榄香烯聚氰基丙烯酸正丁酯纳米粒子对SHG-44脑胶质瘤的抑制作用

李英夫　宣兆博　王　鹤　廉晓宇

(佳木斯大学附属第一医院，黑龙江　佳木斯　154002)



榄香烯聚氰基丙烯酸正丁酯纳米粒子对SHG-44脑胶质瘤的抑制作用

李英夫宣兆博王鹤廉晓宇

(佳木斯大学附属第一医院，黑龙江佳木斯154002)

目的探究榄香烯聚氰基丙烯酸正丁酯纳米粒子(Gd-PBCA-NP)对SHG-44脑胶质瘤的抑制作用。方法提取大鼠的脑胶质瘤细胞SHG-44，并对其进行体外培养实验，将这些脑胶质瘤细胞SHG-44按照随机的原则分为干预组与对照组，对照组为空白，干预组则严格按照Gd-PBCA-NP浓度进行分组，然后采用MTT比色法，对榄香烯不同浓度体外培养下的脑胶质瘤细胞SHG-44的抑制作用给予有效的检测，然后借助流式细胞仪测定干预组的脑胶质瘤细胞SHG-44中的细胞凋亡情况。结果榄香烯的浓度不同，其对SHG-44脑胶质瘤体的抑制作用也有着一定的区别。10.0 mol/L浓度的Gd-PBCA-NP对SHG-44脑胶质瘤的抑制作用明显优于2.50 mol/L浓度，且干预组的脑胶质瘤细胞SHG-44的存活率明显低于对照组(P<0.05)；Gd-PBCA-NP浓度越高，其对脑胶质瘤细胞SHG-44的抑制作用就越强。结论Gd-PBCA-NP对SHG-44脑胶质瘤有着明显的抑制作用，能够在一定程度上抑制脑胶质瘤SHG-44细胞的凋亡与增殖，而且能够增强细胞抗肿瘤活性，具有一定的安全性。

榄香烯；聚氰基丙烯酸正丁酯纳米粒子；SHG-44；脑胶质瘤

作为一种萜系类化合物，榄香烯聚氰基丙烯酸(PBCA)在临床医学中得到了广泛应用，其主要组成成分为β榄香烯及PBCA，能够有效抑制细胞毒性，在脑胶质瘤的治疗中有着明显的治疗效果〔1〕。本文探究榄香烯PBCA正丁纳米粒子(Gd-PBCA-NP)对SHG-44脑胶质瘤的抑制作用。

1　资料与方法

1.1材料与试剂试剂为大连华立金港药业有限公司提供的Gd-PBCA-NP与细胞培养基，然后提取大鼠血清及四甲基偶氮唑盐供比色，所用试剂由上海拜力生物科技有限公司提供，脑胶质瘤细胞SHG-44则由上海素尔生物科技有限公司提供〔2〕。

1.2方法首先取适量的脑胶质瘤细胞SHG-44，在细胞培养基中加入10%的大鼠血清，需要注意的是培养基要保持适宜的温度，一般以37℃为宜，并将其置于5%的CO2培养箱环境中，对脑胶质瘤细胞SHG-44进行培养及传代。经过榄香烯PBCA对脑胶质SHG-44细胞的充分作用，采用四甲基偶唑盐比色法对其细胞增殖的抑制作用进行测定〔3〕，在这个过程中，要将细胞培养液充分移除，然后加入0.25%胰酶，使贴壁细胞能够完全消化，然后在其中加入10 ml的细胞培养液，根据实际情况，合理调整细胞的浓度，对培养板进行有效铺整，将细胞培养液的浓度设置为不同的数值，将脑胶质瘤细胞置于100 L的细胞培养液中进行有效的培养，培养基的温度应保持在37℃左右，并在培养箱中加入5%的CO2。然后每个孔分别加入25 L的四甲基偶氮唑盐〔4〕，经过培养，将细胞培养液充分移出。对榄香烯PBCA吸光度及细胞增殖的抑制效率进行计算。采用四甲基偶氮唑盐比色法对细胞增殖的抵抗作用进行有效测定，在每个孔中分别加入脑胶质瘤SHG-44细胞，测定其吸光度。然后采用流式细胞仪对榄香烯PBCA对SHG-44的细胞凋亡与增殖的抵抗作用进行测定，整个测定过程中是在24孔平皿培养板中进行的，且采用的是不同浓度的榄香烯PBCA培养方法，对SHG-44的胶质瘤细胞凋亡与增殖情况进行检测〔5〕。

