付 强,王爱富,李桂珍,邓 桦,陈 芳,马春全(佛山科学技术学院,广东佛山528231)
规模化猪场猪伪狂犬病的病理学诊断与防控
付强,王爱富,李桂珍,邓桦,陈芳,马春全
(佛山科学技术学院,广东佛山528231)
伪狂犬病(Pseudorabies,PR)是由疱疹病毒科伪狂犬病病毒引起的猪和其他多种哺乳动物、野生动物共患的一种急性传染病.2013年3月广东省一规模化猪场发生以母猪流产,仔猪呕吐、排黄色稀粪、部分仔猪有神经症状为特征的急性传染病.经过临床症状、病理剖检与病理组织学、动物试验和PCR技术确诊为猪伪狂犬病.对发病猪群采取了综合防控措施,取得了较好控制效果.
广东省某规模化猪场,有种猪约1 500头,全场种公、母猪分别在4、8、12月份肌肉注射伪狂犬病疫苗1头份,新生仔猪3日龄滴鼻免疫0.5头份.后备母猪分别在140日龄、175日龄肌肉注射伪狂犬病疫苗1头份.建场5年来,一直坚持做伪狂犬病的免疫工作,从未发生过伪狂犬病的大面积流行.但猪场于2013年3月初,母猪流产、死胎、木乃伊胎增多;仔猪出生后腹泻、个别有神经症状,死亡明显增多.截止5月16日,母猪流产120多窝;死亡仔猪800多头.
病初仔猪体温升高达42℃,精神沉郁,食欲减退或废绝,间有呕吐及腹泻;粪便呈黄色米汤样.呼吸困难,喘气,口角有大量唾液和泡沫;个别仔猪出现阵发性痉挛,侧卧倒地,四肢呈游泳状划动、角弓反张;肌肉震颤,遇有声音刺激即发出刺耳且声音嘶哑的尖叫声;后肢肌肉麻痹,步态不稳、卧地不起.
母猪体温升高,食欲减退或废绝.出现流产,早产或生产拖后3~5日.死胎、木乃伊胎明显增多.未见母猪死亡.
剖检多例病死仔猪,全身淋巴结肿胀,部分有明显出血,切面呈大理石样;口腔和上呼吸道内有浆液性黏液,肺淤血、水肿;扁桃体有化脓、溃疡灶(见中插彩版图1);肝脏肿大、淤血,肝被膜下有大量针尖大小的灰黄色或灰白色坏死点(见中插彩版图2);肾脏肿大,淤血,被膜下有针尖大小的出血点,个别见有白色坏死点;脑膜充血、出血和水肿,脑脊液增多;胃和小肠黏膜有广泛性出血点.
剖检取病死仔猪心、肝、脾、肺、肾、胃、肠、淋巴结、脑、扁桃体等组织,10%福尔马林固定,H.E.染色,显微镜检查.
观察结果:心肌肿胀,部分横纹消失,心肌纤维出现溶解断裂,细胞间质有絮状渗出物;心肌间有充血、出血,间质有大量淋巴细胞浸润(见中插彩版图3).肝脏实质中有大小不等的分界明显的坏死灶,坏死主要见于肝被膜下和肝小叶周边区,坏死区内混杂着多量的蓝染的细胞和崩解碎片;肝窦扩张、充血,门管区有少量淋巴细胞和单核细胞浸润,部分肝细胞肿大,颗粒变性,少量肝细胞坏死,细胞核崩解,细胞浆红染,呈嗜酸性小体(见中插彩版图4).脾小体萎缩,鞘动脉血管周围淋巴细胞明显减少.脾索网状细胞增生.脾小体和髓质淋巴细胞变性坏死,胞核固缩、裂解,部分淋巴细胞坏死(见中插彩版图5).肺呈间质性肺炎,肺泡壁毛细血管充血、出血,肺泡腔有炎性细胞浸润,肺泡壁增厚,少量淋巴细胞、单核细胞浸润.肾脏血管球充血、出血,部分血管球裂解消失;肾间质有炎性细胞浸润,以淋巴细胞和单核细胞为主,肾小管部分上皮细胞水肿、变性,管腔狭窄并有细胞管型.脑血管周围出现以单核细胞、淋巴细胞和少量嗜中性粒细胞为主要细胞成分的血管套(见中插彩版图6);神经胶质细胞弥漫性或局灶性增生,形成胶质细胞结节(见中插彩版图7);神经元细胞水肿、变性、坏死,胞核浓染,部分崩解,并伴有小胶质细胞吞噬神经元的噬神经现象和卫星现象(见中插彩版图7).肠系膜淋巴结的淋巴小结生发中心淋巴细胞数量减少、崩解,有充血、出血现象.扁桃体充血、出血,呈灶状坏死,大量细胞崩解,产生大量细胞碎片(见中插彩版图8).
