羊的胚胎移植技术要点

张　晋,张粉平

(1.甘肃省家畜繁育中心,甘肃 武威 733000；2.咸阳巿渭城区动物卫生监督所 )



羊的胚胎移植技术要点

张晋1,张粉平2

(1.甘肃省家畜繁育中心,甘肃 武威 733000；2.咸阳巿渭城区动物卫生监督所 )

本文从胚胎移植的供体羊、受体羊的选择，移植时间、手术方法，冲胚移植过程及产前产后的护理等方面进行了详细的阐述，得出在羊的胚胎移植中应当注意的各个事项，可大大提高胚胎移植羊的受胎率，及供受体羊的利用率。

胚胎移植；供体羊；受体羊

胚胎移植技术是改良家畜品种的一项高新技术，对于提高家畜品种质量和促进高产、优质、高效畜牧业生产有着重要的意义。羊的胚胎移植技术是对生产性能优良和遗传性稳定的母羊经过超数排卵处理后，将多出自然排卵数几倍的受精卵取出，分别移植到受体母羊输卵管或子宫内，使之产出优良后代的技术。但是由于在移植中有些工作准备不充足和操作过程中的不慎，会导致供体羊手术冲卵后利用率低和出现受胎难的现象。本人根据多年的实际应用经验，浅谈一下提高供体受体母羊手术后受胎率的几点措施，供同行商榷。

1　供体母羊和种公羊的选择

1.1年龄及营养状况

选择合适的供体和受体母羊是胚胎移植成功的基础，供体母羊的年龄选择应在1.5～4.0岁左右，生育过1胎以上为佳，膘情较好，饲养环境稳定，具备良好的繁殖能力，即没有遗传缺陷和其他的生殖疾病，性周期正常，发情症状明显；供体羊应营养良好，健康无病。在喂乳期间必须断奶30 d后，补足营养，恢复膘情方可选用。如果选用育成羊，须选体成熟、健康无生殖疾病、有两次发情史以上且性周期正常的育成羊。

1.2种公羊的选择

种公羊要求符合本品种特征，精液质量好，遗传性稳定，切忌为了单纯追求质量和利润无论种羊好坏都进行胚胎移植，生产不出合格种羊，影响种群质量。

2　供体母羊的发情鉴定及人工授精

供体母羊在超排前必须观察1～2个完整的发情周期，以母羊发情之日作为发情周期的0 d，在母羊发情周期的第13.0 d或13.5 d开始，每天早晚各注射一次FSH,连续3 d，递减注射。确定超排羊发情后立即注射LH。如果FSH-P未注射完供体羊发情，停止注射。以供体母羊站立接受试情公羊爬跨为发情标准。

人工授精以鲜精为主，精液活力在70%以上，每次输精量有效精子数不少于30×106，输精次数不少于3次。确认发情之后立即进行一次输精，之后间隔12 h输精1次。

3　供体母羊的冲卵及胚胎质量鉴定

3.1手术冲卵

羊的手术冲卵可根据需要选择输卵管冲卵和子宫冲卵法。手术部位选择在离乳房前端约2 cm处，腹中线的两侧均可。手术前必须空腹24 h，只能饮水。手术时避开血管，手术部位纵向切开6～8 cm的切口，分离皮下组织，暴露肌膜。在骨盆腔，膀胱周围触摸子宫，将卵巢子宫引出切口外。

冲胚完成后用一定浓度的肝素溶液喷洗内脏，洗掉凝血块，用28℃的生理盐水将内脏冲洗干净并注入液体石蜡5～10 mL以防黏连。创口采用三层缝合法，在肌肉与皮肤间撒适量的青、链霉素粉，以防创口感染。

3.2胚胎质量鉴定

处于发育期2细胞的胚胎，卵裂球轮廓清楚，球体饱满，透明度适中，数目吻合即可鉴定为1级，1/3卵裂球死亡可鉴定为2级，1/2卵裂球死亡可鉴定为3级，其余定位4级。1、2、3级胚胎均可进行移植。

4　受体体母羊的选择

受体母羊应选择繁殖性能正常，体况良好健康膘情在七成以上，发情周期正常，无传染性疾病，符合品种特点，母性较好，奶量充足，以成年母羊年龄在2～6岁为好。

5　移植时间的选择

种羊的胚胎移植工作，通常安排在种羊发情季节里。一般秋季的9月至11月底，早春的2月至4月这段时间种羊发情旺盛，内分泌机能最活跃。选择这一时期有利于超排工作的进行，而且伤口愈合后能及时发情配种，配种时尽量用人工输精方法，不失时机地检查出供体羊出现的系列问题，如污染造成的子宫内膜炎和阴道炎、异常发情及持久黄体等。及时采取治疗措施，提高受胎率。供体羊在超排前需观察1～2个完整的发情周期。

