金骨莲组方中主药对骨关节保护机理概况

曾　乐,刘　毅,熊华章,邹　刚

(遵义医学院附属医院骨一科,贵州 遵义　563003)



金骨莲组方中主药对骨关节保护机理概况

曾乐,刘毅,熊华章,邹刚

(遵义医学院附属医院骨一科,贵州 遵义563003)

[摘要]骨性关节炎是一种可以发生在人体各个关节部位不可逆性的退行性疾病。目前对骨性关节炎的机理认识不够完全，因而有效的预防、治疗措施并不多，到了骨性关节炎晚期，患者不得不接受具有危害性的医疗措施。金骨莲组方因其在骨关节炎方面独特的保护作用，为探索保护骨关节提供了更多的可能。

[关键词]骨关节；金骨莲；主药；保护

中医无“关节炎”病名记录，根据其临床症状可归属于“痹证”范畴。中医认为其发病机理属肝肾亏虚，经脉失养，筋骨虚损，筋络阻滞，不通则痛，故临床治疗以补益肝肾，温通经络，化瘀除湿，散寒止痛为主。金骨莲组方在《本草图经》《滇南本草》早有记载，主药由金铁锁、大血藤、八角枫、汉桃叶、透骨香组成，具有消炎、止痛、肌松、软骨基质保护作用。

1金铁锁对骨关节炎的作用

中医广泛应用金铁锁于筋骨疼痛、排脓消痈，更是国药云南白药的重要组分。

许建阳等[1]使用金铁锁水煎浸膏在对利用福氏完全佐剂建立的大鼠痛风性骨关节炎模型研究中发现，相比消炎痛(吲哚美辛)金铁锁水煎浸膏可以大大提高大鼠的痛阈，同时测定实验中大鼠血清中NO以及NOS含量，发现大鼠血清中NO以及NOS含量明显降低，从而达到止痛的效果且与西药吲哚美辛组止痛效果没有明显区别，但是该研究中并没有对金铁锁具体通过什么样的机理发挥止痛作用进行阐明。国外有研究证实软骨细胞诱生型一氧化氮合酶(iNOS)在发生骨性关节炎时表达明显上调，促进生物体内NO含量增加[2]。而NO能够抑制蛋白多糖合成[3]，影响软骨基质代谢，促进关节软骨退变。相反，抑制iNOS表达的小鼠骨性关节炎模型骨关节炎进展可以得到减慢[4]。在不同时间节点采样，以硝普钠为NO供体培养兔关节软骨细胞，可以发现高质量分数以及更高质量分数的NO能够导致软骨细胞损伤甚至死亡[5]。由此可见，iNOS以及产物NO在关节炎止痛、影响关节炎发生、发展确实存在作用，而金铁锁可以通过这一途径对关节软骨产生保护作用。通过对大鼠脑组织中5-羟色氨酸、5-羟吲哚美辛、5-羟色胺、L-去甲肾上腺素、多巴胺进行研究，王美娥等[6]发现金铁锁水煎液可以增加5-羟色胺以及它的下游产物5-羟色氨酸、5-羟吲哚美辛在大鼠脑组织的合成或释放，提高利用率，上调大鼠的痛阈从而达到止痛的效果，由此可以看出金铁锁水煎浸膏可能存在的作用途径并不止一条。在疼痛方面，有一类原癌基因c-fos被认为与疼痛密切相关，Abbadie等[7]以佐剂性关节炎大鼠模型为基础，发现受到伤害性刺激的大鼠脊髓L3～4的 c-fos基因表达产物fos蛋白较不受伤害性刺激大鼠明显升高。而使用完全无痛剂量吗啡可以降低fos样免疫反应阳性细胞总量[8]。说明疼痛与c-fos基因存在相关性，可能是大鼠对伤害性刺激的一种防御反应。有研究观察到c-fos基因往往在疼痛时被激活，伴随体内合成的强啡肽含量升高可以达到镇痛的作用，王学勇等[9]研究金铁锁总皂苷时，发现金铁锁总皂苷能够对c-fos基因表达产生影响，从而影响c-fos基因在下丘脑、脊髓、滑膜的总量且一定范围内金铁锁总皂苷剂量越大，对c-fos表达的抑制作用越明显，从分子生物学水平部分说明了金铁锁水煎浸膏止痛机理。田均勉[10]对金铁锁的化学成分进行了较为深入系统的研究，共分离出17种三萜皂苷、11种环肽以及其他52种有机化合物。当前的研究普遍认为金铁锁有效成分是提取的金铁锁总皂苷。研究中发现总皂苷对合成NO有抑制作用，同时也可以抑制血小板聚集，减少花生四烯酸的合成，证明金铁锁总皂苷在抗炎、活血化瘀、止痛方面确实存在独特效用[10]。

