一株三黄鸡鸡痘病毒的分离鉴定

张 韬

（吉林省辉南县动物疫病预防控制中心，吉林辉南 135100）



一株三黄鸡鸡痘病毒的分离鉴定

张 韬

（吉林省辉南县动物疫病预防控制中心，吉林辉南 135100）

[摘 要]通过临床症状观察，三黄鸡病鸡产生典型的皮肤病变，通过绒毛尿囊膜接种分离并进行传代培养，病毒EID50测定、病毒理化特性检验、琼脂扩散试验、动物回归试验等进行鉴定。证明2013年3月吉林省吉林市某三黄鸡饲养场500只三黄鸡中的50只发病鸡是鸡痘病毒感染，其病毒感染滴度 EID50为 10-5.56/ml。

[关键词]鸡痘 病毒 分离鉴定

1 鸡痘病毒的特性

1.1 病毒的理化特性

鸡痘病毒对干燥具有强大的抵抗力，痂皮内的病毒可以存活几个月。但在鸡粪和泥土中，活力通常不超过几周。鸡痘病毒抵抗乙醚，对氯仿敏感，但曾报道某些毒株对乙醚的抵抗力不强，phy和Hanson则指出鸡痘病毒对乙醚有抵抗力，Melick则指出对乙醚处理有无抵抗力是痘病毒的准则之一。鸡痘病毒可耐1%石炭酸和0.1% 福尔马林达9d之久。60℃和50℃加热，分别可在10min和30min内使其灭活，胰酶对病毒DNA或病毒的完整性均无影响。对于己有包涵体中脱出的病毒粒子，1%～2%的氢氧化钾或氢氧化钠呈现明显的灭活作用。冷冻干燥和50%甘油盐水可使鸡痘病毒长期保持活力达几年。

1.2 病原特性

鸡痘的病原体是禽痘病毒属的代表株，在分类上属于痘病毒科，经绒毛尿囊膜种9～12日龄SPF鸡胚会出现灶状白色不透明的痘斑，容易在鸡胚皮肤细胞内或原代鸡胚细胞增殖，并且会产生细胞病理性变化。病毒对外界环境有比较高的抵抗力，在完全干燥和阳光照射多周后，上皮细胞屑中的病毒仍能保存活力。但是游离病毒在1%～2%氢氧化钠或钾或10%醋酸中很快能被灭活。在腐败环境中鸡痘病毒很快会死亡，但在冷冻干燥和50%甘油条件下可使病毒长期保持活力，甚至保存几年。

1.3 培养特性

鸡痘病毒在鸡的皮肤或气囊上皮、绒毛尿囊膜外胚层细胞及鸡胚皮肤细胞中以复制方式进行增值。在鸡胚绒毛尿囊膜感染后的典型病变出现局灶性或弥漫性的致密的增生性的痘斑。

2 鸡痘的概述

鸡痘病毒（Fowlpox virus）属于痘病毒科（Poxviridae），为禽痘病毒属（Avipoxvirus）的成员。可以经绒毛尿囊膜种9～12日龄SPF鸡胚会出现灶状白色不透明的痘斑，容易在鸡胚皮肤细胞内或原代鸡胚细胞增殖，并且会产生细胞病理性变化。病毒对外界环境有比较高的抵抗力，在完全干燥和阳光照射多周后，上皮细胞屑中的病毒仍能保存活力。但是游离病毒在1%～2%氢氧化钠或钾或10%醋酸中很快能被灭活。在腐败环境中鸡痘病毒很快会死亡，但在冷冻干燥和50%甘油条件下可使病毒长期保持活力，甚至保存几年。

感染该病毒后，禽的死亡率不高，但是常可使感染的病禽的产蛋量下降及生长发育迟缓，种禽发病后孵化率也会降低，一旦继发其他传染病容易导致大批感染家禽死亡，雏鸡更严重。近几年来，鸡痘频频发生，给养殖业造成很大的经济损失。因此对国家经济具有显著的影响。

3 鸡痘的流行病学

鸡群发生鸡痘原因很多，主要有鸡舍温度高、湿度大、通风不良、鸡群未种鸡痘疫苗、蚊虫叮咬也促使本病的发生，尤其是继发和混合感染，更加剧了鸡痘对养殖业的危害，鸡痘继发葡萄球菌感染、鸡痘和鸡盲肠肝炎混合感染、皮肤型鸡痘继发腺胃炎、鸡痘继发大肠杆菌引起眼结膜炎、鸡痘和腺胃型传染性支气管炎并发、鸡传染性喉气管与黏膜型鸡痘并发等都有报道。

本病一年四季都能发生，夏末和秋季最易流行。任何年龄、性别和品种的鸟类均可感染禽痘病毒。已报道过约20个科近60种野鸟发生该病毒的自然感染（Karstad.L，1971）；鸭和鹅等水禽很少发生，即使感染也无严重症状。鸡痘主要因与病鸡发生直触而感染。白喉鸡痘的呼吸道渗出液中含有大量病毒，可因污染饮水，饲料和用具等而发生间感染。鸡痘病毒不能侵入未破损的皮肤和黏膜，所以一般认为感染是经皮肤或黏膜上的微小擦伤或刺伤而发生的，但病毒也可以经毛囊侵入。吸血昆虫，包括蚊、蝇、虱、蜂等呈现一定的病毒传播作用。

4 诊断

4.1 临床诊断

鸡痘在临床上由于有特征性病变，一旦发病根据症状就很容易诊断和确诊。但是应区别白喉型鸡痘与传染性喉气管炎所引起的呼吸症状和吞咽困难，以及皮肤型鸡痘引起的眼睑肿胀，特别是有干酪样分泌物渗出而引起的眼睛失明。在幼雏，容易将痘病与泛酸或生物素缺乏症及T-2毒素引起的疾病相混淆。野鸽及家鸽的白喉型病变常与鸡毛滴虫引起的病灶相混淆，后者可通过涂片镜检或培养而诊断。禽痘病毒皮肤型感染必须经组织病理学或病毒分离进行确诊。

4.2 病毒的分离与鉴定