6　手术方法和利用次数

采用配种后66～72 h输卵管冲胚法。供体羊利用最好不超过两次，而且用过一次，生育一胎后再利用第二次，能说明供体羊冲胚后没留下生殖上的疾患和其他后遗症，保证下一次和受体羊配套。避免经济损失。采用腹腔镜子宫内冲胚法(7 d)最好不过3次，如果子宫不污染，伤口恢复快，发情周期正常可连续冲胚1次。

7　受体羊的移植

受体羊创口缝合时严格按照外科手术规则进行自身消毒，不得接触其他无关物品，整个操作过程要迅速、准确、仔细，避免生殖器官暴露过久，切忌频繁、重度触摸和拉扯生殖器官。 胚胎移植后要检查移植器中是否有胚胎遗漏，确认没有遗漏后受体才能缝合。 吸取胚胎时用移植器先吸一段约1.0 cm长的保存液，再吸一段约0.5 cm的空气，然后吸取胚胎，含胚胎的液柱不超过1.5 cm。

8　冲胚过程中注意的环节

手术冲胚时，要严格遵守无菌操作原则，手术处周围羊毛要刮净，严格消毒。术者要做好自身消毒，防止将病原微生物带入供受体羊器官内造成感染。供体羊超排后发情配种时间隔10～12 h用鲜精配种1次，3次即可，防止次数过多造成生殖道感染，影响下次的利用和再配种的受胎率。冲胚时，手术动作要轻、要细致，防止输卵管、输卵管伞及其他部位出血，造成粘连和堵塞，使母羊丧失生育能力。冲胚完毕后，用20 mL生理盐水稀释80万IU的青霉素和100万IU的链霉素注入子宫内，以防配种和手术时对子宫的污染，提高下次供体羊的利用率和受胎率。

9　冲胚后配种处理

供体羊冲胚后，从发情时算起10 d左右，肌注氯前列烯醇0.8～1.0 mL，以溶解卵巢上的多个黄体，以利于发情和避免形成持久黄体。供体羊冲胚后，由于体内的外源激素仍然持续一定水平，第一次发情后，尽量不要配种，会有部分羊发情周期紊乱，排卵不正常，不易受胎。有的羊即使配种受胎率也较低。故第二情期配种较适宜，配种的同时肌注LRH-A3受胎率较高。供体羊发情时，发现分泌物混浊和子宫炎症、阴道炎的，及时冲洗、消炎处理后再配种。对冲胚后较长时间不发情的羊只可采用CIRD放入阴道，置13 d肌注氯前列烯醇0.8 mL后10 h取出，发情即可配种。对春季末冲胚的母羊，由于天气越来越热，长时间不发情的要根据情况尽量不催情配种。因为反季节催情，气温高更易造成母羊生殖道感染，受胎率也较低，故可使其休情，在早秋抓住时机配种，能大大提高利用率和受胎率。

[1]桑润滋.牛、羊胚胎移植在中国的发展[J].黑龙江动物繁殖.2003，11(2)：17-20.

[2]刘忠琛，尹怀磊，刘洪江.羊胚胎移植的实用操作技术[J].当代畜禽养殖业，2009，3(12)：9-12.

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Technique of Embryo Transfer in Sheep

ZHANG Jin1, ZHANG Fen-ping2

(1.LivestockBreedingCenterofGansuProvince,WuweiGansu733000China;2.AnimalHealthSupervisionInstituteofWeichengdistractinXianyangCity)

This paper clearly illustrated some main points, such as the selection for donor sheep and receptor sheep during embryo transplantation, the transplantation method, surgical methods, the process of rushing embryo transplantation, prenatal and postnatal care etc. It was concluded that every matter should be paid attention to in the sheep embryo transplantation, which could greatly improve the pregnancy rate and the utilization of the donor and receptor sheep.

Embryo transplantation; donor sheep; receptor sheep

1004-6704(2016)04-0124-02

2016-05-12

张晋(1983-),女,甘肃武威人,本科，畜牧师，主要从事冷冻精液生产和冻精质量技术检测工作。

S 814.6

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