AAP延衰胶囊的药效学研究

李　颖　舒　若

作者单位：昆明医科大学第一附属医院　1.干疗外科　2.胃肠与甲状腺外科　650031

AAP延衰胶囊的药效学研究

李颖1舒若2

作者单位：昆明医科大学第一附属医院1.干疗外科2.胃肠与甲状腺外科650031

【摘要】目的观察AAP对家蚕生长发育和生命周期的影响。方法将同种同龄且生长发育相似的三眠蚕200只随机均分为4组。两个组分别喂饲1%和2%的AAP溶液;另两个组，一个喂饲1%的参茸丸溶液作药物对照，另外一组喂饲同容积的蒸馏水作空白对照。药和水均涂在桑叶上。给药前及给药后每隔4天分别称体重和量身长1次。记录幼蚕龄期(孵出至结茧)、蛹期(结茧后第三天至蛹羽化)以及蚕蛾寿期(蛹羽化至死亡时间)。最后计算各组的全生育期。结果AAP对家蚕的体重和身长无明显影响，但能显著延长家蚕各龄期的时间(P<0.01)，其中以延长蚕蛾寿期最显著。此外，研究还发现AAP同时具有显著提高红细胞超氧化物歧化酶的活性和降低血浆脂质的过氧化作用以及显著提高实验动物的非特异性(巨噬细胞的吞噬)和特异性(体液和细胞免疫)的免疫功能。参茸丸也具有上述相似的药效。结论AAP能明显延长家蚕各阶段的生命周期、提高实验动物体内的抗氧化能力以及增强机体的免疫力。

【关键词】AAP延缓衰老抗氧化免疫

doi:10.3969/j.issn.1672-4860.2015.06.016

【Abstract】ObjectivesTo observe the effect of AAP on the growth and life cycle of the silkworm, Bombyx mori. MethodsThe same age and the growth and development of the similar three sleep silkworm 200 randomly divided into four groups. Two groups were fed 1%and 2%of AAP solution; the other two groups, one fed 1%of ginseng pill solution for drug control, another group fed with the same volume of distilled water as blank control. Water and medicine are painted on mulberry leaves. Before and after administration were weighed every four days and the amount of a length of time. Records of juvenile instar stage (hatched to cocoon), pupa (cocoon after the three days to pupae and moth life (eclosion time to death). At last, the whole growth period of each group was calculated. ResultsAAP on silkworm’s weight and height without obvious effect, but can significantly prolong the time of Bombyx mori in each age (P<0.01), which to extend the life-span of the moth is the most significant. In addition, the study also found that the AAP also has significantly increased erythrocyte superoxide dismutase (SOD) activity and reduce plasma lipid oxidation and significantly improve the experimental animal nonspecific (macrophage phagocytosis) and specificity (humoral and cellular immune response of immune function. Ginseng pill also has the similar efficacy. ConclusionAAP can significantly prolong the life cycle of silkworm, improve the antioxidant capacity of the experimental animals and enhance the immunity of the body.

收稿日期：2015-11-3

Pharmacodynamics study of AAP extended decay capsule(LIYing1,SHURuo2.Thefirsthospitalofkunmingmedicaluniversity,Kunming650031,China.)

【Key words】AAP, anti-aging, antioxidant, immune

AAP是云南省马刚强教授从彝家蔬菜花果中获得的提取物，主要成分是多糖和生物碱。经初步研究发现﹐其具有极强的抗氧化作用﹐效价是SOD的6~10倍。此外，AAP对肿瘤细胞也有一定的抑制作用，抑瘤强度与维甲酸相近。对实验动物无论口服还是注射途径给予﹐还显示其防治肝损伤、抗心肌缺血、升高T细胞和血清补体C3水平，显示出它的抗衰老、抗肿瘤、和提高机体免疫力的作用。本文主要对其延缓衰老作用进行研究，现将研究结果报告如下。

1.实验与结果

1.1APP对家蚕生长发育的影响

1.1.1实验材料：APP由云南科泰生化制品公司提供。参茸丸(云南省腾冲制药厂生产，批号：951108)。用时将APP配制成1%和2%的溶液，参茸丸配制成1%的溶液。二龄期蚕为浙蕾春晓品种(由楚雄农校蚕桑专业提供)。

