芍药甘草汤的镇痛抗炎作用研究

孙 婷，姜建国，张广钦

（1．河北省药品检验研究院，河北 石家庄 050011； 2．中国药科大学临床药学教研室，江苏 南京 210009）

芍药甘草汤的镇痛抗炎作用研究

孙 婷1，姜建国1，张广钦2

（1．河北省药品检验研究院，河北 石家庄 050011； 2．中国药科大学临床药学教研室，江苏 南京 210009）

目的 研究芍药甘草汤的镇痛和抗炎作用，探讨药物间的相互作用。方法 采用二甲苯致小鼠耳肿胀，蛋清致小鼠足肿、热板法、醋酸扭体法。结果 芍药甘草汤显著延长小鼠热板法的痛阈值，降低醋酸所致小鼠扭体反应次数；抑制二甲苯所致小鼠炎症，但对蛋清诱导的炎症无效；芍药的作用类似于芍药甘草汤，但药效较弱；甘草无明显的抗炎镇痛抗炎作用。结论 甘草芍药汤有明显抗炎、镇痛作用，其与甘草提高芍药的作用有关。

芍药甘草汤；镇痛；抗炎

芍药甘草汤为常见的经典名方(以下简称本方)，源于医圣张仲景的《伤寒论》，主治经筋挛急、脘腹疼痛等症[1]。本方由芍药、甘草组方，药少而力专，当属治痛第一方。甘草别名甜草根、密草，来源于豆科植物甘草Glycyrrhiza uralensis Fisch．的根及根茎，主治脾胃虚弱、倦怠乏力、心悸气短、咳嗽痰多，可缓解药物毒性。现代药理学研究认为[2]，甘草有镇静、抑制末梢神经的作用，可直接作用于平滑肌和骨骼肌而使其弛缓，消除挛急。白芍别名杭芍、亳芍、川芍，来源于毛茛科植物芍药White Paeony Root．的根，可平肝止痛、养血调经、敛阴止汗，主治头痛眩晕、胁痛、腹痛、四肢挛痛、血虚萎黄、月经不调、自汗、盗汗。现代药理学研究认为，白芍对疼痛中枢和脊髓反射弓有镇静作用[2]。本方对中枢性、末梢性横纹肌的挛急均有镇静作用[3]。此外，甘草芍药汤治疗小儿腹性癫痫，特别是对肝脾不和、气血失调致胸胁不适，脘腹拘急疼痛，手足挛急等症尤为有效，使之成为治疗临床各科疾病引起疼痛的首选方剂。近来研究发现，酸敏感离子通道（ASICs）参与疼痛反应，是镇痛药作用的一个新靶点[4]。本研究中应用不同的镇痛模型，探讨了本方的作用机制，分别比较甘草芍药汤与各单味药的镇痛效果，为在酸敏感离子通道上研究其作用机制提供参考。

1 材料

1．1 动物、药品与试剂

小鼠，昆明种，体重18～22 g，雌性，由中国药科大学动物房提供白青龙山动物繁殖场，合格证号为SCXK(苏）2004－0018，饲养条件为温度18～24℃，相对湿度70%。炙甘草和生白芍均购于江苏省药材公司，经中药学院禹志领副教授鉴定确认。试药生产批号为060318；二甲苯（分析纯，南京化学试剂厂，批号910911）；冰醋酸（分析纯，南京化学试剂厂）；生理盐水自配。

1．2 方药提取

取药材，置圆底烧瓶，加水浸渍12 h，回流提取2次，每次1 h，合并滤液，加热浓缩至相当于每1 mL含1．08 g原药材，得单方药。取甘草芍药汤（生白芍、炙甘草组方），按2∶1比例配成处方，置圆底烧瓶，加水浸渍12 h，回流提取2次，每次1 h，合并滤液，加热浓缩至相当于每1 mL含1．08 g原药材，得复方药。