2大血藤对骨关节炎的作用

大血藤具有“治筋骨疼痛、促腰膝”、止痛通经、清热解毒的作用，常常被用来治疗风湿性、类风湿性疾病。黄淑凤等[11]研究苯酚胶浆盆腔炎模型大鼠时，发现大血藤可以降低血清中血栓素TXA2、增加血清前列环素PGI2含量，TXA2可以促进血液凝集，PGI2则能够提供抗凝的性质，通过调整血液中TXA2/ PGI2比值促进局部血肿吸收、加快组织代谢。提示大血藤在活血化瘀方面部分机理以及抑制中性粒细胞介导的炎症反应可能存在的作用。人体关节中含有基质金属蛋白酶MMPs类酶，MMPs类酶底物主要是关节中的蛋白多糖。发生骨性关节炎时，MMPs活性增强，对底物蛋白多糖、胶原蛋白的分解增加，可进一步造成关节软骨基质分解大于合成，发生软骨退变。MMPs大家族中存在两种明胶酶MMP-9、MMP-2，是水解软骨基质中蛋白多糖、胶原蛋白等的关键酶。在一项样本量为22例的膝关节置换骨性关节炎患者软骨组织中发现MMP-2表达异常，引起细胞外基质异常降解[12]。在涵盖了39例膝关节骨性关节炎、68例类风湿关节炎、79例强直性脊柱炎、39例反应性关节炎以及14名正常人的研究中，发现各个关节炎组MMP-2、MMP-9活性都比正常组增强[13]。金骨莲组方中大血藤被证明可以明显减少MMP-2、MMP-9的表达，减少MMP-2、MMP-9含量，从一定程度上减轻骨关节炎中滑膜炎症、减缓MMP-2、MMP-9参与的关节软骨退变[14]。此外，在对骨关节炎模型兔进行研究时发现模型兔关节液中细胞因子TNF-α表达有明显增加且维持在较高水平[15]。体外实验中TNF-α被证明是软骨降解的兴奋剂[16]。通过抑制TNF-α，关节软骨中蛋白多糖的含量出现了增加，可以达到抑制软骨基质降解的效果[17]。晚期OA中TNF-α可以诱导滑膜成纤维细胞样细胞增殖出现明显的纤维增生和滑膜增厚，引起软骨细胞发生成纤维细胞样改变，下调特异性前胶原α1(Ⅱ)表达，上调非特异性胶原α1(Ⅲ)表达[18]。同时Neide等[19]通过研究观察到IL-6与软骨基质退变主要酶胶原酶关系密切。金骨莲组方中的大血藤能够通过降低关节炎模型大鼠血清IL-6、TNF-α含量，从细胞因子IL-6、TNF-α方面对关节软骨退变、损伤进行干预，从细胞因子角度看，大血藤确实存在保护关节软骨、减缓骨关节炎疾病发展的功效[20]。临床研究中，凌家艳等[21]利用大血藤外敷同时内服中药治疗急性痛风性关节炎，发现加用大血藤时，止痛效果起效快，对疼痛减轻明显。

3八角枫对骨关节炎的作用

八角枫具有祛风湿、通经络等作用，临床主要用于治疗跌打肿痛、风湿。研究发现，通过对猫静脉注射八角枫制剂，可以阻断猫的植物神经以及运动神经横纹肌兴奋传导，从而达到肌肉松弛的效果[22]。翟科峰等[23]对八角枫成分进行定性研究后发现，八角枫中主要成分为蒽醌类、糖类、苷类、皂苷、三萜等。张威等[24]利用八角枫对佐剂性关节炎大鼠模型进行研究后，发现八角枫醇提取物和八角枫总碱可以明显减小佐剂性关节炎大鼠的足肿胀，光镜下观察可以发现八角枫醇提取物和八角枫总碱能够减轻关节滑膜的增生、减少血管翳形成。以八角枫为主要成分的针剂“肌松二号”能够使神经肌肉接头处突触后膜产生去极化作用，使得突触后膜对突触前膜释放的神经介质一定时间内无反应，从而引起肌松作用[25]。

