浅议生化类体外诊断试剂开瓶稳定性

张力心



浅议生化类体外诊断试剂开瓶稳定性

张力心

【摘要】目的 探讨对检测结果的影响，为生化试剂的临床使用提供必要的参考。方法 选取3种生化试剂盒，以朗道质控品为检测样本，用深圳迈瑞BS-800全自动生化分析仪进行检测，观察开瓶时间对检测结果的影响。结果 开瓶时间对总蛋白和肌酐的正确度影响较大。结论试剂开瓶后应密闭低温储存，尽快使用，且每次检测前应重新校准。

【关健词】开瓶稳定性；体外诊断试剂；正确度

作者单位：401147 重庆医疗器械质量检验中心；重庆市医疗器械质量与安全控制工程技术研究中心

随着我国检验技术的发展，生化试剂已成为化学试剂的一大类。目前，我国共有诊断试剂生产企业400多家，共生产商品2 000多种［1］。现阶段由于各厂家的生产规模、技术水平和产品质量参差不齐，且生化试剂受热、受潮、受光后，试剂中的某些组分易分解、失活，于是造成生化类试剂保存期较短，储存条件也比较苛刻。然而，基层医院由于业务量较小，试剂开瓶后往往需要较长时间才能使用完。为了分析试剂在开瓶后放置在全自动生化分析仪中的时间长短对检测结果的影响，本文对总蛋白试剂盒（TP）、丙氨酸氨基转移酶检测试剂盒（ALT）、肌酐检测试剂盒（Cre）进行了开瓶稳定性研究，旨在对生化试剂的临床使用提供必要的参考。

1　材料与方法

1.1仪器

BS-800全自动生化分析仪（深圳迈瑞生物医疗电子股份有限公司生产）。

1.2材料

选取3种剂盒，进行开瓶稳定性实验，试剂盒信息见表1，校准品为朗道复合校准血清（批号：938UN），质控品为朗道复合质控血清（批号：725UE），TP、ALT、Cre的参考值分别为46.0 g/L、 139 U/L、366 μmol/L。

1.3方法［2-5］

将上述试剂置入生化分析仪中，使仪器处于开机状态以保持试剂盘温度，每天测定质控品3次，取平均值作为检测结果。观察试剂检测结果的变化，以相对偏差超出10%为失控的判断标准。相对偏差的计算公式为：

2　结果

将3种试剂连续测定21 d，检测结果见表2。

3　讨论

3.1总蛋白试剂盒

从表2可看出，试剂前7 d的检测结果基本无变化；一周后，检测结果随时间的增加开始逐渐减小；到21 d时，检测结果的相对偏差达到约10%的临界点，说明该TP试剂的开瓶有效期为21 d。分析原因，由于TP试剂盒采用双缩脲反应原理，蛋白质分子中含有很多与双缩脲结构类似的肽键，碱性条件下，双缩脲可与Cu2+生成紫色的络合物，NaOH在反应中的作用为营造碱性的反应环境。当试剂开瓶后置于生化仪后，空气中的CO2会不断溶入试剂，中和其中的NaOH，使试剂的pH值下降，从而影响紫色络合物的生成，导致检测结果的降低。

3.2丙氨酸氨基转移酶试剂盒

从表2可看出，试剂开瓶21 d后，检测结果无变化，相对偏差较小，说明开瓶时间对试剂检测结果的正确度基本无影响。但将放置21 d后的试剂进行线性范围检验时发现，该试剂盒的线性上限由800 U/L下降至300 U/L，线性范围变小。分析原因，可能是由于试剂中的NADH组分的保存温度为-20℃，易被空气中的氧气氧化，从而导致底物浓度不足，线性范围变小。

表1　试剂盒的基本信息

表2　试剂盒开瓶稳定性的实验结果

3.3肌酐检测试剂盒

从表2可看出，该试剂盒的检测结果随开瓶时间的增加而逐渐变大，相对偏差在15 d时接近10%的临界点。分析原因，该肌酐检测试剂盒采用苦味酸法，在碱性条件下，肌酐与苦味酸生成橘红色的苦味酸-肌酐复合物，NaOH在反应中的作用为提供碱性的反应环境，使血清样本中的肌酐和其它干扰物质与苦味酸的反应速度不同，从而准确的测定肌酐。当试剂开瓶后置于生化仪后，空气中的CO2与试剂中的NaOH反应，使试剂的抗干扰能力下降，测试结果为肌酐与干扰物浓度之和，因此试剂盒放置时间越长，检测结果偏大越明显。

4　结论

当试剂中含有碱性物质时，长时间放置于生化分析仪中，空气中的CO2会逐渐消耗掉试剂中的碱性成分，从而影响检测结果的正确度。因此对此类试剂，每次使用之后应盖紧瓶盖，避免接触空气。由于生化分析仪的试剂盘的温度范围一般为5℃～15℃，因此，当试剂中含有NADH之类的对温度敏感的组分时，试剂使用后应放置在2℃～8℃冰箱中储存，并尽快使用。否则试剂在检测高值样本时，结果的正确度将不能保证。试剂开瓶7 d左右，检测前应重新校准，以提高检测结果的正确度。

参考文献

［1］ 毛省侠，郭准． 浅谈体外诊断试剂质量体系中企业参考品的管理［J］． 中国医疗器械信息，2011，17（10）: 46-53．

［2］ 叶应妩，王毓三，申子瑜． 全国临床检验手册［M］． 南京: 东南大学出版社，2006: 452-456．

［3］ 王霞文． 临床生化检验技术［M］． 南京：南京大学出版社，1995: 180-182．

［4］ 陆永绥，李清华，张伟民． 临床检验自动化分析标准操作规程［M］．浙江：浙江大学出版社，2006: 9．

［5］ GB/T 26124-2011，临床化学体外诊断试剂（盒）［S］． 2011．

Analyzing on the Operation Life of Biochemical Diagnostic Kits

ZHANG LixinChongqing Quality Chongqing Quality Testing and Inspection Center for Medical Devices；Chongqing Engineering Research Center For Quality and Safety Control of Medical Devices，Chongqing 401147，China

【Abstract】

Objective By studying on the influence of decapping time on results，this paper offers a guidance on clinical application of biochemical diagnostic kits． Methods With the Randox control serum as the sample，correctness of decapping time on results is tested by mindray’s BS-800 automatic biochemical analyzer． Results Decapping time of total protein and creatinine reagent greatly affect the testing results． Conclusion Having been decapped，the reagent should be stored in low temperature，and a calibration test should be run．

【Key words】Decapping life，In-vitro diagnostic kit，Correctness

通讯作者：张力心，E-mail：372619420@qq．com

doi:10．3969/j．issn．1674-9316．2016．01．099

【中图分类号】R97

【文献标识码】A

【文章编号】1674-9316（2016）01-0135-02