速率法定量检测脐带血葡萄糖-6-磷酸脱氢酶结果分析*

基金项目:贵州省黔西南州重点科研项目(2011-34)。



速率法定量检测脐带血葡萄糖-6-磷酸脱氢酶结果分析*

*基金项目:贵州省黔西南州重点科研项目(2011-34)。

卢春晟1，吴海婴2，冯宁2△，左方财2，任勇2，夏敏2，黄春燕3

(贵州省兴义市人民医院：1.输血科；2.医学检验科，贵州兴义 562400；3.黔西南州人民医院妇科，贵州兴义 562400)

摘要:目的通过脐带血葡萄糖-6-磷酸脱氢酶(G6PD)定量检测，分析G6PD缺乏的发病情况及对产妇静脉血G6PD进行追踪调查。方法应用广州科方生物技术有限公司生产的G6PD定量检测试剂盒对253例健康产妇脐带血进行检测。结果253例脐带血定量检测中，检出G6PD缺乏症34例，阳性率为13.44%，男性新生儿23例，占9.09%，女性新生儿11例，占4.35%，男女酶活性比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论定量检测结果分析直观、简便、快捷、价格低廉，利于普遍筛查及早期诊断G6PD缺乏症。

关键词:脐带血；葡萄糖-6-磷酸脱氢酶；速率法；定量检测

红细胞葡萄糖-6-磷酸脱氢酶(G6PD)缺乏也称蚕豆病，是华南、西南地区常见遗传病[1]，常因为某种诱因(药物、感染、食物如蚕豆等)情况发生溶血、黄疸、贫血及新生儿高胆红素血症，严重的可导致核黄疸，医疗技术的发展对疾病的诊疗预防起着重要的作用。本研究收集本院的脐带血进行G6PD定量测定，现将检测结果汇报如下。

1材料与方法

1.1标本来源2011年1月至2014年12月本院正常生产的产妇脐带血34例，产妇年龄20～38岁，无任何传染性疾病。

1.2标本的采集及保存新生儿出生后10 min内取脐血2 mL，置于肝素抗凝管中30 min内送检。

1.3仪器与试剂日立7180生化分析仪，试剂由广州科方生物技术有限公司提供。

1.4方法抗凝血以4 000 r/min离心5 min，避开血浆层,用加样器准确吸取压积红细胞20 μL，加入到1 mL溶解液中溶解，待红细胞完全溶解后(约1～2 min)上机测定，待测时间不得超过25 min，所有参数按试剂说明书设定操作。

1.5结果判定G6PD>1 300 U/L为正常，60～1 300 U/L为中度缺乏，小于60 U/L为重度缺乏。

1.6统计学处理采用SPSS 13.0进行率的统计分析。计数资料采用χ2检验，P<0.05表示差异有统计学意义。

2结果

在253例脐血G6PD定量检测中，检出G6PD缺乏症34例，阳性率为13.44%，男新生儿23例，占总例数9.09%，女新生儿11例，占例数4.35%。结果见表1。中度与重度缺乏男、女之间率的比较，二者差异具有统计学意义(P<0.05)。

表1　　253例产妇脐血G6PD定量检测结果

*：P<0.05，与女性组比较。

34例脐带血G6PD缺乏与产妇静脉血G6PD检测结果一致性检验发现，从34例脐带血G6PD缺乏标本中，与产妇静脉血G6PD缺乏符合数只有11例，符合率为32.35%，(95%CI为70.89%，94.83%)。

3讨论

G6PD缺乏产生的机制，主要是红细胞G6PD催化反应生成的还原型辅酶Ⅱ(NADPH)是谷胱甘肽还原酶的辅酶，还原型谷胱甘肽(GSH)是保持血红蛋白稳定性及红细胞膜完整性的必要条件。细胞G6PD缺乏者，在服用某些药物(如抗疟药、砜类药、伯氨喹啉、磺胺药等)及信用蚕豆后，代谢产生的自由基，或与氧合血红蛋白作用形成H2O2，使GSH氧化形成氧化型谷胱甘肽(GSSG)。由于GSH降低，血红蛋白的巯基失去GSH的保护，被氧化形成Heinz小体。红细胞失去巯基保护而功能受损，导致溶血。