4汉桃叶对骨关节炎的作用

汉桃叶目前主要用于祛风止痛，对于治疗风湿痛、坐骨神经痛有不错的效果。

将汉桃叶的成分进行有效提取，发现汉桃叶产生止痛作用的有效成分主要是有机酸，包括反丁烯二酸、琥珀酸黏液酸、苹果酸。刘娴等[26]发现汉桃叶不同部位的提取物对小鼠耳廓肿胀、醋酸引起的小鼠疼痛均有明显效果。目前对汉桃叶的大样本、更深层次研究仍然缺乏，有待进一步深入。

5透骨香对骨关节炎的作用

透骨香具有舒经活络、散瘀止痛的作用，可用于风湿、类风湿关节炎、跌打劳损。

以透骨香浸膏的形式口饲小鼠，通过观察冰醋酸引起的小鼠扭体数、热板法小鼠舔足时间发现透骨香浸膏能够减少扭体数、提高痛阈，存在止痛的作用。在对巴豆油合剂引起的小鼠耳肿胀研究后发现，透骨香浸膏可以减轻耳组织水肿[27]。黄聪等[28]对透骨香的药用成分进行改良制成微乳制剂后，以二甲苯引起的小鼠耳廓肿胀、冰醋酸引起的小鼠扭体数为观察指标，同样得出了透骨香拥有消肿止痛的功效。有研究者利用不同炮制方法，对透骨香展开研究后发现，透骨香对实验中小鼠肢体肿胀以及镇痛均有效且醋制组消肿效果最优、清炒组止痛效果最强[29]。在对重要功能脏器长期毒性作用方面，谢笑龙等[30]开展了对透骨香药酒的研究。研究发现以透骨香为主要成分的药酒对大鼠体质量、营养状况等一般情况，以Ⅱ导联为心电图的观察指标，以GPT、麝香草酚浊度为肝功能观察指标，以血液非蛋白氮、血液肌酐为肾功能观察指标的影响以及大鼠肝、肾、脑组织光镜形态均与空白对照组无明显差异，证明透骨香在入药方面的安全性。一项利用透骨香按摩乳治疗263例软组织损伤的临床观察中，有效率达97.72%，其中痊愈占76.80%，进一步说明了透骨香在临床药用中的价值[31]。

6分析与展望

骨性关节炎在人口老龄化加快的现代社会发病率和危害性都在不断加大，中医强调骨关节炎为经络不通，病邪阻塞气血所致。金骨莲组方因其特殊的主药成分在骨性关节炎方面有独特疗效。目前对该组方的研究多停留在动物实验、临床应用层面且其疗效已经得到了充分证明，但是亟须更高质量、更深层次的实验研究，从分子生物学、生物化学方面进一步阐明金骨莲各组分在保护骨关节方面的作用机理，为进一步分离、纯化、减少药物的副作用打下坚实基础。

参考文献：

[1]许建阳，王发强，郑维发，等.金铁锁对实验性RA小鼠痛阈及血清NO/NOS含量的影响[J].中医药学刊，2004(1)：82-84.

[2]AMIN A R, DI CESARE P E, VYAS P, et al. The expression and regulation of nitric oxide synthase in human osteoarthritis-affected chondrocytes:evidence for up-regulated neuronal nitric oxide synthase[Z], 1995: 2097-2102.

[3]TASKIRAN D, STEFANOVIC-RACIC M, GEORGESCU H, et al. Enhancement of SPARC(osteonectin)synthesis in arthritic cartilage[Z], 1996: 539-551.

[4]PELLETIER J P, JOVANOVIC D V, LASCAU-COMAN V, et al. Selective iibition of inducible nitric oxide synthase reduces progression of experimental osteoarthritis in vivo:possible Link with the reduction in chondrocyte apoptpsis and caspase 3 level[Z], 2000: 1290-1299.

[5]王家传，李宇，霍霞，等.一氧化氮对兔关节软骨细胞凋亡的影响探讨NO对软骨细胞凋亡的影响[J].实用美容整形外科杂志，2002，13(6)：324-326.

[6]王美娥，潘惠娟，许建阳，等.金铁锁对实验性类风湿性关节炎大鼠痛阈及其脑儿茶酚胺类神经递质的影响[J].中国临床康复，2005，9(10)：96-97.

[7]ABBADIE C, BESSON J M. C-fos expression in rat lumbar spinal cord during the development of adjuvant induced arthritis[Z], 1992: 985.

[8]TolleTR, CASTROLOPES J M, COIMBRA A, et al. Opiates modify induction of c-fos proteoncogene in the spinal cord following noxious stimulation[Z], 1990: 46.

