实时反转录聚合酶链反应对猪水泡诊断样本中赛尼卡谷病毒的检测



实时反转录聚合酶链反应对猪水泡诊断样本中赛尼卡谷病毒的检测

Senecavirus A(SV-A)原名赛尼卡谷病毒(SVV)，被认为与猪原发性疱疹病(SIVD)相关，SIVD是一种缺乏特定病原体的疱疹疾病综合症。SIVD的临床表现类似于更具传染性和经济破坏性的水泡性疾病，如口蹄疫(FMD)、猪水疱病(SVD)和水泡性口炎(VS)，通常需要立即做出诊断，以解除对动物的检疫、运动和贸易的限制。该研究提出了一个适用于诊断猪样本中SV-A的检测方法：SYBR Green RT-qPCR(实时反转录定量聚合酶链式反应)。用RT-qPCR对出现水泡疾病临床症状的50头猪只样品进行检测，引物序列设计根据Genbank中SV-A高度保守的VP1编码区：SV-A-qF(5'-GGGTAACACTGACACCGATTT)和SV-A-qR(5'-TCGAGATCGATCAAACAGGAAC)，扩增产物长度为87 bp，以β-Actin为内参，目的基因扩增条件为：48 ℃5 min；95 ℃ 10 min；接下来40个循环的95 ℃ 5 s，60 ℃ 1 min。结果显示：以35头未患水泡病的猪为对照组，在50头猪中，44头猪(88%)被检测到患有SV-A。

SV-A RT-qPCR是一种快速、特异、灵敏度高的定量分析方法，可检测来自于病变蹄中的拭子和组织、口腔和鼻黏膜上皮、口腔拭子、痂和内部器官如肝脏和淋巴结组织中的SV-A RNA。

(编译自：http：//journals.plos.org/plosone/ article？id=10.1371/journal.pone.0146211)