王怀莲 王 颖(辽宁省大连市第四人民医院检验科,辽宁 大连 116031)
血小板假性减少的原因分析
王怀莲 王 颖
(辽宁省大连市第四人民医院检验科,辽宁 大连 116031)
【摘要】目的 探讨乙二胺四乙酸二钾(EDTA-K2)抗凝剂致血小板计数假性减少原因分析及避免措施。方法 采用SYSMEX XT-1800i全自动血细胞分析仪及以EDTA-K2和枸橼酸钠为抗凝剂的真空采血管,检测抗凝血,对血小板计数异常偏低的标本涂片观察血小板分布情况,对其中与计数明显不符的,再次用枸橼酸钠为抗凝剂的真空采血管采血、计数。结果 用EDTA-K2抗凝血小板计数很低,用枸橼酸钠抗凝血小板计数正常。血涂片镜检显示血小板成堆聚集。结论 少数对 EDTA-K2敏感的患者会发生由于血小板聚集而引起血小板假性减少应引起我们的高度重视,并做好复检工作。
【关键词】EDTA-K2;抗凝剂;血小板假性减少
血小板在体内主要参与止血与血栓形成,在止血、血栓的病理生理过程中起着重要作用,血小板的数量异常或功能缺陷是出血性疾病或血栓性疾病重要原因,因此,血小板的数量的检测是临床常用的检验项目之一。目前各级医疗单位广泛使用全自动血液分析仪和以乙二胺四乙酸二钾(EDTA-K2)抗凝剂的负压采血管,但是EDTA-K2作为抗凝剂所致的假性血小板减少逐渐增多[1],一旦发生此现象,如果没有及时发现,将会给临床带来严重的医疗隐患。因此,这种假性血小板减少应该受到广泛重视。
1.1 病例来源:收集2013年4月至2014年4月我院门诊和住院患者28300例,发现血小板假性减少25例。
1.2 仪器与材料:我院检测的患者样本是用日本希森美康公司的SYSMEX XT-1800i全自动血液分析仪,试剂为SYSMEX进口试剂和质控品,奥林帕斯光学显微镜,贝索瑞氏染液。BD公司以EDTA-K2枸橼酸钠为抗凝剂的真空采血管。
1.3 检测与分析:采用SYSMEX XT-1800i全自动血细胞分析仪,患者顺利采出2 mL,1 h内完成检测,检查时完全按照操作规程,参照国际血液学复检规则血小板直方图图形比较,对血小板计数异常偏低的标本涂片染色,用贝索瑞氏血细胞染色液染色,用奥林帕斯光学显微镜油镜状态下对血涂片进行镜检,发现血小板聚集成堆的就可确定为假性血小板减少,然后让患者分别用两种抗凝剂的采血管采血立即送检。用SYSMEX XT-1800i全自动血液分析仪计数血小板数量。
1.4 血小板评估方法。血小板数量的评估方法参照国际血液学复检专家推荐的方法:既油镜下,在血涂片分布良好的区域,一个血小板大约相当10×109/L的血小板数量。根据此方法我们用显微镜观察血涂片,把10个以上血小板的聚集就会使分析仪计数减少50%,因此界定为血小板聚集,4个以下的血小板可忽略不计。
本实验观察28300例患者,发现血小板聚集导致血小板假性减少的病例66例,并对其中的57例追踪分析,可以确定以EDTA-K2为抗凝剂引起血小板假性减少的25例,可以看出EDTA-K2抗凝剂引起的血小板假性减少的发生率为0.12%。这25例患者用EDTA-K2抗凝剂的采血管采血,血小板计数明显减少;用枸橼酸钠抗凝剂真空采血管采血,计数血小板数量为正常。用两种抗凝剂所采的血标本进行涂片,瑞氏染色,油镜下观察EDTA-K2为抗凝剂的血涂片血小板大量聚集,每堆10个以上,以枸橼酸钠抗凝剂的血涂片血小板均匀分布在血涂片中。另外随着时间的延长,血小板聚集的情况会越来越严重,团块会越来越大,而以枸橼酸钠抗凝剂的标本随着时间的延长聚集很弱,对血液分析仪计数影响甚微。还有2例是因采血不当导致血小板被活化,聚集的假性血小板减少;另外2例是产生了冷凝集,将标本置于37 ℃水浴30 min,马上用仪器检测血小板数量,结果为正常;制作血涂片观察聚集情况,血涂片血小板均匀分布,无聚集。
EDTA-K2作为全血细胞分析的抗凝剂,已经被ICSH认定,并在临床广泛应用[2]。但是经常导致血小板发生聚集,这与血小板表面存在着隐匿性抗原相关,这样使得在血细胞计数仪测定中黏附在一起的血小板被视为非血小板而不被计数,导致血小板假性减少,而且大量成堆的血小板聚在一起,超过了血小板计数阈值设定的范围,因此不被认作血小板。我们可以采取改用其他抗凝剂的方法来消除EDTA-K2对血小板的作用,枸橼酸盐被认为是解决EDTA依赖型假性血小板减少的主要方法之一。此外,对于EDTA依赖性血小板聚集导致的血小板减少可以手工计数血小板加以矫正,同时可通过血小板直方图来协助。
EDTA依赖性血小板减少症(PTCP)是一种发生于体外的EDTA诱导的血小板非稳固性聚集,临床表现为无出血现象的重型假性血小板减少症[3]。PTCP可能与血浆中存在的抗血小板抗体或抗心磷脂抗体等自身抗体有关,但无任何病理、生理意义,也与特殊药物使用有关,多发生在肿瘤患者、自身免疫病、肺心病、晚期孕妇、肝病、毒血症及一些不明原因疾病。
EDTA依赖性血小板减少症(PTCP)如果实验室不及时纠正检验结果,无故增加患者不必要的辅助检查,将会导致临床误诊、误治。这就要求检验人员,一定要有高度的责任心和严谨的工作作风。对临床上无任何出血症状与体征、凝血机制正常而血小板计数明显减少者,建议改用枸橼酸钠抗凝或手工计数血小板,并结合血涂片检查,不能完全依赖全自动血细胞分析仪的检测结果。
参考文献
[1] 王明慧.EDTA依赖性假性血小板减少症的临床分析[J].中国医药指南,2014,5(13):317-318.
[2] 李丽红,金玲,李威, 等.我院56例EDTA依赖性假性血小板减少病例分析及临床处理[J].中国实验诊断学,2013,17(12):2232-2234.
[3] 胡先泳,陈峻.EDTA依赖性假性血小板减少症血小板检测[J].血栓与止血,2013,19(5):227-230.
中图分类号:R558
文献标识码:B
文章编号:1671-8194(2016)12-0054-01