社区慢性Ⅱ型DM肾脏标志物与HbA1c联合检测的临床应用

张清明，高建民(、西安交通大学公共卫生学院，陕西西安7006；2、宝鸡市第二中医医院检验科，陕西宝鸡72300)



社区慢性Ⅱ型DM肾脏标志物与HbA1c联合检测的临床应用

张清明1，2，高建民1
(1、西安交通大学公共卫生学院，陕西西安710061；2、宝鸡市第二中医医院检验科，陕西宝鸡721300)

摘要：目的评价血Cys-C，尿β2-MG，尿mAlb与HbA1c联合检测对社区慢性Ⅱ型DM肾脏功能影响的可行性。方法将社区慢性Ⅱ型DM以HbA1c分三个不同浓度水平组，并以其组下的血Cys-C，尿β2-MG，尿mAlb与观察对照组进行统计分析及联合检测敏感度的χ2分析。结果观察组的血Cys-C，尿β2-MG和尿mAlb随HbA1c升高而增加，以观察组C组最为显著（F=27.1；13.62；38.11，P<0.001）；观察组的血Cys-C，尿β2-MG和尿mAlb异常检出率随HbA1c升高而增加，以观察组C组升高最为显著，差异具有显著统计学意义（χ2=14.162，P<0.001），三项联合检测指标异常率显著高于单项检测，差异具有统计学意义（χ2=7.623，P<0.001）。结论社区慢性Ⅱ型DM应加强血Cys-C，尿β2-MG，尿mAlb与HbA1c联合检测，增强其联合检测指标对慢性Ⅱ型DM检测指标异常率的敏感度，以减少单项检测的局限性，有利于社区慢性Ⅱ型DM肾脏功能损伤的判断，值得临床重视与推广。

关键词：ⅡDM；HbA1c；血Cys-C；尿β2-MG；尿mAlb

Ⅱ型DM是一组由多病因引起的以慢性高血糖为特征的代谢性疾病，其糖尿病肾病是其最重要的常见并发症，病理损伤是由微循环障碍和微血管基底膜增厚，毛细血管间硬化症，以肾小球损伤为主的肾脏病变，包括膜细胞增生、细胞外基质增多和肾小球硬化，发病机制尚未明确，但与遗传、血糖、血脂、血压、药物、免疫及血管紧张素等密切相关[1]。而糖化血红蛋白是人体血液中红细胞内的血红蛋白β链-N末端缬氨酸的游离氨基与不同碳水化合物糖基化而结合形成的产物，英文代号为HbA1，亚组分（HbA1a1，HbA1a2，HbA1b和HbA1c）这些亚组分总称为HbA1，其HbA1c占HbA1 80%。

1　资料与方法

1.1.1一般资料收集2013年8月-2012年12月本院社区确诊为慢性Ⅱ型DM 163例(以1999年10月WHO制定的糖尿病诊断标准)；男84例，平均年龄(62.3±6.7)，女79例，平均年龄(61.8±7.0)；社区老年健康体检者52例，男29例，平均年龄(60.5±6.8)，女23例，平均年龄(63±8.1)各组性别与年龄之间无统计学意义(P>0.05)。两组研究对象均经超声，CT，心脑电图，生化检验联合高职医生体格检查，无肿瘤疾病、免疫疾病、心脑血管疾病、肝肾疾病及其他系统疾病，无酗酒、外伤及近期手术。

1.1.2所有观察对象均真空静脉采集样本，空腹静脉EDTA-K2全血2ml和生化静脉血3m l（37水浴15~20min，3500r/min离心10min分离血清；尿标本收集清晨空腹尿10ml，3500r/min离心10min取上清液，均案SOP文件规范操作。

1.2仪器与试剂

1.2.1仪器干式免疫散射色谱仪(挪威Axisshield PoC AS公司)；贝克曼D×C800型全自动生化分析仪。

1.2.2试剂HbA1c批号：10166025(微粒色谱法)挪威Axis-shield PoC AS公司；Cys-C批号：130509(胶体金颗粒免疫法)重庆中元生物技术公司；β2-MG批号：20130718(胶乳增强免疫比浊法)宁波瑞源生物科技公司；U-mAlb批号：20130609(胶乳增强免疫比浊法)宁波瑞源生物科技公司。校准品与质控品均采取厂家配套自带，采用Westgard规则的±12s；±13s；±22s和±31s质控规则。

1.3研究方法

1.3.1诊断标准以1999年10月WTO制定的糖尿病诊断标准：空腹血糖≥7.0mmol/L或餐后2h血糖≥11.1mmol/L；经糖耐量确认为糖尿病患者[1]。

1.3.2结果异常判断标准HbA1c≥6.6%，血Cys-C≥1.55（mg/L），尿β2-MG≥0.30（mg/L），尿mAlb≥30.0（mg/L）；联合检测时任何一项异常即联合检测异常。

1.3.3分组方法见表3。将社区慢性Ⅱ型DM以国际糖尿病联盟2005年糖尿病治疗指南要点解读[2]和作者临床工作经验与临床医生的沟通中确定(其临床医生预期治疗目标自定

1.3.4研究方法对两组研究对象均进行全血HbA1c，血清Cys-C，尿β2-MG和尿mAlb联合检测，并将社区慢性Ⅱ型DM以HbA1c分三个不同浓度水平组，并以其组下的血Cys-C，尿β2-MG，尿mAlb与健康对照组进行统计分析。

1.4统计学处理采用统计学软件SPSS 19.0。计量资料数值以（±s）表示，两组均数比较采用t检验，多个均数比较采用F分析，两样本率比较采用χ2，相关性检验：正态分布资料用Pearson相关分析，P<0.05为差异具有统计学意义，P<0.01为差异有统计学意义。

