趋化因子配体2、5在前列腺癌组织中的表达

刘页玲　尹春华(江西护理职业技术学院，江西　南昌　330052)



趋化因子配体2、5在前列腺癌组织中的表达

刘页玲尹春华1(江西护理职业技术学院，江西南昌330052)

〔摘要〕目的探讨趋化因子配体( CXCL) 2、5在前列腺癌( PC)组织中的表达。方法156例PC患者根据其所患病症类型分为三组，PC组82例，前列腺上皮内瘤( PIN)组32例，良性前列腺增生( BPH)组42例，Western印迹检测各组CXCL2和CXCL5的表达情况。结果PC组、PIN组的CXCL2和CXCL5的阳性表达率高于BPH组( P＜0．05)。PC组的CXCL2和CXCL5的阳性表达率高于PIN组( P＜0．05)。Western印迹结果表明: CXCL2和CXCL5在PC组相对表达量，PC组＞PIN组＞BPH组( P＜0．05)。结论CXCL2和CXCL5在PC中高表达。

〔关键词〕趋化因子配体5;前列腺癌

1南昌大学第一附属医院妇产科

第一作者:刘页玲( 1977－)，女，硕士，副教授，主要从事神经解剖学研究。

前列腺癌( PC)是男性常见的泌尿系统恶性肿瘤〔1〕。文献认为〔2〕，肿瘤的侵袭和转移过程是由趋化因子及其家族成员严密调控的。部分趋化因子具有促血管生成的作用，如趋化因子配体( CXCL1、2、5、8)等。本文拟观察CXCL2和CXCL5在PC组织的表达。

1材料与方法

1. 1一般资料收集2005年1月至2014年1月在南昌大学第一附属医院就诊的患者标本，年龄52～81〔平均( 68．2± 8．1)〕岁。根据其病症类型分为PC组82例;前列腺上皮内瘤( PIN)组32例;良性前列腺增生( BPH组) 42例。

1. 2试剂山羊CXCL2多克隆抗体、小鼠抗人CXCL5单克隆抗体、小鼠抗人β－actin单克隆抗体均购自Abnova公司。Western印迹发光试剂购自普利莱公司。SP染色试剂盒、DAB显色剂、抗体稀释液均购自北京中山生物技术有限公司。

1. 3方法严格按照二步快捷免疫组化法试剂盒使用说明书进行操作，行CXCL2和CXCL5免疫组化染色，二氨基联苯胺( DAB)显色。以磷酸盐缓冲液( PAB)代替一抗行阴性染色，用已知阳性切片做阳性对照。根据染色的深度及阳性细胞的数量分别计分〔3〕。无着色为0分，淡黄色为1分，棕黄色为2分，棕褐色为3分。阳性细胞数＜5%为0分，5%～25%为1分，26% ～50%为2分，51%～75%为3分，＞75%为4分。两项结果相加，＜2分为阴性，≥2分为阳性。

1. 4 Western印迹按每孔30 μg上样，10%聚丙烯酰胺凝胶( SDS－PAGE) 120 V电压下分离，再用30 V电压将凝胶上的蛋白湿转至硝酸纤维素膜( NC膜)上。5%脱脂奶粉将膜封闭2 h后，加人一抗(抗体稀释度参见说明书)，4℃孵育过夜。Tris盐酸缓冲液( TBST)充分漂洗后加人辣根过氧化物酶标记的二抗(抗体稀释度参见说明书)孵育1 h。最后用Western印迹发光试剂显色，暗室曝光显像于胶片上。

1. 5统计学方法应用SPSS13．0软件进行χ2检验。

2结果

2. 1 CXCL2和CXCL5的表达情况PC组、PIN组CXCL2〔53 例( 64．6%)、8例( 25．0%)〕和CXCL5〔49例( 59．8%)、11例( 34．4%)〕的阳性表达率高于BPH组〔均为2例( 4．8%)〕( P＜0．05)。PC组的CXCL2和CXCL5的阳性表达率都高于PIN组( P＜0．05)。

2. 2 CXCL2和CXCL5的蛋白表达Western印迹结果表明，CXCL2和CXCL5相对表达量PC组＞PIN组＞BPH组( P＜0．05)。见图1。〔4〕