2 方法与结果

2．1 各剂量本方对小鼠热板法致痛的影响

参照文献[5]，将小鼠放入恒温水浴烧杯中，温度控制在(55±5)℃，记录自放入烧杯至出现舔足所需时间，作为该鼠痛阈值。凡痛阈小于5 s或大于30 s或跳跃者弃之不用。筛选出小鼠40只，随机分为生理盐水组(0．2 g／mL)、低剂量组(0．093 g／mL)、中剂量组(0．0186 g／mL)、高剂量组(0．37 g／mL)，各10只。每组每日灌胃1次，连续5 d，与末次给药30，60，90，120 min后，分别记录疼痛反应时间，测定不同时间各鼠痛阈平均值，计算用药后痛阈提高的百分率。数据分析采用 t检验观察组间差异。结果见表1。可见，末次给药后1 h，芍药甘草汤对延长小鼠的痛阈值达到最大效果，从而可选原药材2 g／kg作为以下试验的给药剂量。

表1 各剂量甘草芍药汤对小鼠热板法痛阈的影响（s，s，n＝10）

表1 各剂量甘草芍药汤对小鼠热板法痛阈的影响（s，s，n＝10）

注：与生理盐水组比较，*P＜0．05，＃P＜0．01。下表同。

组别给药后给药前生理盐水组低剂量组中剂量组高剂量组20．29±12．71 15．75±2．83 25．73±7．06 20．83±6．71 30 min 22．55±8．15 35．97±36．89 67．72±48．81＃58．28±33．72＃60 min 33．81±17．29 48．26±50．31 63．56±47．02*69．48±43．54＃90 min 27．63±16．41 49．13±29．3*78．92±41．55＃83．78±41．75＃120 min 30．75±18．81 41．95±21．14 82．35±30．73＃78．48±35．55＃

2．2 各剂量本方对小鼠冰醋酸致痛作用的影响

取小鼠40只，雌性，分组同2．1项下方法，连续灌6 d，于末次给药后60 min，各鼠腹腔注射0．6% 醋酸溶液每10 g体重0．1 mL，观察并记录注射醋酸溶液后20 min内出现扭体反应 (腹部收缩内凹，伸展后肢，臀部抬高，蠕行)的次数及时间，计算药物的镇痛百分率。抑制率(%)＝(对照组平均扭体次数－给药组平均扭体次数)／对照组平均扭体次数×100%。数据组间差异采用 t检验。结果见表2。可见，甘草芍药汤各剂量对冰醋酸小鼠扭体反应均有明显的抑制作用。

表2 甘草芍药汤对冰醋酸致小鼠扭体反应的影响（n＝10）

2．3 本方及各组分对热刺激致痛的影响

将2．1项下筛选的小鼠40只，随机分为生理盐水组(0．2 g／mL)、甘草组(0．36 g／mL)、白芍组(0．73 g／mL)、芍药甘草汤组(1．08 g／mL)，各10只。每组每日灌胃1次，连续5 d，末次给药1 h后，测定疼痛的反应时间。方法同2．1项。结果见表3。可见，甘草芍药汤中甘草对延长小鼠的痛阈几乎没有作用，主要起作用的为生白芍，在末次给药后1 h可显著抑制小鼠热敏感疼痛。

表3 甘草芍药汤中单、复方对小鼠热板法疼痛阈的影响（s，s，n＝10）

表3 甘草芍药汤中单、复方对小鼠热板法疼痛阈的影响（s，s，n＝10）

给药后甘草组白芍组芍药甘草汤组18．67±6．36 15．47±6．14 18．62±6．92 n．80 22．33±7．11 43．32±40．85 65．29±32．90＃60 min 17．55±5．03 19．12±6．83 39．05±31．46*50．44±25．44＃90 min 16．70±4．12 20．36±5．33 38．49±28．14*53．38±25．91＃120 min 17．37±4．52 18．93±7．31 41．38±32．34*65．68±32．45＃

