219株铜绿假单胞菌临床分布和耐药性分析

刘书敏 蒋 玲⋆ 秦继宝 黄慧青

219株铜绿假单胞菌临床分布和耐药性分析

刘书敏 蒋 玲⋆ 秦继宝 黄慧青

目的 了解铜绿假单胞菌的临床分布及耐药情况，为临床合理用药提供依据。方法 采用Microscan auto SCAN-4 细菌鉴定分析仪，对2014年1月至2015年12月检出的219株铜绿假单胞菌进行鉴定及药敏分析。结果 219株铜绿假单胞菌主要来源于痰标本和脓液标本，痰标本检出173株，占79.00%；脓液标本检出19株，占8.68%；219株铜绿假单胞菌主要来自本院各病区住院患者，科室分布以ICU、呼吸内科和老年病科为主，分别占22.37% 、17.35%和13.24%；抗菌药物中氨曲南的耐药率最高，耐药率为51.2%，耐药率最低的抗菌药物是阿米卡星，耐药率13.2%。结论 铜绿假单胞菌引起的感染以下呼吸道为主，临床医师应根据药敏试验结果合理使用抗菌药物，减少耐菌株的产生。

铜绿假单胞菌 药敏试验 分布 耐药性

铜绿假单胞菌（Pseudomonas aemginasa）是医院内部感染的重要病原菌之一，是一种需氧或兼性厌氧、氧化酶阳性的非发酵革兰氏阴性杆菌。当机体免疫力处于低下状态时，可引起呼吸道、皮肤、血液、泌尿生殖道系统等一系列感染。近年来，由于临床抗生素的广泛、不合理使用，使铜绿假单胞菌耐药性不断增强，多重耐药菌株大量出现［1］，给临床正确的诊疗带来较大困难。为了解本院铜绿假单胞菌的临床分布情况及耐药性特点，作者回顾性分析了2014年1月至2015年12月本院临床送检的各类标本分离得到的219株铜绿假单胞菌，为临床合理使用抗菌药物提供准确的实验室依据。现报道如下。

1 材料与方法

1.1 标本来源 分离得到的219株铜绿假单胞菌，来自本院2014年1月至2015年12月期间，临床各病区送检的标本，包括痰液、各类分泌物、尿液、咽拭子、穿刺液、胆汁、血液等标本分离的非重复分离菌株（非重复分离菌株：1周之内同一患者、同一部位、同类标本相同分离菌株只可以统计1次）。

1.2 细菌培养与鉴定 不同种类的合格标本送检后，根据标本要求进行直接接种或增菌后转种于血琼脂平板、麦康凯平板上（购于郑州安图生物工程有限公司），置于5%～10%CO2培养箱35℃培养18～24h，观察菌落生长情况；血培养使用BACTEC 9050全自动血液培养仪进行血液培养，血培养瓶仪器报阳性后转种于血平板。选取不同单个可疑菌落进行革兰染色，镜检可见革兰阴性杆菌，并且氧化酶试验为阳性，进行鉴定。对于细菌培养以及鉴定均严格按照《全国临床检验操作规程》执行［2］。

1.3 仪器与试剂 Microscan auto SCAN-4 细菌鉴定分析仪，NC50细菌鉴定药敏板以及配套试剂，均购于美国西门子公司。

1.4 细菌鉴定及药敏试验 对可疑菌落分离出纯菌落后进行革兰染色及氧化酶试验。革兰阴性杆菌接种NC50鉴定药敏板，置于35℃非CO2培养箱中培养16～24h，滴加相应试剂后，放入Microscan auto SCAN-4细菌鉴定药敏分析仪判读结果。培养鉴定所用到的质控菌株为铜绿假单胞菌（ATCC27853），购于卫生部药品鉴定所。

1.5 统计学方法 采用回顾性调查分析，运用世界卫生组织细菌耐药性监测中心推荐的WHONET5.6软件，对铜绿假单胞菌常用的抗菌药物敏感率和耐药率进行数据处理和统计分析。

2 结果

2.1 铜绿假单胞菌感染的临床科室分布构成比 检出率最高为ICU病房，高达22.37%，其次为呼吸内科，为17.35%；老年病科为13.24%。见表1。

表1 219株铜绿假单胞菌各临床科室分布构成比

2.2 铜绿假单胞菌标本来源分布构成比 见表2。

表2 219株铜绿假单胞菌标本来源分布构成比

2.3 药敏结果 219株铜绿假单胞菌对13种抗菌药物的耐药率见表3。

表3 219株铜绿假单胞菌对抗菌药物的耐药分析（%）

3 讨论

铜绿假单胞菌为常见条件致病菌，广泛存在于自然环境及医院环境中，也是医院感染最主要的病原菌之一［3-5］，当机体处于免疫力低下状态的时侯，可引起包括呼吸道感染、伤口感染、泌尿道感染、血液感染以及消化道等多部位感染。从本院分离出的219株铜绿假单胞菌主要来源于呼吸道的痰液标本，检出173株，占79.00%，其次为脓液标本，检出19株，占8.68%，其他标本的检出率相对较低。分析数据表明，从呼吸道痰液标本分离得到的铜绿假单胞菌明显多于其他部位的标本，说明现阶段本院铜绿假单胞菌引起的感染仍以下呼吸道感染为主。与相关文献报道的分布情况基本相符［6-7］。

