厦门某三级综合医院近3年血培养病原菌构成及耐药性分析*

基金项目:福建省自然基金项目(2011D012;2015J01561)。



厦门某三级综合医院近3年血培养病原菌构成及耐药性分析*

*基金项目:福建省自然基金项目(2011D012;2015J01561)。

王涛1，马晓波1，李珣1，房丽丽1，郑港森1，黄辉萍2，洪国粦1△

(厦门大学附属第一医院：1.检验科；2.感染管理部，福建厦门 361003)

摘要:目的了解厦门某院近3年血培养主要分离菌分布及耐药情况，为临床准确使用抗菌药物,防控医院获得性血流感染提供科学依据。方法采用美国Bactek FK全自动血液培养仪进行培养，VITEK 2 Compact全自动细菌鉴定/药敏系统对血培养分离菌株进行鉴定及药敏试验，药敏结果采用美国临床和实验室标准化协会(CLSI)2011标准判断。结果近3年内血培养主要分离菌为大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌、肺炎克雷伯菌及凝固酶阴性葡萄球菌(CNS)等。医院获得性血流感染所占比率2012~2014年分别为42.2%、46.9%、54.1%。耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)检出率为18.8%，多重耐药鲍曼不动杆菌(MDRAB)检出率为42.9%，大肠埃希菌及肺炎克雷伯菌产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)检出率分别为71.8%和69.8%。结论该院血流感染病原体以肠杆菌科细菌为主，医院获得性血流感染比重逐年上升；MRSA、多重耐药鲍曼不动杆菌检出率较高，临床应重视血培养病原体的变化及其耐药趋势，同时需防控医源性血流感染。

关键词:血培养；耐药性医院获得性血流感染

血培养是临床诊断血流感染的重要检查项目。血流感染是临床常见的重症感染之一，其病死率高达27%~40%[1-2]。血流感染病原菌的菌群分布和耐药性监测，对于掌握病原菌耐药变迁，指导临床合理用药，有效控制血流感染具有积极意义[3]。

1材料与方法

1.1标本来源共收集2012年1月至2014年12月三级综合医院住院患者送检血培养阳性标本1 943份，其中2012年585份，2013年607份，2014年751份。

1.2仪器与试剂美国Bactek FK自动血液培养仪(美国BD公司)及配套血培养瓶，VITEK 2 Compact全自动细菌鉴定/药敏系统及其配套的细菌鉴定/药敏板(法国梅里埃生物有限公司)。哥伦比亚血琼脂平板、麦康凯平板、巧克力平板、水解酪蛋白(MH)琼脂平板、念珠菌显色平板(上海科玛嘉微生物公司)。质控菌株为金黄色葡萄球菌ATCC25923、大肠埃希菌ATCC25922、铜绿假单胞菌ATCC27853，均购自卫生与计划生育委员会临检中心。

1.3方法

1.3.1标本采集采集新生儿、儿童血液2~5 mL快速注入儿童瓶，采集成人血液5~10 mL快速注入成人的需氧瓶和厌氧瓶，混匀后立即送检。

1.3.2细菌培养及分离将血液培养瓶放入Bactek FK全自动血液培养仪培养，仪器报警提示培养阳性，及时接种哥伦比亚血琼脂平板和巧克力平板，必要时接种麦康凯和念珠菌显色平板，放置在35 ℃、5%CO2环境培养18~24 h，并同时进行革兰染色涂片。对于培养5 d报阴性的培养瓶，报告无菌生长。

1.3.3细菌鉴定及药敏试验从经过夜纯培养的新鲜平板上挑取菌落，在ID肉汤中制成标准浊度(0.5~0.6麦氏单位)的菌悬液，放入梅里埃VITEK 2Compact全自动细菌鉴定/药敏系统，结果判读按照2011年美国临床和实验室标准化协会(CLSI)制定的标准[4]，以敏感(S)、中介(I)、耐药(R)报告结果。所有操作严格按照《全国临床检验操作规程(第3版)》进行。

1.3.4诊断标准医院获得性血流感染诊断按照原卫生部颁发的医院感染诊断标准[5]。入院48 h以后血培养分离出病原微生物，并伴有下列症状或体征中的一项：(1)体温大于38 ℃或体温小于36 ℃,可伴有寒战；(2)有入侵门户或迁徙病灶；(3)有全身感染中毒症状而无明确感染灶；(4)收缩压小于90 mm Hg或较原收缩压下降小于40 mm Hg。常见皮肤定植菌需要至少2次血培养阳性证实。

1.4统计学处理采用SPSS19.0统计软件进行数据处理及统计学分析。计数资料以例数或百分率表示，组间比较采用χ2检验，P<0.05为差异有统计学意义。

2结果

2.1血培养分离病原菌分布情况2012年1月至2014年12月，全院送检的1 943份血培养阳性标本，其中2012、2013、2014年分别为585、607、751份。近3年合计检出最多的病原菌为大肠埃希菌，构成比为26.1%，其次是肺炎克雷伯菌(10.6%)、表皮葡萄球菌(8.4%)。主要分离病原菌及构成比见表1。

