浅谈动物检测样品的采集、保存、运输

兰彩霞

（宁夏泾源县动物疾病预防控制中心，宁夏泾源 756400）



浅谈动物检测样品的采集、保存、运输

兰彩霞

（宁夏泾源县动物疾病预防控制中心，宁夏泾源 756400）

动物病料样品的采集是动物疾病诊断、流行病学调查或免疫监测所不可缺少的重要步骤，而实验室检测结果的准确性、有效性除受实验方法、检测试剂、实验操作等因素的影响外，还要受到样品的采集，运输、保存等因素的影响。本文通过检测样品在采集、保存和运输过程中必须注意的几个主要环节，说明样品是监测工作顺利开展的基础，也决定了实验结果的可靠性。

1 样品采集原则

1.1 剖检基本条件

凡发现患畜急性死亡怀疑是炭疽，则不可随意解剖，应采取患畜耳尖静脉的血液做初步检验，万不得已时，局部解剖作脾脏触片的显微镜检查。只有确定不是炭疽后，方可进行剖检。

1.2 采取病料的种类

根据不同的疾病或检验目的，采其相应的脏器、内容物、分泌物、排泄物或其他材料；进行流行病学调查、抗体检测、环境卫生检测时，样品的数量应满足统计学的要求。采样时应小心谨慎，以免对动物产生不必要的刺激或损害和对采样者构成威胁。

1.3 内脏病料的采取

如患畜已死亡，应尽快采集，最迟不超过6h；血液样品在采集前一般禁食8h。

1.4 技术人员的安全

应做好人身防护，严防人畜共患病感染；应防止污染环境，防止疫病传播，做好环境消毒和病害肉尸的处理。

2 器械消毒

刀、剪、镊子等用具煮沸消毒30min，使用前用酒精擦拭，用时进行火焰消毒。器皿经103kPa高压30min ，或经160℃干烤2h灭菌；注射器和针头煮沸30min。采取一种病料，使用一套器械与容器，不可重复采其他病料或容纳其他脏器材料。采过病料的用具应先消毒后清洗。检查过的器械要放在2mol/L的氢氧化钠（NaOH）溶液中浸泡2h以上，才可再使用。

3 血液样品的采集

3.1 采血方法

对动物采血部位的皮肤先剃毛，75%的酒精消毒，待干燥后采血，采血可用针管、针头、真空管，将血液沿管壁滴到开口的试管内。

3.2 采血种类

3.2.1 全血样品

进行血液学分析，细菌、病毒或原虫培养，通常用全血样品，样品中加抗凝剂枸橼酸钠。采血时应直将血液滴入抗凝剂中，并缓缓连续摇动，充分混合。

3.2.2 血清样品

用作血清样品的血液中不加抗凝剂，血液在室温下静置2h～4h（防止曝晒），待血液凝固，经低速离心分离出血清。若需长时间保存，则将血清置20℃以下保存，但要尽量防止或减少反复冻融。样品容器上贴详细标签。

4 一般组织

4.1 采样方法

用常规解剖器械剥离病、死动物的皮肤，体腔用消毒的器械打开，所需病料按无菌操作方法从新鲜尸体中采集。剖开腹腔后，注意不要损坏肠道。

每个组织块应单独放在已消毒的容器内，容器壁上注明日期、组织或动物名称。注意防止组织间相互污染。

4.2 采样种类

4.2.1 病原分离样品的采集

用于微生物学检验的病料应新鲜，尽可能地减少污染；用于细菌分离的样品采集，首先以烧红的刀片烫烙脏器表面，在烧烙部位刺一孔，用灭菌后的铂耳伸入孔内，取少量组织或液体，作涂片镜检或划线种于适宜的培养基上。

4.2.2 组织病理学检查样品的采集

采集包括病灶及临近正常组织的组织块，立即放入10倍于组织块的10%福尔马林溶液中固定。组织块厚度不超过0.5cm，组织块切忌挤压、刮摸和用水洗。如作冷冻切片用，则将组织块放在0℃～4℃容器中，尽快送实验室检验。

5 排泄物、肠内容物及其他检查样品的采集

5.1 肠管

只需选择病变最明显的部分，将其中的内容物弃去，用灭菌生理盐水轻轻冲洗；肠内容物放入盛有灭菌的30%甘油盐水缓冲保存液中送检；从体外采集粪便，用拭子小心地插到直肠黏膜表面采集粪便，然后将拭子放入盛有灭菌的30%甘油盐水缓冲保存液中送检。

5.2 呼吸道

应用灭菌的棉拭子采集鼻腔、咽喉或气管内的分泌物，蘸取分泌物后立即将拭子浸入保存液中，密封低温保存。常用的保存液有pH7.2～7.4的灭菌肉汤或磷酸盐缓冲盐水，一般每支拭子需保存液5mL。

6 中小家畜及禽类整体样品

6.1 胎儿

将流产后的整个胎儿，用塑料薄膜、油布或数层不透水的油纸包紧，装入木箱内，立即送往实验室。

6.2 小家畜及家禽

将整个尸体包入不透水塑料薄膜、油纸或油布中，装入木箱内，送往实验室。

7 送检样品的记录

送往实验室的样品应有一式二份的流调登记表、采样登记表，一份随样品送实验室，另一份备案。注明要求做何种试验；

8 结论

（1）样品采集要有代表性和合理性。开展疫病监测采样时要根据监测方案的整体要求、目的、方法，选择具有代表性的场或点，尽可能充分、全面地反映总体的特征。同时还要考虑动物的饲养密度、日龄、体质强弱、地势及交通特点等因素，只有这样，采集的监测样品才能综合评估出总体疫病的流行和分布趋势。

（2）样品采集的时效性和适量性。由于监测项目的不同，样品采集是有时间要求的，目前疫病监测主要通过病原监测和抗体监测两种方法。不适宜在免疫后15天内采样，无论是采取抗体监测还是病原检测，都会影响监测结果的真实、准确。

（4）要避免样品泄漏。装在试管或广口瓶中的病料密封后装在冰瓶中运送，防止试管和容器倾倒。如需寄送，则用带螺口的瓶子装样品，并用胶带或石蜡封口。将装样品的并有识别标志的瓶子放到更大的具有坚实外壳的容器内，并垫上足够的缓冲材料。

（5）制成的涂片、触片、玻片上注明号码，并另附说明。玻片最好用涂片盒子盛装，再用自封袋包装，在保证不被压碎的条件下运送。

（6）所有样品都要贴上详细标签。

参考文献

[1] 钟群芳.浅谈动物样品采集、运输与保管的体会[J].畜牧兽医科技信息，2006，（2）：58.