1.1.2实验方法：仿文献方法[1,2]，稍加改进，将龄期相同生长发育相似(体重、身长一致)的三眠蚕200只均分为4组，每组50只，分别喂养在经严格消毒，直径为60cm的圆竹筛内。家蚕设两个给药组，分别给予APP的1%和2%溶液0.1ml/条，空白对照组给同体积的蒸馏水，阳性对照组给予1%参茸丸溶液0.1ml/条。给药时分别将上述液涂于桑叶上，并使其凉干。实验蚕每天喂桑叶3次：上午8时和下午2时30分喂无药桑叶，下午8时喂带药桑叶。第三、四、五每个龄期给药3次，共9次，每次每条幼蚕喂桑叶0.5~0.8g，并按常规管理。给药前及给后每隔4天称体重和测身长1次。记录幼虫龄期(孵出至结茧)，蛹期(结茧后第三天致蛹羽化的时间)以及蚕蛾寿期(蛹羽化至死亡时间)。最后计算出各组的全生育期[1]。

1.1.3实验结果：见表1，表2。结果显示：APP能显著延长家蚕各龄期时间，其中以延长蚕蛾寿期最明显。

表1　APP对家蚕幼虫生长发育的影响±s)

注：以上实验结果经统计学分析，各给药组与对照组比较均无显著差异(P<0.05)。

表2　SMS-JLYSJN对家蚕各期(寿命)影响

注：经统计学分析，给药组与对照组比较，*P<0.05，**P<0.01。

1.2APP对小鼠红细胞超氧化物歧化酶(SOD)的活性和血浆脂质过氧化作用的影响。

1.2.1实验材料：实验用昆明种老龄(15月龄)小鼠(由云南省天然药物重点药理实验室毒理室提供，动物质量合格证书号：川实动管1996-70号)。体重35~40g，雌雄各半，均分4组，每组20只。APP由云南科泰生化制品公司提供，用时配制成50%和20%的混悬液。参茸丸(来源同上)用时配成20%的混悬液。

1.2.2实验方法：实验时APP高低剂量组小鼠分别灌胃50% 0.2ml/10g和20% 0.1ml/10g药液(相当于10g/kg，2g/kg的生药粉)，空白照组合蒸馏水0.1ml/10g，阳性对照组给20%参茸丸溶液0.1ml/10g。每天给药1次，连续15天。结束时，由股动脉采血，肝素抗凝，仿文献方法[3，4]分别测定各组小鼠红细胞超氧化物歧化酶(SOD)的活性和血浆脂质时氧化物的量。

1.2.3实验结果：见表3实验结果表明APP能显著提高小鼠红细胞SOD的活性，同时降低血浆脂质的过氧化作用。

表3　APP对小鼠红细胞SOD活性和血浆脂质过氧化

注：经统计学处理与对照组比较，**P<0.01。

1.3APP对小鼠免疫功能的影响

1.3.1APP对小鼠碳粒廓清功能的影响：小鼠条件、分组及给药方法同前。于末次给药后24小时，按文献方法[5]从尾静脉注射中华墨汁(市售、用时稀释1倍)0.1ml/10g，分别于注后2分种和15分钟眼框取血10μl，再分别注入盛有2ml 1%醋酸溶液的试管内，充分摇匀。在680nm波长处比色，记录光密度，计算碳粒廓清指数K：

(O.D1、D2分别长第一、第二次血样的光密度。T1、T2分别为第一、第二次采血时间)

实验重复1次，两次数据合并作统计学处理，结果见表4。结果表明，APP两个剂量组均显著提高小老鼠碳粒廓清功能。

表4　APP对小鼠碳粒廓清功能的影响±s)

注：与对照组比较，**P<0.01。

1.3.2APP对小鼠体液免疫功能的影响：小鼠条件、分组及给药途径和方法同上述试验。实验时仿改良的血清溶血素测定法[6],用5%鸡红细胞免疫各组小鼠。免疫后分别灌胃给药(空白对照组给蒸馏水，药量同上实验)。免疫7天后，股动脉采血并离心，取血清用生理盐水液稀释100倍，再取上述稀释血清1ml与5%鸡红细胞悬液0.5ml混合，按文献实验程序测出各组小鼠血清溶血素的O.D值，并以此读数作为血清溶血素含量的指标，结查见表5。结果表明APP能提高免疫小鼠血清溶血素的值，对小鼠体液免疫功能有明显促进作用，与空白对照组比较有显著性差异(P<0.01)。