2　结果

2.1各组下血Cys-C，尿β2-MG和尿mAlb结果比较见表1。血清Cys-C各组之间比较，尿β2-MG各组之间比较，尿mAlb各组之间比较，差异均有显著统计学意义（P<0.001）。

2.2各组下血Cys-C，尿β2-MG和尿mAlb单项及联合检测结果异常率比较见表2。检测结果显示随着HbA1c水平的升高各项指标异常的检出率升高，以观察组C组升高最为显著，差异具有统计学意义（χ2=14.162，P<0.001），三项联合检测指标异常率显著高于单项检测，差异具有统计学意义（χ2= 7.623，P<0.001）。

表1　各组下血Cy s-C，尿β2-MG和尿mA l b结果比较（±s）

表1　各组下血Cy s-C，尿β2-MG和尿mA l b结果比较（±s）

检测项目　　对照组（n=52）A组（n=56）　B组（n=63）　C组（n=44）　F　P Cys-C（mg/L）β2-MG（mg/L）U-mAlb（mg/L）0.67±0.09 0.19±0.11 17.76±6.78 0.85±0.15 0.26±0.21 31.53±18.69观察组1.48±0.64 1.18±0.62 72.17±30.92 2.14±0.95 1.31±1.08 152.55±103.44 27.10 13.62 38.11 0.000 0.000 0.000

表2　各组下血Cy s-C，尿β2-MG和尿mA l b单项及联合检测结果异常率比较[n（%）]

3　讨论

血清胱抑素C（Cys-C），又名γ-球蛋白，是一种分子量为13.3KDa的含120个氨基酸残基一种分泌蛋白质，等电点为9.3，所有的有核细胞均可产生，生成速度稳定，不受炎症反应、胆红素、溶血及三酰甘油的影响，且与性别、年龄、肌肉量无关。它主要分布于细胞外液，如精液、脑脊液、血液、尿液、胸水、唾液等。由于Cys-C能被肾小球自由滤过，然后在近曲小管上皮细胞内分解代谢，不被肾小管重吸收和分泌，使肾脏成为清除循环中Cys-C的唯一场所。且Cys-C生成速度和血浓度稳定，不受其他病理变化影响，血清Cys-C水平主要由GFR决定，所以，Cys-C是反应早期GFR变化的一个理想、可靠的内源性标志物[3]。β2-MG是由淋巴细胞、血小板、多型核白细胞产生的广泛存在于血浆、尿液、脑脊液以及唾液中的一种小分子球蛋白，分子质量为11800。正常人β2-MG的合成率及从细胞膜上的释放量相当恒定，由于分子量小且不和血浆蛋白结合，可从肾小球自由滤过，99.9%在近端肾小球吸收，并在肾小球滤过功能下降时，血β2-MG水平上升，故而正常情况下β2-MG的排出是微量的，而尿液中排出β2-MG增高，则提示肾小管损害或滤过负荷增加，β2-MG含量的测定不受年龄，性别和肌肉组织多少等因素的影响，在肾脏损伤的评估中更为敏感，有较好的应用价值[4]。尿微量清蛋白是由肝脏分泌的一种中分子蛋白质，带负电荷，绝大多数不能透过滤网膜。健康人通过肾小球毛细血管网滤入尿中的少量血浆清蛋白99%被近曲小管重吸收。故尿中几乎不含清蛋白，当肾小球滤过膜的通透性增加或肾小球的重吸收功能受损时，尿微量清蛋白即可明显升高，在肾脏组织学或结构改变之前即可检出，是反映肾脏结构与功能受损的早期敏感指标，故可作为早期肾脏损伤的检测指标[5]。

综合本文上述文献与研究数据，可见在Ⅱ型DM病人中，HbA1c浓度水平随肾脏损伤标志物的增高而增高，其Cys-C[6]在各组均与对照组具有统计学意义，均显示肾小球损伤，而在C组呈显著统计学意义，其原因可能为高糖毒性使蛋白质非糖基化产生糖基化终产物增多，后者可导致肾小球基底膜支架结构孔径增厚，并使基底膜通透性降低，从而降低肾小球滤过功能而致肾功能损害[7]，其尿mAlb在A、B、C组逐渐升高现象予以支持，呈正相关[8，9]，提示肾小球的分子筛与电荷屏障损伤，预示对于HbA1c水平高低足以引起临床重视，并根据其高低及时干预治疗以防损伤加重。尿β2-MG在B与C组呈显著升高，预示近区肾小管受损。提示近区肾小管的重吸收能力降低，水的排泄增多，也预示着近区肾小管随HbA1c浓度水平增高而受损[10，11]，本研究也符合徐新蓉等学者和卢敏等学者的研究结果[11，12]，其显示高HbA1c水平下，近区肾小管和肾小球受损加剧[13]。本文研究显示HbA1c作为分组依据在慢性Ⅱ型DM的可适应性，但因受HbA1c检测方法学[14，15]与患者本身日常饮食，机体遗传等血红蛋白变化的影响干扰，故作者从临床角度考虑，在临床实践工作中应加强血Cys-C、尿β2-MG、尿mAlb和HbA1c的联合检测，增强其联合检测指标对慢性Ⅱ型DM检测指标异常率的敏感度与特异性，以减少单项检测的局限性，有利于社区慢性Ⅱ型DM肾脏功能损伤的判断，值得临床重视与推广。

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·读者·作者·编者·

(收稿日期2015-07-20；修回日期2015-12-10)

DOI：10.3969/j.issn.1674-1129.2016.01.023

中图分类号：R446.11+2，R587.1

文献标识码：A

文章编号：1674-1129(2016)01-0067-03