减小土壤有效磷测定误差的方法探讨

独瑜

（甘肃省陇南市礼县农业技术推广中心，甘肃 礼县 742200）

减小土壤有效磷测定误差的方法探讨

独瑜

（甘肃省陇南市礼县农业技术推广中心，甘肃 礼县 742200）

土壤有效磷含量是土壤肥力的重要指标。为了准确测定土壤中有效磷的含量，更好地指导施肥，本人经过多年试验，在有效磷测定试剂的选择、配制以及操作规程各环节不断总结经验，提出了各环节应注意的事项，以减小有效磷测定误差。

土壤有效磷；操作规程；注意事项；误差

一、正确选择测定方法和测定仪器

根据《全国测土配方施肥技术规范》的要求，土壤有效磷含量的测定一般采用碳酸氢钠提取-钼锑抗比色法，使用仪器为北京普析通仪器有限责任公司生产的T6S紫外分光光度计，往复式振荡器等。

二、准确配制试剂

严格按《规范》要求的步骤、顺序进行准确配制，在试剂的配制和保存过程中，要经常注意观察药品、试剂的颜色，发现异常，应及时找原因，重新配制。同时，要选用质量合格的药品、试剂，最好使用固定生产厂家的药品和试剂，以减小药品、试剂带来的系统误差。

（一）碳酸氢钠浸提剂的配制方法及注意事项

1.严格控制酸碱度。

严格按照操作规程配制好浸提剂后，要用10%氢氧化钠溶液调PH值8.5，然后用水稀释至1 000 mL，贮存于聚乙烯或玻璃瓶中备用。注意，在首次调节PH时，必须少量多次地添加氢氧化钠，如果调节的PH值＞8.5，需用稀盐酸回调。第二次以后可直接向碳酸氢钠溶液中加入首次记下的氢氧化钠的用量，然后用酸度计校准即可。如更换不同批号的碳酸氢钠或氢氧化钠时，则须按首次配制调节PH。配制好的碳酸氢钠浸提剂贮存于磨口玻璃瓶中，将瓶塞塞好，待用。如贮存期超过15天左右，使用时应重新校正PH。

2.严格控制水土比。

将百分之一电子天平预热30min，校准后准确称取2.50g风干土样于15Oml塑料瓶中，再准确量取50ml碳酸氢钠浸提剂加入塑料瓶中，拧紧瓶盖，上下摇动多次。一方面检查瓶盖是否密封不漏液：另一方面将土、液摇匀，以确保在振荡过程中溶液不漏洒，且土样与浸提剂彻底混匀。

3.严格控制浸提温度和振荡时间。

浸提液和浸提环境的温度对Olsen法测定土壤有效磷影响极大。在10℃～30℃范围内，有效磷测定值随温度升高而增加，且随着土壤含磷量的高低，其影响程度也不同，因此，严格控制提取温度对测定有效磷含量极其重要。浸提液温度保持25℃为宜，振荡时间控制为30 min（浸提振荡应配备控温设备，确保温度控制为25±1℃）。

4.严格控制振荡时间，及时过滤。

将盛有2.50g土样、50ral碳酸氢钠浸提剂的塑料瓶置于振荡频率为(180±20)r／rain的振荡器中，固定其位置，振荡(30±1)min后，立即用无磷滤纸过滤于干燥的150ml三角瓶中，若发现滤液混浊，要重新过滤。土样浸提液振荡后应立即过滤，否则少量的磷会被再次固定，导致测量结果较实际含量偏低。同时，在浸提过程中，还要注意，因橡皮胶塞中含有磷，故浸提振荡时用塑料瓶较好，否则测定结果会偏高。

（二）钼锑贮备液的配制

钼锑钪配制时应注意以下几点：配制钼锑贮备液时，最好将配制稀硫酸溶液的玻璃器皿底部浸入冷水中，然后将浓硫酸缓缓注入约2倍于浓硫酸量的纯水中，同时不断地搅匀，同时配制该试剂时，应根据样品的多少现用现配，因为此溶液有效期不长，易氧化、变色。

（三）磷标准贮备液的配制

准确称取经105℃烘干2 h后的磷酸二氢钾（优级纯）0.4390 g，用水溶解后加入98%浓硫酸5 ml，再转到1 000 ml的容量瓶中，用水定容后即为100 ug/mL磷标准贮备液，可在冰箱中长期保存。（注意：配制磷标准贮备液时，采用优级纯的磷酸二氢钾，先经105℃烘干2h，待冷却后再准确称取配制）。

