藏药波棱瓜子的现代研究进展

刘美琳，张梅



藏药波棱瓜子的现代研究进展

刘美琳，张梅

［摘要］波棱瓜子是治疗肝病的传统藏药材。本文综述了波棱瓜子近年来的研究进展，包括化学成分、药理作用、工艺研究等方面。旨在为探索波棱瓜子中新的化学成分和深入研究其药理作用，促进藏药资源的合理利用等方面提供一定的参考。

［关键词］波棱瓜子；化学成分；药理作用；工艺研究

［作者单位］成都中医药大学药学院 中药材标准化教育部重点实验室中药资源系统研究与开发利用省部共建国家重点实验室培育基地，四川 成都 611137

Tel:18782984265 Email:674894419@qq.com

波棱瓜子为葫芦科波棱瓜属植物波棱瓜Herpetospermum caudigerum Wall.（H. pedunculosum （Ser.） Baill）的干燥成熟种子，是一种常用藏药。其药用历史悠久，始载于公元前1700多年，藏医药名著《月王药诊》、《晶珠本草》、《四部医典》等对该药均有记载。而《中华人民共和国卫生部药品标准》（藏药）卷及现代医药著作《全国中草药汇编》、《中华本草》等记载该药功效为“清腑热，胆热，治赤巴入脏腑，肝、胆热症（肝炎，胆囊炎），消化不良”［1～3］。

1　化学成分

波棱瓜子中主要含脂肪酸类、木脂素类成分及一些苯呋喃类、香豆素、甾醇、氨基酸、油脂及微量元素等多种物质。

1.1 脂肪油类

波棱瓜子中富含大量脂肪油，其含量约为22.3%［4］。张梅、刘兴利等［5，6］采用GC-MS法对其脂肪油成分进行分析得知其主要含各类不饱和脂肪酸，包括亚麻酸、亚油酸十六院酸、9-十八碳烯酸、硬脂酸、3-十二烯-1-炔、顺-3-丁基-4-乙烯基-环戊烯、二十四碳烧六稀，主要成分是不饱和脂肪酸十八烯酸，含量高达68.91%，而亚麻酸为12.108%，亚油酸为22.190%。王洪伦等［7］采用超临界CO2萃取波棱瓜子的种子油，发现含有棕榈酸、亚油酸、油酸等大量不饱和脂肪酸。薄海波等［4］采用GC-MS联用技术从波棱瓜子脂肪油中分离并鉴定出17种组分，主要包括直链饱和脂肪酸和单不饱和脂肪酸、环氧乙烷基脂肪酸等。研究结果指出波棱瓜子油含不饱和脂肪酸近60%，并首次发现青海波棱瓜子油脂中存在不常见的环氧乙烷基脂肪酸（2.70%）。

由此可见，波棱瓜子脂肪油中主要含有各类不饱和脂肪酸，其中大多是十二碳以上的长链脂肪酸。据报道，不饱和脂肪酸具有抗衰老、防癌抗癌、防止动脉硬化、降低血栓形成及血小板的凝聚等多种生理功能，因此波棱瓜子脂肪油具有一定的开发利用前景。

1.2 木脂素类

国外KaouadjiMourad等人在1978-1987年陆续从波棱瓜子中分离出木脂素类二聚物（Herpetol）、三聚物（Herpetrione）、五聚物（Herpepentol）、四聚物（Herpetetradione，Herpetrone）［8～14］以及呋喃类成分herpeta1、herpetotriol。国内袁海龙等从波棱瓜子乙醇提取液分离得到波棱素，从总木脂素中分离得到波棱甲素［15～16］。张梅等［17～21］从波棱瓜子中分离出波棱芴酮（herpetfluorenone）、波棱酮（Herpetone）、波棱酚（herpetenol）。杨帆等［22］从中分离得到二氢苯并呋喃类木脂素herpepropenal。徐冰、周雪杉等［23～24］从中确定了木脂素类化合物Herpetosin B、 BL-6和BL-13以及（-）-tanegool-7'-methyl ether。

1.3 香豆素类

从波棱瓜子乙酸乙酯提取物分离得到香豆素类化合物包括波棱内酯herpetolide A、波棱内酯herpetolide B、Herpetospin C；香豆素苷类化合物Herpetospin D［19～20，23］、herpetosperin A、herpetosperin B［25］等。