2．4 本方及各组分冰醋酸致小鼠扭体反应的影响

取小鼠40只，分组同2．3项下方法，每组灌胃剂量相同，每日灌胃1次，连续灌6日，于末次给药后60 min，各鼠腹腔注射0．6% 醋酸溶液每10 g体重0．1 mL，观察并记录注射醋酸溶液后20 min内出现扭体反应，方法同2．2项。结果见表4。可见，甘草芍药汤中白芍与复方均对冰醋酸所致小鼠扭体反应有明显抑制作用，但复方更强烈，表明甘草与白芍复方配伍可增强对小鼠扭体疼痛的抑制作用。

表4 甘草芍药汤中单、复方对冰醋酸致小鼠扭体反应的影响（n＝10）

2．5 本方及各单味药对二甲苯致炎作用的影响

参照文献[5]，取小鼠40只，分组同2．3项下方法。每组每日灌胃1次，连续5 d，末次给药30 min后，用微量进样器于每只小鼠右耳内外两面涂100%二甲苯20 μL致肿，左耳不涂为正常耳。1 h后脱颈椎处处死小鼠，用9 mm打孔器冲下左耳和右耳同一部位的圆片，于分析天平上称重。右耳质量减去左耳为肿胀度，用 t检验比较组间差异的显著性，并按抑制率（%）＝（对照组肿胀度－用药足肿胀度）／对照组肿胀度×100% 计算。结果见表5。可见，芍药甘草汤组对二甲苯致小鼠耳廓肿胀有显著性抑制作用，白芍组对其有抑制作用，表明甘草与白芍配伍可增强抑制二甲苯致小鼠耳肿胀。

表5 甘草芍药汤及各单味药对二甲苯致小鼠耳廓肿胀的影响（n＝10）

2．6 本方及各单味药对蛋清致炎作用的影响

取昆明种小鼠40只，分组如2．3项下方法。每组每日灌胃1次，连续灌胃5 d，最后1次给药后1 h于每鼠右后跖皮下注射（从足掌心向踝关节方向进针）10%鸡蛋清溶液50 μL，3 h后脱颈处死，沿踝关节的标记线剪下两组，称取质量，按抑制率(%)＝（右足质量－左足质量）／左足质量×100%计算。计量资料采用 t检验。结果见表6。可见，甘草芍药汤对蛋清引起的小鼠后足趾肿胀有抑制作用，但结果并不明显。

表6 甘草芍药汤对蛋清致小鼠后足趾肿胀的影响（n＝10）

3 讨论

本试验结果表明，在热板和醋酸扭体疼痛模型中，甘草无明显镇痛作用，芍药甘草汤有明显镇痛作用，芍药也有明显镇痛效果，但明显弱于芍药甘草汤，说明甘草与芍药配伍后能明显增强芍药的镇痛作用。在二甲苯和鸡蛋清致炎模型中，芍药甘草汤有明显的抗炎作用，甘草和芍药分别也显示了不同的抗炎作用，但与芍药甘草汤相比，两药合用无明显的抗炎作用。且该药的药物组成经长期临床验证，疗效确切[6]。

药物之间的配伍关系可归纳总结为7个方面，称为“七情”。根据七情理论，在功效方面有某种共性的药物配合应用，辅药能提高主药的疗效，称为相使配伍。据此，芍药与甘草的配伍属相使配伍。在许多著名方剂中常有二者配伍，以协同增效，如芍药甘草汤、芍药汤、小建中汤等，可养血益阴、缓肝和脾、缓急止痛，在临床也有较好疗效[7]，常用于炎症性疾病和各种痛症的治疗[8]。张保国等[9]的研究显示，日本将芍药甘草汤作为汉方镇痛的有效方剂，不论寒热虚实皆可应用。近年来研究认为[10]，在一些外伤、水肿及其他一些疾病引起的疼痛发应时，往往是由于组织损伤局部产生、释放前列腺素(PG)、白三烯、组胺等致炎致痛因子，其中PG是很强的致炎致痛因子。芍药甘草汤既可显著镇痛，又可明显降低动物血清和脊髓中PGE2浓度，提示抑制PG合成是芍药甘草汤的镇痛机制之一。此外，一氧化氮(NO)是近年来发现的一种新第2信使神经递质，是细胞间信息传递的重要调节因子。其发挥作用的机制之一是提高靶细胞的环鸟苷酸(cGMP)水平，即NO－cGMP途径。芍药甘草汤的镇痛部位既在外周神经末梢，亦可能在中枢神经，其镇痛作用机制可能与一氧化氮有关。