（四）显色剂的配制及显色

1.精确配制显色。

称取0.50 g抗坏血酸（左旋，旋光度+21～220）溶于100 mL钼锑贮备液中，其有效期在室温下为24h，当冰箱温度为2～8℃时可贮存7d。

2.准确显色。

（1）严格控制显色液温度.浸提液中加入抗坏血酸显色剂后，形成的锑磷钼杂多酸在常温（20～25℃）下易被抗坏血酸还原为磷钼蓝而变色，因此显色液温度以20～25℃为宜。温度偏低，则显色偏淡，测量结果低于实际值；反之，温度过高，显色偏深，测量结果高于实际值；当气温过低时，可将显色液放在恒温培养箱中完成显色。

（2）严格控制显色时间。当过滤浸提液加入抗坏血酸显色剂，排出CO2定容后，在高于20℃的室温下放置30 min，可达到土壤有效磷测定的显色要求。当气温过低时，可适当延长显色时间。浸提液显色后，须在8 h内测试完毕。

三、标淮曲线的配制

配制标准曲线，要求其相关系数r为0.9990。当土壤中有效磷含量过高，超过标准曲线的覆盖范围时，误差增大，可通过调整分取倍数，使磷含量在标准曲线的含盖范围内。调整分配倍数后，再用国家标准土样测试，其结果具有较高的精确度。从本人多年测定经验可知，分取倍数以50/25最佳。本人采用此分取倍数测定省配盲样土壤有效磷，其结果达到省站要求的误差范围。

（2015年6月18日所制标准曲线）

四、紫外分光光度计测定

（一）仔细检查，排除比色皿误差

当土壤中有效磷含量被全部浸提出来，而且完全显色后，就用用T6 S型紫外可见分光光度计进行测定。测定因不同比色皿之间可能会存在吸光度差异，即使是吸光度相同的比色皿，使用一段时间后也会出现差异。因此八连池中同时使用的8个比色皿，在使用前可注入碳酸氢钠浸提剂，同时放入1～8号比色池中，先按2次校零键，再按测量键，检查其吸光度是否一致，若差异较大，应及时调换。另外，比色皿要勤清洗，每次用完后在蒸馏水中浸泡数分钟后再冲洗干净。比色皿内壁若有比色液蓝色附着时，可用碳酸氢钠溶液浸泡后再冲洗干净。

（二）排除比色液气泡

比色液中的CO2排不干净，易造成吸光值误差，所以滤液中加入显色剂后，要充分摇匀，以便使CO2逸出。当比色液注入比色皿后，要对着光亮处进行观察，若有气泡可用手指轻压比色皿磨砂面，气泡逸出后再进行测定。在加注比色液时，比色液常常会溢出到比色皿外，应及时用滤纸吸去水分，用擦镜纸擦拭干净后再入池测定。

五、测定数据的处理

（一）正确计算有效磷含量

按照有效磷，mg kg-1=C*V*D*1000/m*1000计算土壤有效磷的含量。（C——从标准曲线上查得的显色液中的磷的浓度；V——显色液的体积；D——分取倍数）

（二）细心设置对照，减小偶然误差

测定每批样品时，要做空白试验、平行试验，并且带一个参比样(可自制)，以检测测定结果的准确性，不准确的要查找原因，重新测定。

（三）规范操作规程，减小系统和偶然误差

测定中所用移液管、塑料瓶、三角瓶、容量瓶、瓶盖、瓶塞、漏斗都要用自来水多次冲洗，再用纯水冲洗，且需烘干后使用。测定吸光度的比色皿，可用稀盐酸浸泡一夜后，再依次用自来水、纯水冲洗干净，然后浸泡于纯水中待用，若长期不用，应放置于干燥盒内保存。

[1]全国测土配方施肥技术规范[S].2011．

[2]程乐明．碳酸氢钠浸提-钼锑抗比色法测定土壤有效磷的注意事项[J].现代农业科技，2009，32(05).

(编辑：刘国华)

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1673-9019(2016)08-0044-02

2016-03-29

独瑜（1971-），女，甘肃礼县人，高级农艺师，主要从事农业技术推广工作。