[9]王学勇，张元，许建阳，等.金铁锁总皂苷镇痛作用及其对佐剂性关节炎大鼠c-fos基因的表达的影响[J].中国实验方剂学杂志，2010，16(3)：94-96.

[10]田均勉.中药金铁锁的系统化学成分研究[D].上海：第二军医大学，2011：1-194.

[11]黄淑凤，孟建国，孙鑫，等.大血藤对苯酚胶浆致盆腔炎模型大鼠血清PGI2、TXA2的影响[J].陕西中医学院学报，2012，35(5)：69-70.

[12]郭常安，陈峥嵘，张秀荣.骨关节炎基质金属蛋白酶1、2、3及其抑制物的表达与软骨退变的关系[J].复旦学报:医学版，2002，29(4)：244-246.

[13]付钰，王光义.中药大血藤对佐剂性关节炎大鼠滑膜细胞MMP-2、MMP-9的影响[J].贵州医药，2009，33(12)：1097-1099.

[14]傅欣，林霖，张继英，等.骨性关节炎兔关节软骨、关节液细胞因子IL-1β和TNF-α变化的研究[J].中国运动医学杂志，2007，26(6)：709-713.

[15]POOLER A R. Cartilage in health and disease.In:Koopman[C]//WJ, 2005: pp223-pp269.

[16]KOBAYASHI M, SQUIRES G R, MOUSA Aisha, et al. Role of interleukin-1 and tumor necrosis factor alpha in matrix degradation of human osteoarthritic cartilage[J]. Arthritis Rheum, 2005, 52(1): 128-135.

[17]邓廉夫，柴本甫，杨庆铭.肿瘤坏死因子-α和白细胞介素-6对人关节软骨细胞胶原基因表达的影响[J].中国运动医学杂志，1999，18(2)：109-110, 138.

[18]管剑龙，韩星海，袁国华，等.骨关节炎患者血清和滑液中金属蛋白酶-2和-9的研究[J].中华风湿病学杂志，2001，5(2)：102-105.

[19] NEIDE J，SCHLZE M，SOVAI L，et al.Practical significance of cytokine determination in joint fluid in patients witll arthroses or rheumatoid arthritis[J].Orthop Ihre Grenzgeb，1996，134：381-385.

[20]付钰.中药大血藤对佐剂性关节炎大鼠血清TNF-α、IL-6的影响[J].现代医院，2007，7(9)：37-39.

[21]凌家艳，薛莎，沈霖.大血藤外敷配合中药内服治疗急性痛风性关节炎64例[J].中国中医急症，2013，22(6)：1036-1037.

[22]八角枫碱肌肉松弛作用的研究[J].中医杂志，1974(10):45-46.

[23]翟科峰，王青遥，叶竹青，等.八角枫化学成分的系统定性研究[J].时珍国医国药，2012，23(2)：295-296.

[24]张威，徐红梅，任娜，等.八角枫对佐剂性关节炎大鼠的治疗作用及毒性[J].合肥工业大学学报:自然科学版，2012，35(6)：832-836.

[25]常志青.中草药肌松剂——华瓜木的研究[J].中药通报，1981(5)：34-36.

[26]刘娴，刘道芳，刘海兵，等.汉桃叶抗炎镇痛作用有效部位的筛选[J].安徽医药，2011，15(12)：1491-1493.

[27]孙学蕙，曲莉莎，郭振波，等.透骨香药理作用及毒性研究[J].贵阳中医学院学报，1989(3)：56-58.

[28]黄聪，王云峰，邓炜.透骨香微乳镇痛抗炎作用的实验研究[J].贵阳中医学院学报，2012，34(2)：18-20.

[29]覃容贵，龙庆德，秦拴梅，等.不同炮制方法对透骨香抗炎镇痛作用及水杨酸甲酯苷含量的影响[J].时珍国医国药，2013，24(2)：409-410.

[30]谢笑龙，黄燮南，吴芹.透骨香药酒长期毒性的研究[J].贵阳中医学院学报，1998，20(2)：59-61.

[31]熊双贵，张友健，付文心，等.透骨香按摩乳治疗软组织损伤263例临床观察[J].贵阳中医学院学报，1992，14(4)：27-29.

(收稿日期：2015-09-21)

[中图分类号]R274.9

[文献标识码]A

DOI:10.11851/j.issn.1673-1557.2016.02.004

通信作者：刘毅，1020497493@qq.com

优先数字出版地址：http://www.cnki.net/kcms/detail/51.1688.R.20160311.2142.018.html