本研究结果显示，甘草与芍药配伍后明显增强镇痛作用，这两种模型均与酸敏感离子通道的激活有关，且抗炎作用无明显的增强作用。因此推测，甘草与芍药配伍对镇痛的增强作用，可能是通过作用与酸敏感离子通道上的不同部位，从而改变酸敏感离子通道的开放，达到增强对酸敏感离子通道的阻断作用，从而增加镇痛效果，其作用与抗炎作用无关。

[1]白 刚．中药方剂研究与应用大全[M]．北京:中国科学技术出版社，1995:396．

[2]刘渡舟 ．当代医家论经方[M]．北京:中国中医药出版社，1993:587．

[3]杨 磊，王晓明．容积敏感性外向整流氯离子通道的调节机制及药理学探讨[J]．中国药业，2014，23（3）：1－3．

[4]张 政，蔡炳祥，关永源．酸敏感离子通道的研究进展[J]．中国药理学通报，2005，21(12)：1 414．

[5]陈 奇．中药药理研究方法学[M]．北京:人民卫生出版社，1993:360．

[6]洪建华，张本全，梁建萍．芍药甘草汤镇痛作用的实验研究[J]．实用中西医结合临床，2008，8(5)：84．

[7]毛晓健，丁 雄，周述华，等 ．芍药、甘草配伍前后对小鼠肠推进及醋酸致痛的影响[J]．云南中医学院学报，1998，10(21)：42．

[8]刘陶世，赵新慧，段金廒，等．芍药甘草汤总苷抗炎镇痛作用的配伍研究[J]．中药新药与临床药理，2007，18(6)：427．

[9]张保国，刘庆芳．芍药甘草汤方剂学实验研究[J]．中成药，2012，34(7)：1 354－1 358．

[10]崔 琳，杨日芳，郑建全，等．敏感离子通道抑制剂的研究进展[J]．中国药物化学杂志，2006，16(2)：114．

Analgesic and Anti－Inflammatory Efficacy of Paeornia and Glycyrrhiza Dicoction

Sun Ting1,Jiang Jianguo1,Zhang Guangqin2
(1．Hebei Institute for Food and Drug Control,Shijiazhuang,Hebei,China 050011; 2．Department of Clinical Pharmacy,China Pharmaceutical University,Nanjing,Jiangsu,China 210009)

Objective To study the analgesic and anti－inflammation efficacy of the Paeornia and Glycyrrhiza Dicoction and to investigate the interaction between drugs．Methods Hot plate and writhing test were applied to observe analgesic effect in mice;the models of the ear swilling and paw edema of mice were adopted to assay anti－inflammation．Results The Paeornia and Glycyrrhiza Dicoction obviously prolonged pain latency on hot plate,decreased the writhing response and inhibited the paw edema of mice,but no effect on the pedal swelling rate induced by egg white．Paeornia showed similar to effect of Paeornia and Glycyrrhiza Dicoction,but its efficacy was weak．Glycyrrhiza had not the analgesic effect,but it could enhance the analgesic effect of paeornia．Conclusion Paeornia and Glycyrrhiza Dicoction has anti－inflammation and analgesic efficacy Glycyrrhiza elevates the analgesic effect of paeornia．

Paeornia and Glycyrrhiza Dicoction;analgesic efficacy;anti－inflammation

R285．5；R289．5

A

1006－4931(2016)03－0018－03

孙婷（1983－），女，硕士研究生，主管药师，主要从事药品检验及质量标准研究工作，（电子信箱）122547652＠qq．com；张广钦，主要从事临床药学工作，本文通讯作者，（电子信箱）njzhanggq＠163．com。

2015－02－05；

2015－06－19)