表5　APP对小鼠体液免疫功能的影响

1.3.3APP对小鼠细胞免疫功能的影响：小鼠条件及分组同上述试验。于实验前仔细剪去颈背部皮肤毛，滴涂50%2，4-二硝基氯化苯(DNCB)丙酮液20μl/只，使小鼠致敏[7]。于致敏当天开始灌胃给药(途径和剂量同上实验)，每天1次，共12天。12天后，在小鼠原涂药处重滴涂上0.025g/ml的DNCB丙酮液20μl/只。24小时后各尾静脉注身1%伊文恩蓝0.1ml/10g。30分钟后处死小鼠，取下颈背部蓝染皮肤(部位及面积一致)。剪碎后置试管内，再用1:1丙酮生理盐水混合液浸泡24小时，过滤浸泡液，滤液进行比色，测出光密度值，作统计学处理，结果见下表6。实验结果显示，APP能增强小鼠DNCB所致迟发型过敏反应，表明它对小鼠细胞免疫功能有显著的促进作用。

表6　APP对小鼠DNCB迟发型过敏反应的影响

2.小结和讨论

AAP是马刚强教授从彝家蔬果中提取的活性成分(为浅褐色的不规则结晶体)，其主要成分是多糖和生物碱，经上海药物研究所李晓玉教授课题组研究发现﹐它其具有极强的抗氧化活性﹐效价是SOD的6~10倍。AAP对肿瘤细胞也有一定的抑制作用，抑瘤强度与维甲酸相近。无论口服还是注射途径﹐均有明显的防治肝损伤、抗心肌缺血、升高T细胞和血清补体C3水平，显示了它的抗衰老、抗肿瘤、和提高免疫的作用[8]。昆明医科大学舒晔教授课题组对AAP的抗衰老作用做了较系统地研究，除发现AAP能明显延长家蚕寿命、抗氧化和提高机体免疫功能外，还对中枢神经系统也有影响：它能降低B型单胺氧化酶的活性、减少脑内单胺类递质的损耗以及提高实验动物的学习和记忆能力。人体预实验显示，AAP对SOD活性有显著的调节作用：对SOD活性偏低而MDA偏高的人，它能提高SOD的活性，降低MDA的值。因AAP是从天然食品中提取的活性物质，性质稳定，各种给予途径均易于吸收，并显示较强的生物活性[9]。动物实验中，既使给予超大剂量也未发现有何毒副作用。AAP的许多药理作用又与破壁灵芝孢子粉相似[10]。故本研究从药效学层面为进一步开发利用这个具有医用价值的新资源食品提供了切实的理论依据。

参考文献

1陈奇主编. 中药药理研究方法学[M].第一版.人民卫生出版社,1993:918-926.

2陈传盈,胡斌,范世晶，等. 抗衰老药物家蚕寿命测定方法研究[J].中成药，1994，25：32-34.

3邹国林,桂兴芬,钟晓凌，等. 一种SOD的测定方法一邻苯三酚自氧化法的改进[J].生物化学与生物物理进展，1986，4：71-73.

4齐凤菊,周玫,陈瑗，等. 血浆丙二醛含量的测定方法——改良的八本国夫法[J].第一军医大学学报，1986，2：152-154.

5吴铁,廓澄泓,吴明寿.用中华墨汁作碳料廓清实验方法的探讨[J].湛江医学院学报， 1984,2(1)：31-37.

6吴铁,崔廖. 用鸡红细胞作免疫原的溶血素测定法[J]. 湛江医学院学报， 1984,2(1)：35-37.

7陈奇主编.中药药理实验方法[M].第一版.北京: 人民卫生出版社,1994:170.

8李晓玉. AAP的药效学研究[J].中国科学院上海药物研究所内部资料(1)和内部资料(2)，1993：10；1995：2.

9李颖，舒若，舒晔，等. AAP 的药理毒理学研究. 内部资料， 2005，1-26.

10彭亮，赵鹏，李彬，等. 破壁灵芝孢子粉对小鼠免疫调节作用的实验研究[J].应用预防医学,2011，17(4)：241-243.