1.4 氨基酸及微量元素

李玉林等［26］研究发现波棱瓜子中富含全部的十八种氨基酸，其中人体必需的八种氨基酸占总量的三分之一。杨黎彬等［27］采用原子吸收光谱法分析得知波棱瓜子中含人体必需微量元素Fe、Mn、 Cu、Zn、 Se、 Co、 Cr、Ni等，特别是Cu、 Se、 Fe、Zn含量较高。而肝脏疾病与Cu、 Se、 Fe、 Zn等元素有密切关系，研究结果提示波棱瓜子治疗肝脏疾病的显著疗效可能与这些微量元素有关系。

1.5 其他

从波棱瓜子乙酸乙酯提取物中还分得豆甾醇、尿嘧啶、甾醇葡萄糖苷［19～20］以及二萜类化合物HerpetosinA 、2，4-二经基-嘧啶、Arbutin， 1-acetate、Dodecanoic acid、10-Eicosenoic acid［23，28］、β-谷甾醇以及一个波棱内酯G［21］。

2　药理研究

近年来，关于波棱瓜子的药理作用研究较多，主要包括抗肝损伤、抗氧化、抗疲劳、耐缺氧、抗免疫等作用。

2.1 抗肝损伤

波棱素对CCl4所致小鼠GPT、GOT的升高有较强的抑制作用［16］；波棱酮对二甲基亚矾（DMSO）引起的肝细胞损伤有保护作用［29］；波棱甲素制成的纳米混悬液（HNS）对D-半乳糖胺（D-GalN）诱导的小鼠急性肝损伤具有明显的保护作用［30］；波棱内酯G和波棱芴酮对肝损伤的体外抑制作用效果显著［21］。由波棱瓜子木脂素类成分制备的制剂肝能滴丸对CCl4所致小鼠试验性肝损伤有明显的保护作用［31］；对环磷酰胺所致小鼠循环免疫复合物水平升高具有一定的改善作用［32］；对慢性乙型肝炎患者有较好的近期疗效［33］。

波棱瓜子氯仿提取液和水提取液可明显抑制CCl4和TAA引起的急性肝损伤小鼠血清中ALT、AST活性的升高及TG水平的升高，增加肝糖原含量［29］；氯仿提取物还能显著促进小鼠单核-巨噬细胞吞噬功能，并显著提高小鼠胸腺与脾脏重量［34］；氯仿提取物亦具有较强的抗氧化和自由基清除活性［40］；波棱瓜子乙酸乙酯提取物对CCl4和TAA所致小鼠急性肝损伤具有明显的保护作用［35～37］；波棱瓜子乙酸乙酯提取物及脂肪油对BCG+LPS 诱导的小鼠免疫性肝损伤都具有明显的保护作用，其保肝的机制可能与增强抗氧化活性有关［38］。波棱瓜子总木脂素提取物对 ConA致小鼠免疫性肝损伤有一定的保护作用［39］。

2.2 抗氧化、抗疲劳、耐缺氧作用

体外CCl4损伤肝脏引起大鼠脂质过氧化反应以及体内DPPH自由基清除法保护作用实验表明，波棱瓜子氯仿及水提取物均具有较强的抗氧化活性和自由基清除活性［40］。小鼠疲劳游泳时间及耐缺氧存活时间实验表明，波棱瓜子乙醇提取物能显著提高小鼠抗疲劳耐缺氧能力［41］。体外的抗氧化实验（采用DPPH法）研究发现，波棱芴酮具有比较好的抗氧化活性［21］。

2.3 抗HBV作用

波棱酮和波棱素呈现剂量和时间依赖性显著地抑制乙型肝炎病毒 DNA 复制以及核心抗原和表面抗原的表达［42］；波棱素能明显抑制HBsAg和HBeAg的复制和表达［16］；肝能滴丸能明显抑制鸭乙肝病毒的复制，能有效治疗鸭乙肝病毒感染［43］。

2.4 抗肿瘤作用

分别以人肝癌细胞株BEL-7402、 BEL-7404及人结肠癌细胞株HCT为研究对象，用MTT法检测得知波棱瓜子乙醇提取物和波棱素对不同癌细胞体外生长都具有明显的抑制作用［16，44］；波棱内酯I与波棱内酯II对人白血病细胞株HL-60细胞的生长有一定程度的抑制作用［36］。