表1　　各年度主要分离病原菌及构成比

2.2各年度血培养病原菌感染类型分布2012~2014年医院获得性血流感染所占比重分别为42.2%、46.9%、54.1%，呈逐年上升趋势，见表2。

2.3各年度血培养主要病原菌耐药株检出情况2012至2014年耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)检出率分别为44.0%、12.2%、10.9%，呈逐年下降趋势，差异有统计学意义(χ2=13.49，P=0.001)；鲍曼不动杆菌多重耐药株检出率分别为16.7%、54.5%、69.2%，呈逐年上升趋势(χ2=10.04，P=0.007)；大肠埃希菌产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)的阳性检出率分别为51.1%、84.9%、74.0%，差异有统计学意义(χ2=42.64，P=0.000)；肺炎克雷伯菌ESBLs阳性检出率分别为29.5%、85.1%、88.3%，呈逐年上升趋势(χ2=66.86，P=0.000)。见表3。

表2　　各年度血培养病原菌感染类型分布

表3　　各年度血培养主要病原菌耐药株检出情况

3讨论

血流感染属严重感染性疾病，为患者死亡的主要原因之一，而由多重耐药菌所致的医院获得性败血症病死率更高。因此，早期有效的治疗显得非常重要，而细菌耐药性监测是指导临床合理用药的重要依据[6-7]。

本研究结果显示，近3年内医院获得性血流感染比率逐年上升，2012年为42.2%，2013年为46.9%，2014年为54.1%。可能与临床大量应用广谱抗菌药物、免疫抑制剂及器官移植、侵袭性治疗等因素密切相关[8]。近3年血培养阳性分离率最高的是大肠埃希菌(26.1%)，其次为肺炎克雷伯菌(10.6%)，这与国内文献报道一致[9]。表皮葡萄球菌分离率为8.4%，较金黄色葡萄球菌分离率5.8%为高。近年来，凝固酶阴性葡萄球菌(CNS)在血流感染中分离率越来越高[10-11]，显然一些条件致病菌已成为血流感染的主要病原菌。因此必须加强对各种器械、导管等的消毒和管理，同时加强医务人员手的消毒和清洁，以减少医院感染的机会。

连续三年的血培养结果显示，MRSA检出率呈下降趋势，合计检出率为18.8%。由于MRSA的不均一耐药性，给其检测带来了一定的困难[12]。本研究中是否由于新的变异株不断出现，使得检出率下降有待进一步研究探讨。多重耐药鲍曼不动杆菌(MDRAB)检出率合计为42.9%，呈上升趋势，与近年文献报道一致[13]。鲍曼不动杆菌对临床常用抗菌药物的耐药性较严重，这可能与其复杂的耐药机制有关[14]，对于鲍曼不动杆菌引起的血流感染应根据药敏试验结果谨慎选用抗菌药物。产ESBLs的大肠埃希菌与肺炎克雷伯菌3年内明显升高，由于产酶菌株的出现将增加临床治疗中的困难，因此，在临床治疗中，临床医生应对细菌耐药性引起高度重视，且必须根据药敏结果合理、有效地选用抗菌药物[15]。

耐药菌株出现和传播，使临床治疗面临极大挑战。临床医生应严格掌握抗菌药物用药指征，规范诊疗操作，以预防和控制血流感染感染。

参考文献

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·论著·

Analysis on composition of blood culture pathogenic bacteria and drug resistance

in a tertiary general hospital of Xiamen during recent three years

WangTao1,MaXiaobo1,LiXun1,FangLili1,ZhengGangsen1,HuangHuiping2,HongGuolin1△

(1.DepartmentofClinicalLaboratory;2.DepartmentofInfectionManagement,FirstAffiliated

Hospital,XiamenUniversity,Xiamen,Fujian361003,China)

Abstract:ObjectiveTo analyze the distribution and antimicrobial resistance situation of pathogens isolated from blood culture to provide the scientific basis for the accuratel use of antibacterial drugs and preventing and controlling nosocomial acquired bloodstream infection.MethodsThe US BACTEK -FK automatic blood culture instrument and the French VITEK 2 COMPACT automatic bacteria identification/susceptibility system were used to conduct the culture,identification of blood culture isolated bacterial strains and drug susceptibility test.The results of drug susceptibility test were judged by adopting the 2011 criteria of the Clinical Laboratory and Standards Institute(CLSI).ResultsThe main isolated bacteria from blood culture for the recent three years were E coli,staphylococcus aureus and klebsiella pneumonia bacteria,coagulase negative staphylococcus(CNS),etc.The proportions of hospital-acquired bloodstream infections during these period were 42.2%,46.9%and 54.1% respectively.The detection rate of methicillin-resistant staphylococcus aureus (MRSA) was 18.8%,which of multiple drug resistant acinetobacter baumannii (MDRAB) was 42.9%,which of producing extended spectrum beta lactamase (ESBLs) in E.coli and klebsiella pneumoniae were 71.8% and 69.8% respectively.ConclusionThe bloodstream infections pathogens in this hospital are mainly Enterobacteriaceae bacteria,the proportion of hospital-acquired bloodstream infections increases year by year;the detection rate of multi-drug resistant Acinetobacter baumanni (MDRAB) is higher,clinic should pay more attention to the change of blood culture pathogens and their drug resistance trend,meanwhile nosocomial bloodstream infection should be prevented and controlled.

Key words:blood culture;drug resistance;hospital-acquired bloodstream infections

收稿日期：(2015-08-11)

文献标识码：

DOI:10.3969/j.issn.1673-4130.2015.24.008A

文章编号：1673-4130(2015)24-3527-03

通讯作者△，E-mail：18860089899@139.com。

作者简介：王涛，女，副主任检验技师，主要从事临床检验工作。