羊弓形虫病血清学调查及分析

格松

（青海省玉树市隆宝镇畜牧兽医工作站青海玉树815000）



羊弓形虫病血清学调查及分析

格松

（青海省玉树市隆宝镇畜牧兽医工作站青海玉树815000）

弓形虫病是由刚地弓形虫引起的呈世界性分布的一种广泛寄生于人和动物有核细胞中的寄生性原虫病［1］。弓形虫为细胞内原虫，宿主范围十分广泛，是一种能感染多种动物的重要人畜共患寄生虫病，猫科动物为其唯一的终末宿主。感染的猫通过粪便排出弓形虫卵囊，污染饲料、水源和环境，被认为是弓形虫的重要传染源。羊的弓形虫病除了造成怀孕母羊流产外，多数成年羊为隐性感染，主要表现为怀孕母羊流产、死胎、先天畸形等，严重的母羊和羔羊都死于呼吸系统和神经症状的症状。对免疫力低下或缺陷的患者危害更严重，给养羊业造成了巨大的经济损失［2］。而且弓形虫是一种食源性原虫，严重威胁人类的健康。

间接血凝技术（IHA）具有特异性强、敏感性高、价格低廉、操作简单的特点，是流行病学调查和辅助诊断理想方法，现在国内外已有多种弓形虫免疫诊断试剂盒［3］。为初步掌握青海省玉树地区羊弓形虫病的感染水平和流行规律，切实做好该地区弓形虫病的监测工作，本实验我们应用间接血凝试验（IHA），对该地区7个规模化养殖场部分羊只进行了血清学检测，以期对弓形虫病在本地区的流行情况提供参考，对畜产品健康发展和人类健康都具有重要意义。

1材料与方法

1.1血清样品采集与处理

采集青海省玉树地区7个规模化养羊场不同品种的羊血清共计560份，全部采用颈静脉抽取适量的血液，做好标记。将采集的血液摆成斜面，于37℃恒温培养箱静置1～2 h，置于4℃冰箱中24 h后分离血清，保存待检。取待检血清0.5 mL置于试管中，加入1%正常兔血清1.5 mL，56℃灭活30 min，加入未致敏的绵羊红细胞2 mL，4℃过夜。

1.2主要试剂

弓形虫间接血凝试验诊断液，弓形虫标准阴性和阳性对照血清及稀释液等均购自于中国农业科学院兰州兽医研究所。

1.3间接血凝试验检测方法

1）铺板在96孔V型凝集反应板中加入稀释液，每孔加入50μL。

2）待检血清倍比稀释每4孔一组，分别为一份样品血清做对倍梯度稀释：第一孔加被测样品血清50μL，混匀后吸取50μL加入第二孔，混匀后吸取50μL加入第三孔，混匀后吸取50μL加入第四孔，混匀后吸取50μL弃去。另外每块板凝集反应板上设阴性血清、阳性血清、空白稀释液（不加血清）各一组。

3）加入抗原，每孔加衣原体属抗原致敏绵羊红细胞25μL，将凝集反应板放在微量振荡器振荡 1 min，检查各反应孔红细胞混匀与否，不出现红细胞沉淀视为合格。将96孔V型反应板放于无菌湿盒中静置在37℃恒温箱2 h后，进行结果判定。

1.4结果判定

标准阳性血清各稀释度应完全凝集，标准阴性血清、稀释液空白对照不出现凝集现象，实验结果成立。实验结果成立的条件下，稀释度≥1∶64且凝集在（++）及以上的样品判为阳性；稀释度≤1∶16（++）凝集的样品判为阴性；介于二者之间判为可疑，可疑的样品重新检验，仍然可疑的判为阴性。

红细胞全部凝集，在孔形成一层均匀的膜，布满整个孔底者为“++++”；红细胞多数凝集，在孔底形成一层薄膜，面积稍小者为“+++”；红细胞部分凝集，在孔底形成薄层，边缘松散或呈锯齿状者为“++”；红细胞少量凝集，在孔底有小圆点者为“+”；红细胞沉于孔底，但周围不光滑或中心有空斑者为“±”；红细胞完全沉于孔底，呈光滑的圆点者为“-”。“++”以上的凝集判为阳性凝集。

2结果与分析

弓形虫间接血凝检测显示：从7个规模化羊场采集的560份羊血清，阳性数为92份，感染率为16.43%，且7个规模化养羊场都有感染，但不同羊场衣原体病感染率有所差异，最高的羊场阳性率可达28.75%，最低的感染率为8.75%，该结果表明青海省玉树地区羊群中普遍存在弓形虫病。

3讨论

弓形虫病是一种重要的人兽共患寄生虫病，世界各地普遍存在，几乎所有的温血动物都能感染，作为弓形虫的储存宿主，以猫的重要性最大。弓形虫是细胞内寄生原虫，常表现为隐性感染，没有明显的临床特征，许多养殖单位不够重视。并且弓形虫作为一种重要的食源性原虫，不仅对养羊业造成巨大的的经济损失，而且对人的身体健康也存在严重的危害。因此，应该高度重视弓形虫病对养羊业的严重危害，做好预防和药物治疗工作，尽可能降低其给食品公共卫生安全造成隐患。

我国羊弓形虫的感染比较严重，据国内流行病学调查报道多数高于20%。本实验通过对青海省玉树地区560份羊血清进行弓形虫血清抗体的检测，平均感染率为16.43%，最高阳性率可达28.75%，可见该地区羊群中普遍存在弓形虫病的感。但由于整个地区羊群基数较大，本试验抽检样品数有限，且多数属于规模化羊场，结果具有一定的局限性，还需要进一步进行弓形虫病流行病学调查。（编辑：赵晓松）

参考文献：

［1］陆承平.兽医微生物学［M］.北京：中国农业出版社，2001.378-382.

［2］李晓卉，陆艳，马少丽.青海改良种绵羊弓形体病的血清学调查［J］.青海畜牧兽医杂志，2004，34（1）：22.

［3］罗才庆，袁匀，黄剑梅，等.龙岩市部分地区牛、羊弓形虫病的血清学调查［J］.中国动物保健，2013，15（7）：13-16.

doi：10.3969/j.issn.1008-4754.2016.6.029

作者简介：格松（1968-），男，藏族，青海玉树人，中专，兽医师，研究方向：畜牧兽医。