为进一步确定母猪流产原因,3月29日采集流产母猪血清32头份,死亡仔猪脑组织4头份,PCR方法检测变异蓝耳病病毒、乙型脑炎病毒、细小病毒、伪狂犬病病原;ELISA方法[1]检测32头母猪血清伪狂犬病野毒抗体.结果32头流产母猪血清中变异蓝耳病病毒、乙型脑炎病毒、细小病毒、伪狂犬病病毒等抗原检测均为阴性.31份血清伪狂犬病野毒抗体阳性,阳性率为97%.
4头死亡仔猪脑组织中变异蓝耳病毒、乙型脑炎病毒、细小病毒抗原均为阴性;2头伪狂犬病病毒抗原阳性,2头阴性.4头死亡仔猪血清野毒抗体均为阴性.
猪群紧急免疫,全群猪只肌肉注射高效价伪狂犬病活疫苗2头份;为控制继发感染,全群抗生素药物保健,连用7 d.制定猪伪狂犬病控制方案,对种猪群每隔3个月接种1次.仔猪出生后滴鼻高效价伪狂犬病活疫苗0.5头份;7~8周龄肌肉注射1头份,16周龄再肌肉注射1次.后备母猪配种前用弱毒疫苗接种2次,两次间隔4周.认真做好猪场及周围的消灭老鼠、苍蝇、蚊子等工作.
经采取一系列的综合防制措施后,新发病仔猪数量明显减少,已发病仔猪病情明显好转,精神食欲恢复正常.母猪生产情况稳定,疫情得到了控制.
猪伪狂犬病的综合症候群主要包括,怀孕中期母猪流产,怀孕后期感染引起死胎、木乃伊胎、弱仔.新生仔猪表现为神经症状、腹泻[2].典型病理变化包括病死猪肝脏、脾脏有灰白色或黄色坏死点,扁桃体溃疡、坏死灶,肾脏表面出现针尖大小的出血点等病变[3].组织学病变以中枢神经系统的弥散性脑膜脑炎,肝小叶周边区为主的坏死型肝炎,扁桃体、脾淋巴结等器官淋巴细胞坏死,间质性肺炎等为主要特征.学习掌握这些综合诊断要点对该病的快速诊断具有重要意义.现在的伪狂犬病检测试剂盒可区分疫苗及野毒产生的抗体.然而刚开始发病的时候,野毒抗体是很难检测出来的.很多猪场过分依赖血清学或病原学诊断等到能够检测出伪狂犬病野毒抗体的时候,时间上已经延后,母猪流产、仔猪病死率明显增多,损失惨重[5].
2011年底以来,我国出现了猪伪狂犬病病毒变异,不论是毒力基因,还是抗原基因都有变异.由于免疫原性基因变化,使原有疫苗免疫保护力下降,疫苗免疫保护时间缩短,是一些做过疫苗免疫的规模猪场发病的原因之一[5].
在猪伪狂犬病的防控上,由于病毒的变异只是发生在部分抗原表位上[6],这样就需要更高效价的抗体才能产生比较坚强的免疫保护.因此需要免疫足够的剂量的抗原即使用高效价高疫苗,缩短疫苗免疫时间间隔.制定合理的免疫程序,配合综合的管理措施,才能有效的防控伪狂犬病.
[1]Goyal S M,Laughlin T L.Evaluation of two commercial ELISA test kits for the detection of pseudorabies antibodies in pigs[J].J Vet Diagn Invest,1990,2(4):350-352.
[2]宣长和,马春全,林树民,等.猪病混合感染鉴别诊断与防治彩色图谱[M].北京:中国农业大学出版社,2009:35.
[3]宣长和.动物疾病诊断与防治彩色图谱[M].北京:中国科学技术出版社,2006:335.
[4]解伟涛,乔松林,王寅彪,等.2013年河南省猪伪狂犬病野毒感染血清学调查[J].中国动物传染病学报,2014,22(6):66-70.
[5]吕艳秋,姚学军,王天坤,等.免疫猪群的伪狂犬病野毒感染情况调查报告[J].当代畜牧,2013,11:17-18.
[6]李春华,王英,蒋凤英,等.猪伪狂犬病研究进展[J].动物医学进展,2008,29(23):68-72.
S858.28
B
0529-6005(2016)06-0043-02
2015-12-25
广东省省级科技计划项目(2015B020203006);广东省现代农业产业技术体系创新团队项目
付强(1983-),男,讲师,博士,主要从事动物临床工作,E-mail:frankjohn.fu@hotmail.com
王爱富(1991-),男,硕士生,研究方向为兽医病理学,E-mail: 1309387721@qq.com
注:王爱富与付强对本文具有同等贡献
马春全,E-mail:machunquan@263.net