3讨论

趋化因子能使相关细胞发生趋化运动。这类小分子通过与受体结合而引起多种生理反应〔5〕，如在细胞的生长、分化及凋亡中发挥作用，还可使淋巴细胞向炎症部位聚集，启动炎症反应〔6〕，除此之外还具有促进病毒感染和肿瘤的生长及转移等功能。CXCL5也称上皮中性粒细胞活化肽( ENA)－78，属于CXC趋化因子家族的成员之一〔7〕，可与其受体CXCR2发生特异性结合，引起促血管生成的生物学效应，进而促进肿瘤生长、发展及转移。CXCL2也属于趋化因子家族的成员之一，也称巨噬细胞炎性蛋白( MIP)－2。CXCL2结构上与CXCL1、5、8具有同源性〔8〕。本研究表明CXCL5与PC的生成有密切的关系。肿瘤的分化程度越低、恶性程度越高、病变程度越强，CXCL5的表达越高，表明CXCL5可能与PC的发展、浸润及转移有关，其可能机制为: CXCL5与其受体CXCR2特异性结合后，激活了酪氨酸激酶受体，生成新生血管，为PC的生长及发展提供养分及转移通道〔9〕。笔者推测，肿瘤细胞表面的CXCR2能够增强肿瘤的增殖及侵染能力，破坏内皮的屏蔽功能，促进肿瘤细胞骨架的重建，这有待进一步深入研究。

4参考文献

1 Davis EJ，Beebe－Dimmer JL，Yee CL，et al．Risk of second primary tumors in men diagnosed with prostate cancer: a population－based cohort study〔J〕．Cancer，2014; 120( 17) : 2735－41．

2 Kogan－Sakin I，Cohen M，Paland N，et al．Prostate stromal cells produce CXCL－1，CXCL－2，CXCL－3 and IL－8 in response to epithelia－secreted IL－1〔J〕．Carcinogenesis，2009; 30( 4) : 698－705．

3袁振，蒋雷鸣，王松．趋化因子受体7和血管内皮生长因子C在前列腺癌中的表达〔J〕．中国老年学杂志，2013; 33( 19) : 4695－7．

4 Torisawa YS，Mosadegh B，Bersano－Begey T，et al．Microfluidic platform for chemotaxis in gradients formed by CXCL12 source－sink cells〔J〕．Integr Biol，2010; 2( 11－12) : 680－6．

5 van der Meulen AA，Biber K，Lukovac S，et al．The role of CXC chemokine ligand( CXCL) 12－CXC chemokine receptor( CXCR) 4 signalling in the migration of neural stem cells towards a brain tumour〔J〕．Neuropathol Appl Neurobiol，2009; 35( 6) : 579－91．

6 Wong YF，Cheung TH，Lo KW，et al．Identification of molecular markers and signaling pathway in endometrial cancer in Hong Kong Chinese women by genome－wide gene expression profiling〔J〕．Oncogene，2007; 26 ( 13) : 1971－82．

7 Okabe H，Beppu T，Ueda M，et al．Identification of CXCL5/ENA－78 as a factor involved in the interaction between cholangiocarcinoma cells and cancer－associated fibroblasts〔J〕．Int J Cancer，2012; 131( 10) : 2234－41．

8 Park JY，Park KH，Bang S，et al．CXCL5 overexpression is associated with late stage gastric cancer〔J〕．J Cancer Res Clin Oncol，2007; 133 ( 11) : 835－40．

9 Reiland J，Furcht LT，McCarthy JB．CXC－chemokines stimulate invasion and chemotaxis in prostate carcinoma cells through the CXCR2 receptor 〔J〕．Prostate，1999; 41( 2) : 78－88．

〔2015－03－16修回〕

(编辑袁左鸣/滕欣航)

通讯作者:尹春华( 1976－)，男，硕士，副主任医师，主要从事妇科肿瘤学研究。

基金项目:江西省卫生厅科技计划( No．20142008)

〔中图分类号〕R737. 25

〔文献标识码〕A

〔文章编号〕1005-9202( 2016) 02-0295-02;

doi:10. 3969/j. issn. 1005-9202. 2016. 02. 018