本资料表明，在临床科室铜绿假单胞菌感染分布中，ICU、呼吸内科以及老年病科是铜绿假单胞菌检出率较高的三个主要病区［8-10］，究其原因，因ICU、呼吸内科以及老年病科的患者多是住院时间较长，且年老体弱、长期应用抗生素的患者，因临床的一系列操作破坏了机体的黏膜屏障作用，最易引起铜绿假单胞菌感染。另外该类患者抗菌药物应用时间较长，极易使铜绿假单胞菌等菌株产生耐药性，于是为铜绿假单胞菌的多重耐药创造了感染条件。因此，必须加强措施，加大对铜绿假单胞菌医院感染的调查和耐药性监测等手段，采取综合性的防治措施，临床医生应当严格遵守抗生素使用原则，院感科以及检验科应当加大力度对医院环境微生物学的监测，尤其是对高危科室（ICU、呼吸内科以及老年病科）的监测，极大的降低铜绿假单胞菌院内感染的发生。

本文药敏结果显示，分离检出的219株铜绿假单胞菌中，对氨曲南的耐药率最高，达51.2%，另外，对阿米卡星和妥布霉素也有着较高的敏感性，分别占78.1%和84%，该结果与周文虹等报道相符［11］。另外，本文结果还显示对铜绿假单胞菌耐药率较低的抗菌药物为美罗培南、亚胺培南、哌拉西林/他唑巴坦、妥布霉素和阿米卡星，含酶抑制剂及碳青霉烯类抗生素仍是临床治疗铜绿假单胞菌感染的首选药物，其中治疗铜绿假单胞菌感染抗菌活性最强的药物碳青霉烯类抗菌药，因其对质粒介导超广谱β-内酰胺酶、染色体及质粒介导的头孢菌素酶均具有高度稳定性，具有超强、广谱的抗菌能力，在临床治疗铜绿假单胞菌感染中使用非常普遍，但随着碳青霉烯类抗菌药的在临床上的广泛使用，给临床医生日常治疗上带来较大困难。

［1］ 王亚红,张青锋,潘立东．2009-2012年铜绿假单胞菌临床分布及耐药性分析．中华医院感染学杂志,2014,24(5):1064-1066．

［2］ 叶应妩,王毓三．全国临床检验操作规程．第三版．南京:东南大学出版社, 2006:736-753．

［3］ 倪语星,尚红．临床微生物学检验．第五版．北京:人民卫生出版社,2013:137-139．

［4］ 韩静,沈萍萍,高灵宝．2006-2009年744株铜绿假单胞菌分布特点和耐药状况分析．检验医学与临床,2011,8(7):842-843．

［5］ 巫艳彬,陈一强,孔晋亮,等．医院常见革兰阴性杆菌的分布及耐药性分析．中华医院感染学杂志,2014,24(7):1597-1599．

［6］ 徐准．88株铜绿假单胞菌耐药性分析．国际检验医学杂志,2015,36(22):3345-3346．

［7］ 张昭勇,王元元,蔡克涛,等．2003-2009年我院铜绿假单胞菌耐药性监测分析．湖北医药学院学报,2011,30(1):56-59．

［8］ 林建平,潘品福,陶兴和．铜绿假单胞菌感染的临床分布及耐药性分析．检验医学,2007,22(6):724-726．

［9］ 戢运超,饶荣．某县级医院铜绿假单胞菌的分布及耐药性变迁．中国感染控制杂志,2014,13(4):246-248．

［10］ 陈强．铜绿假单胞菌耐药性及其院内感染的分布特点分析研究．中国现代药物应用,2014,8(17):140-141．

［11］ 周文虹,陈金连,官煜彬．2014能某院铜绿假单胞菌的分布及耐药情况．国际检验医学杂志,2015,36(18):2730-2732．

Objective To investigate clinical distribution and the drug resistance of Pseudomonas aeruginosa，to provide scientifc evidences for clinical application of antibiotic. Methods We retrospectively surveyed the infection of Pseudomonas aeruginosa in our hospital from January 2014 to December 2015，Microscan auto SCAN-4 was used to identify the separation of 219 strains Pseudomonas aeruginosa drug susceptibility results analyzed. Results 219 strains Pseudomonas aeruginosa were mainly isolated from sputum and pus specimens，173 strains were isolated from sputum specimens，accounted 79.00%；19 strains were isolated from pus specimens，accounted 8.68%，219 strains Pseudomonas aeruginosa were mainly isolated from patients hospitalized in the intensive care unit（ICU）（22.37%），which were mainly from Respiratory Medicine Department of Gastroenterology（17.35%）and Department of geriatrics（13.24%），the most resistance rates was azatreonam（51.2%），the lowest resistance rates was amikasin（13.2%）. Conclusions Pseudomonas aeruginosa mostly come from lower respiratory tract infection specimen，so clinical doctors should select antimicrobials according to drug susceptibility test.

Pseudomonas aeruginosa Susceptibility testing Distribution Drug Resistanc

222042 江苏省连云港市东方医院检验科

*通信作者