猪瘟乳兔疫苗的免疫效果实验

孙世宇

（辽宁省动物疫病预防控制中心，辽宁沈阳 110164）



猪瘟乳兔疫苗的免疫效果实验

孙世宇

（辽宁省动物疫病预防控制中心，辽宁沈阳 110164）

猪瘟是由猪瘟病毒引起的猪的一种急性或慢性、热性和高度接触性传染病，严重危害我国养猪业，属于国家一类动物疫病。1956年我国猪瘟兔化弱毒苗培育成功，证明安全有效，至此，我国在猪瘟疫苗的研究中取得了重大突破。猪瘟兔化弱毒苗主要包括脾淋苗和乳兔苗，乳兔苗是通过向乳兔体内接种猪瘟兔化弱毒，选择发生正确病变的乳兔，解剖，取其肌肉和肝、肾，进行研磨、过滤，获得疫苗。本文选取某种猪瘟乳兔疫苗，对其进行检验，主要进行安全检验、效力检验。

1　试验材料

乳兔（5日龄），家兔（1.5～3kg），豚鼠（330～450g）；Bal B/C小鼠。

2　方法

2.1安全检验

（1）用灭菌生理盐水稀释疫苗，皮下注射Bal B/C小鼠5只，各0.2ml；肌肉注射豚鼠2只，各1ml。观察10d，每日检查体温，全部存活则疫苗合格。

（2）选用经中和试验方法检测无猪瘟抗体的健康断奶猪，注苗前观察5～7d，测体温2次/日。疫苗按瓶签注明的头份用灭菌生理盐水稀释成每1ml含6头份疫苗，肌肉注射猪4头，5ml/头。注苗后，每日上下午测体温，观察21日。体温、精神、食欲与注苗前相比没有明显变化，或体温升高超过0.5℃～1℃，稽留〈2日，或减食〈1日，疫苗可判为合格。如有1头猪体温超过常温1℃～1.5℃，稽留不超过两个温次，疫苗也可判为合格。如有1头猪的反应超过上述标准；或出现可疑的其他体温反应和其他异常现象时，可用4头猪重检1次，重检的猪仍出现同样反应，疫苗应判为不合格。

2.2效力检验

（1）取两支疫苗，用生理盐水将每头份疫苗稀释150倍，每支接种体重相同家兔2只，每只兔耳静脉注射1ml。家兔接种后，上下午各测体温一次，48h后，每隔6h测体温一次，根据体温反应和攻毒结果进行综合判定。

（2）定型热反应（++），潜伏期48～96h，体温上升呈明显曲线，至少有3个温次超过常温1℃以上，稽留18～36h，如果超过42h，则必须攻毒。

（3）轻热反应（+），潜伏期48～96h，体温上升呈明显曲线，至少有个温次超过常温0.5℃以上 稽留12～36h。

（4）可疑反应（±），潜伏期48～96h，体温曲线起伏不定，稽留不到12h或潜伏期24～48及96～120 h出现热反应，体温反应呈二次高峰，有一次高峰符合定型热反应（++）或轻热反应（+）标准者，均须攻毒。攻毒后无反应时，该兔热反应可判为定型热或轻热反应。

（5）无反应（-），体温正常者。

3　结果

3.1安全检验

经过实验，乳兔苗可使5只小白鼠和2只豚鼠发热，但不致死。实验4头猪，其中3头接种前后无明显变化，另1头减食1d，表明疫苗安全性合格。

3.2效力检验

两支疫苗分别接种2只家兔后，均表现为定型热反应，可使家兔发热，并稽留18～36h。表明疫苗效力合格。

4　讨论

4.1乳兔苗的特点

乳兔苗的免疫原性很好，免疫接种后可以快速产生坚强的免疫力。但由于疫苗内含有乳兔组织成分，因此，接种后个别猪可能会出现过敏反应。

4.2猪瘟疫苗使用中应注意的问题

为搞好猪瘟的免疫，确保免疫效果，猪瘟免疫要注意以下几个问题：

4.2.1制定合理的免疫程序

猪场要结合本场实际，制定合理的免疫程序，并严格按照程序进行，严禁随意进行免疫。

4.2.2避免疫苗间的影响

据报道，蓝耳病疫苗与猪瘟疫苗同时使用会降低猪瘟抗体合格率，所以猪瘟疫苗和蓝耳病苗注射要间隔10天以上。

4.2.3及时淘汰带毒母猪

带毒母猪不停地排毒，在猪场就是“定时炸弹”。对流产、死产、产木乃胎的母猪及时检测猪瘟病毒，猪瘟抗原阳性的母猪要及时淘汰。

4.2.4过敏反应要及时治疗

注射猪瘟疫苗前要准备好肾上腺素或地塞米松，注射疫苗后要观察10～20min，发现过敏时要及时注射，以免造成不必要的损失。

4.2.5定期监测抗体水平

猪瘟疫苗注射后要定期检测猪瘟抗体，不合格的及时补免。

4.2.6增强饲养管理

实施疫苗注射对机体的影响与所导致的机体反应是相当复杂的。机体反应不仅与疫苗注射剂量有关，而且与机体体质有密切关系。因此，在治疗时要加强对病畜的饲养管理，加强营养，增强体质。

（6）结果判定：注苗后，2只家兔均呈定型热反应（++），或1只兔呈定型热反应（++）、另1只兔呈轻热反应（+）时，疫苗判为合格；注苗后，1只兔呈定型热反应（++）或轻热反应（+），另1只兔呈可疑反应（±）或2只兔均呈轻热反应（+）时，可在注苗后7～10日攻毒。攻毒时，取对照兔2只，攻毒剂量为50～100倍乳剂。每兔耳静脉注射1ml。攻毒后的体温反应判定标准，热反应（+）为潜伏期24～72h，体温上升呈明显曲线，超过常温1℃以上，稽留12～36h。可疑反应为（±）潜伏期不到24h或72h以上，体温曲线起伏不定，稽留不到12h或超过36h而不下降。无反应（—）体温正常。攻毒后，2只对照家兔呈定型热反应（++），或1只兔呈定型热反应（++），另1只兔呈轻热反应（+），而2只注苗兔均无反应（-），疫苗判合格。注苗后，如有1只兔呈定型热（++）或轻热反应（+），另1只兔呈可疑反应（±）或无反应（-），可对可疑反应兔或无反应兔采用剖杀或采心血分离病毒的方法，判明是否隐性感染；或注苗后，2只兔均呈轻热反应，亦可对其中1只兔分离病毒。方法是：接种疫苗后96～120h之间，将兔剖杀并取脾脏，用生理盐水制成50倍稀释乳剂，接种2只家兔，每只兔耳静脉注射1ml。凡有1只兔潜伏期24～72h出现定型热反应（++），疫苗可判为合格。