1.3统计学方法采用SPSS16.0统计学软件进行χ2检验，t检验。

2　结　果

对照组、0.15、0.25、0.35、0.50、2.50、5.00、10.00 mol/L榄香烯PBCA对SHG-44细胞的抑制率分别为92.0%、90.2%、89.9%、89.7%、90.0%、79.1%、66.6%、39.2%。榄香烯PBCA浓度对大鼠的脑胶质瘤细胞SHG-44的抑制作用也有着明显的变化，10.00 mol/L浓度的榄香烯PBCA对脑胶质瘤细胞SHG-44的抑制作用明显优于5.00 mol/L浓度。干预组脑胶质瘤细胞SHG-44的存活率与对照组相比明显偏低(P<0.05)。且榄香烯PBCA浓度越高，其对脑胶质瘤细胞SHG-44的抵抗与抑制作用就越强。

3　讨　论

神经胶质瘤多采用手术的方式医治，尽管能够在一定程度上使患者的病情得到控制，然而复发率比较高〔6，7〕。治疗肿瘤的新兴化疗药物的出现为临床医学中肿瘤的治疗提供了更多的可能性，当然也存在不能彻底穿透患者血脑屏障的局限性，必须对其进行有效的改进。Gd-PBCA-NP对肿瘤细胞具有一定的抑制作用，在肝癌、胃癌、脑癌等恶性肿瘤的治疗中得到广泛应用。其主要成分为胆固醇、磷酸氢二钠及聚氰基丙烯酸等，能够有效降低肿瘤细胞的分裂能力，抑制肿瘤细胞的增殖，促进肿瘤细胞凋亡。据有关调查研究表明，Gd-PBCA-NP能够对患者的细胞膜产生作用，促进肿瘤细胞分裂，进而改变肿瘤细胞的免疫原性〔8〕。Gd-PBCA-NP对正常细胞的影响不大，其毒副作用几乎可以忽略不计，这也是临床医学中选用榄香烯进行化疗的重要原因之一〔9〕。

综上，Gd-PBCA-NP对脑胶质瘤细胞SHG-44具有明显的抑制作用，而且能够在一定程度上增强抗瘤活性。

1袁子民,王静,王博,等.β-榄香烯聚氰基丙烯酸正丁酯纳米粒冻干粉针的制备及理化性质研究〔J〕.时珍国医国药,2013;24(3):650-1.

2崔玉琼,杨海城.中药活性成分抗脑胶质瘤作用机制研究进展〔J〕.中医药信息,2013;30(3):140-4.

3郭建忠,吉宏明,张刚利,等.β-榄香烯抑制胶质瘤兔角膜移植模型血管生成的实验研究〔J〕.中国现代医学杂志,2014;24(14):38-41.

4陈进才,佘军军,王光辉,等.β-榄香烯对体外培养人直肠癌细胞株Colo320的放射增敏作用〔J〕.西安交通大学学报(医学版),2013;34(3):346-8,356.

5申红丽,赵盼盼,张涛,等.榄香烯与含铂类化疗方案联合治疗晚期非小细胞肺癌的Meta分析〔J〕.现代肿瘤医学,2013;21(8):1783-8.

6王博,程岚,袁子民.β-榄香烯聚氰基丙烯酸正丁醋纳米粒包封率和载药量的测定〔J〕.中国医药导刊,2010；12(12):2186-7.

7丁华,赵洪瑜,王燕,等.榄香烯对人源性脑胶质细胞瘤SHG-44细胞系放射增敏实验研究〔J〕.中华放射肿瘤学杂志,2009；18(3):236-7.

8Chen-Long L,Liang C,Lin G,etal.β-elemene induces caspase-dependent apoptosis in human glioma cells in vitro through the upregulation of Bax and Fas/ FasL and downregulation of Bcl-2〔J〕.Asian Pac J Cancer Prev,2014;15(23):10407-12.

9Hui-Qin G,Guan-Nan Z,Yi-Jun W,etal.β-Elemene,a compound derived from Rhizoma zedoariae,reverses multidrug resistance mediated by the ABCB1 transporter〔J〕.Oncol Reports,2014；31(2):858-66.

〔2015-02-11修回〕

(编辑苑云杰)

廉晓宇(1964-)，男，主任医师，主要从事胶质瘤研究。

李英夫(1979-)，男，硕士，主治医师，主要从事胶质瘤研究。

R318

A

1005-9202(2016)16-3917-02；doi：10.3969/j.issn.1005-9202.2016.16.021