洗洁精溶液对蚕豆根尖均具有一定的影响。浓度越高,微核率越高,危害越大。
实验过程
1 实验材料
可以用洋葱或大蒜作为实验材料进行微核诱导,也可以不局限于植物使得细胞完全分散开来,以便于后期镜检。不一定完完全全的按照查找资料上的方法来进行,实验过程中头脑要保持灵活,不断思索,适当改进实验方法。
实验结果
洗洁精对蚕豆根尖具有一定的危害性,可能是其改变了蚕豆根尖细胞膜的通透性,利于有害物质进入细胞,从而对细胞产生影响。因此,洗洁精作为一种家用洗涤剂,具有潜在的危险性,应当引起我们的重视。
冯航(1982-),女,陕西长安人,硕士,实验师,研究方向:药用植物的开发利用。