本次对脐带血G6PD定量检测，阳性率为13.44%(34/253)，且男性多于女性，性别间差异有统计学意义(P<0.05)。G6PD缺乏症目前认为是疟疾自然选择的结果[2]，在中国，同一民族不同地区基因频率有明显差别，同一地区不同民族相差不大[3]，与此次研究结果一致，本地区各民族间脐血G6PD缺乏率无显著差异，这可能与人口流动性大的原因相关。G6PD基因位于X染色体长臂2区8带(Xq2.8)，基因全长20 114 bp，由13个外显子和12个内含子组成，编码区长1 548 bp，编码515个氨基酸。G6PD缺乏症呈X连锁不完全显性遗传，男性因只有一条X染色体，故男性半合子的临床表现基本为显著酶缺乏，一般G6PD定量法即可较准确区分。

使用脐带血G6PD缺乏与静脉血G6PD定量检测一致性检验中，二者一致性较差，这与染色体遗传有很大关系。新生儿男性G6PD缺乏比女性例数多，由于G6PD缺乏症是一种不完全显性伴性遗传病，基因位于X染色体上，男性只有一条X染色体，一旦这唯一的染色体缺失G6PD基因，则表现为G6PD显著缺乏。而女性有两条X染色体，如果仅有1条X染色体缺失G6PD基因，则为杂合子，女性杂合子可表现为酶活性正常与G6PD缺乏之间。只有两条X染色体均缺失G6PD基因，才表现为显著缺乏[4]。所以男孩的发病率明显高于女孩,女性未检出重度缺乏者。这对G6PD缺乏症的早期诊断提供更好的依据。

G6PD缺乏导致的新生儿黄疸可造成核黄疸死亡或智力低下，对提高中国人口素质影响巨大，由于G6PD缺乏症没有根治的方法，开展孕妇产前以及新生儿疾病的筛查，以及早期预防和治疗措施，具有重要的现实意义。脐带血可代替新生儿血做一些早期疾病筛查，其操作取血简单，家属也易于接受[4]。

速率法是在全自动生化分析仪上测定G6PD活性，与传统方法相比，具有反应量微、试剂用量少、样本量小、准确灵敏、低成本、易于实现自动化和标准化，在10 min左右出结果，适用大规模的筛查[6-7]。可以实现早期G6PD缺乏有效干预及控制。

参考文献

[1]林朝明．新生儿葡萄糖6磷酸脱氢酶缺陷早期诊断的研究[J]．海南医学，2005，16(7)：159-160．

[2]Ruwende C,Hill A.Gluscose-6-phosphate dehydrogenase deficiency and malaria[J].J Mol Med,1998,76(8):581-588.

[3]杜传书．我国葡萄糖-6-磷酸脱氢酶缺乏症研究40年的回顾和展望[J]．中华血液学杂志，2000，21(4)：5-6．

[4]黄昌海．佛山地区孕期夫妇6-磷酸葡萄糖脱氢酶检测[J]．检验医学与临床，2013，10(7)：886-887．

[5]黎海澜，焦伟，莫柱宁，等．脐带血替代外周血用于新生儿血型和直接抗球蛋白试验的效果观察[J]．重庆医学，2011，20(20)：2025-2026．

[6]梁栋伟，区丽群．生化仪直接测定G6PD活性的临床应用[J]．检验医学与临床，2007，4(8)：709-710．

[7]黄倩婷，吕伟标．全自动生化分析仪检测G6PD活性在孕检中的意义[J]．吉林医学，2011，32(26)：5433-5434．

·临床研究·

收稿日期：(2015-09-18)

文献标识码：

DOI:10.3969/j.issn.1673-4130.2015.24.043A

文章编号：1673-4130(2015)24-3612-02

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