雷丸多糖S- 4002的抗炎免疫调节作用

朱秀媛，杜晓敏，Jan Christer Janson，薛立明，李宁元，白金叶，程桂芳

1中国医学科学院　北京协和医学院　药物研究所药理室，北京 1000502山东省医药工业研究所药理室，济南 2500143瑞典乌普萨拉大学化学室，Box 579，SE- 75123 Uppsala，Husargatan 3，Sweden



·论著摘要·

雷丸多糖S- 4002的抗炎免疫调节作用

朱秀媛1，杜晓敏2，Jan Christer Janson3，薛立明1，李宁元1，白金叶1，程桂芳1

1中国医学科学院北京协和医学院药物研究所药理室，北京 1000502山东省医药工业研究所药理室，济南 2500143瑞典乌普萨拉大学化学室，Box 579，SE- 75123 Uppsala，Husargatan 3，Sweden

关键词：雷丸；多糖；抗炎；免疫调节

雷丸(PolyporusmylittaeCook.etMass，异名Omphalialapidescensschraet)为多孔菌科植物雷丸菌的干燥菌核，中医主要用于治疗绦虫、钩虫等多种寄生虫症。用凝胶(Sephacry 1 S- 400)过滤法从雷丸中分离出两种多糖S- 4001和S- 4002，二者的相对分子质量均在1×106以上。本研究主要探讨S- 4002的抗炎、免疫调节作用。

材料和方法实验动物为雄性615纯种小鼠、昆明小鼠及Wistar大鼠，均由中国医学科学院动物中心供给。采用巴豆油引起小鼠单侧耳部炎症模型，分别给予递增剂量S- 4002(3、 9、21、81 mg/kg)，以等量生理盐水为对照。4 h后取小鼠左、右耳片称重，两耳片重量之差作为炎症肿胀程度的指标。在大鼠琼脂性关节肿模型上，给予S- 4002 (20 mg/kg)，等体积生理盐水作为对照。30 min后自踝关节皮内注射1%琼脂悬液0.1 ml。分别于注射后1、3、5 h后测量踝关节周长，作为肿胀程度的指标。在大鼠酵母性关节肿模型上，同样以踝关节周长作为关节肿指标。在大鼠佐剂型多发性关节炎模型上，实验组每日给予S- 4002 20 mg/kg，连续15 d，继续给予S- 4002隔日1次至21 d。对照组同时给予等体积生理盐水。于第1次给药后30 min，向大鼠右后足跖皮内注射Freund’s完全佐剂0.1 ml(含H37RV结核杆菌7.5 mg/ml)。注射后不同时间分别测量右踝关节肿胀程度。从第13 天起开始记录全身关节病变。在大鼠腹腔白细胞游走模型上，腹腔注射1%羧甲基纤维素钠2 ml/只大鼠引起白细胞渗出。3 h后取稀释后的腹腔液在显微镜下计数白细胞数。上述5种炎症模型考察S- 4002抗炎作用。

采用小鼠血清刚果红染料廓清模型，注射S- 4002 (40 mg/kg)每天1次，连续4 d，于末次给药后30 min，静脉注射0.5%刚果红生理盐水溶液10 ml/kg，5 min后断头取血，测定血清中刚果红含量。在615纯种小鼠免疫溶血反应模型上，实验组注射S- 4002 (20 mg/kg)每天1次，连续7 d，对照组给等体积生理盐水。于给药后的第3天，10%绵羊红细胞悬液0.2 ml/只进行免疫，在末次给药后1 h断头取血，测定血清半数溶血度值，研究S- 4002免疫调节作用。

大鼠注射S- 4002 (20 mg/kg)或等体积生理盐水，2.5 h后断头取血，并摘取右侧肾上腺，测定其丙种维生素含量，同时测定血浆皮质酮含量，以考察S- 4002其他的药理作用。

S- 4002给药途径均为皮下注射。

结果抗炎作用：在小鼠巴豆油耳部炎症模型上，S- 4002有剂量相关的抗炎效应(r=0.9982，P<0.001)，半数抑制剂量为39.5 mg/kg。琼脂性关节肿模型大鼠关节肿胀度对照组分别为0.39、0.74、0.76 cm，给药组分别为0.25、0.56、0.50 cm，各时间点两组差异有统计学意义(P<0.001)。酵母性关节肿模型大鼠注射致炎剂后1、3、5 h，生理盐水对照组关节肿胀度分别为0.83、0.85、0.75 cm，S- 4002(20 mg/kg)组分别为0.71、0.70、0.60 cm，与生理盐水对照组比较差异有统计学意义(P<0.001)。S- 4002对佐剂型多发性关节炎模型大鼠初级踝关节肿胀及次级多发性关节的病理症状均有显著的对抗作用(P<0.001)。 S- 4002 (80 mg/kg)对白细胞向腹腔由炎症诱导剂引起的游走有显著的抑制作用，抑制率达59.1% (P<0.001)。

免疫调节作用：在小鼠血清刚果红染料廓清模型上S- 4002组小鼠血中刚果红的廓清速度较对照组提高12.7%(P<0.01)，即S- 4002增强了小鼠网状内皮系统的吞噬功能。与对照组相比，S- 4002使免疫溶血反应模型小鼠血清半数溶血度值提高26.5% (P<0.05)。

其他药理作用：S- 4002可降低大鼠肾上腺丙种维生素含量，与对照组相比降低48.7%(P<0.01)。用同法测定小鼠肾上腺丙种维生素含量，较对照组降低65.9%(P<0.01)。S- 4002使大鼠血浆皮质酮含量提高136.3%，小鼠提高94.5%(P均<0.01)。

结论S- 4002具有显著的抗炎作用。与S- 4001相比较，在小鼠巴豆油耳炎模型上，S- 4002的抗炎强度约为S- 4001的1/10。S- 4002能提高机体的非特异性吞噬功能及特异性体液免疫功能。上述抗炎免疫效应可能与其激活肾上腺皮质功能有关。

(收稿日期：2015- 06- 24)

DOI：10.3881/j.issn.1000- 503X.2016.02.022

中图分类号:R967

文献标志码:A

文章编号：1000- 503X(2016)02- 0245- 02

通信作者：朱秀媛电话：010- 82801098，电子邮件：hanjisheng@bjmu.edu.cn