3　质量控制

对波棱瓜子药材的质量控制主要涉及指纹图谱研究及各类成分的含量测定。

陈朝霞等［45～46］采用RP-HPLC测定了波棱瓜子药材中波棱酮及波棱内酯A的含量，结果表明波棱酮的平均含量为0.14 mg.g-1，波棱内酯A的含量为0.0038%。方清茂等［47］采用RP-HPLC测定了不同产地色吉美朵（波棱瓜子）中木脂素类成分波棱酮的含量，其平均含量为0.32%。钱毓洲等［48］采用超高效液相色谱法测得10批波棱瓜子中波棱甲素 Herpetrione的平均含量为3.723 mg.g-1。杭伟等［49］首次采用高速逆流色谱法对波棱瓜子乙酸乙酯提取物进行分离纯化得到了香豆素类化合物herpetolide A、木脂素类化合物Herpetrione，纯度均高于95%。丛龙波等［50］通过RP-HPLC同时测定了15个批次藏药波棱瓜子中7个活性木脂素成分的含量，研究得出不同产地波棱瓜子药材中木脂素含量相差很大，因此可能会使临床疗效产生差异。袁海龙等［51］采用正相高效液相色谱联合二极管阵列紫外检测器同时测定波棱瓜子中4个木脂素类化合物含量，研究得到在280nm处，四个木脂素的吸收达到最大值。

近年来一测多评法已广泛应用于中药有效成分的多指标含量测定上。王佩龙等［52］以herpetolide A为内参物，建立其与herpetotriol的相对校正因子，通过相对校正因子建立了 herpetotriol的含量测定方法，利用该方法，使用herpetolide A作为标准品，可以用时测定herpetolide A和herpetotriol的含量。

4　工艺研究

袁海龙等［53～57］对肝能滴丸的制备工艺进行了研究。对基质、冷却剂及滴制条件进行筛选，确定了以PEG4000:PEG6000（2:5）为基质，药液温度90℃，滴头内径3.0mm，滴距11.0 cm，滴速40滴/min，二甲基硅油为滴制时的冷却剂的肝能滴丸制备工艺。并采用具有量化指标的丸重变异系数、崩解时限及外观质量等3项指标按加权系数评分法对肝能滴丸的成型工艺进行综合评分，评定工艺的优劣。为了增加波棱甲素溶解度并提高其肝脏靶向性，可将其与水溶性载体结合来提高其生物利用度。研究采用高压均质法制备波棱甲素以及其纳米混悬剂，采用Box-Behnken 设计试验优化 HPE-NS-ODF 的处方纳米混悬剂（nanosuspension，NS）。张鑫等［58］首次采用薄膜分散法制备了波棱素脂质体并优化了其处方工艺，增加了波棱素的溶解度并提高了其肝脏靶向性。

5　结语

综上所述，近年来对于藏药波棱瓜子的化学、药理、工艺的研究已经取得了一定的进展。其化学成分研究较为透彻，主要集中在木脂素、香豆素类以及脂肪油等，但其它成分研究较少，尤其生物碱类成分未见报道。药理方面，对其木脂素类成分的抗肝损伤活性研究较为全面，但对其黄酮类、微量元素等成分对肝损伤的影响尚无研究，更未见各组分配伍的药效研究报道，对其作用机制的研究也报道较少。

藏药在肝炎治疗中具有一定的特色和优势，但其药效物质基础、作用机制等研究尚欠深入，导致其疗效不够显著，限制其临床应用。因此我们应该在总结利用国内外研究经验的基础上，对波棱瓜子的化学成分、药理作用及机制、制剂工艺及质量控制方法进行深入而系统的研究，为促进藏药新药的研究和开发及临床攻克肝炎这一危害人类健康的重大疾病提供科学依据。

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（责任编辑：陈思敏）

Modern research progress of Tibet medicine Bolengguazi

LIU Mei-lin， ZHANG Mei//（School of Pharmacy， ChengduUniversity of Traditional Chinese Medicine； Key Laboratory of Standardization for Chinese Herbal Medicine， Ministry of Education； National Key Laboratory Breeding Base of Systematic Research， Development and Utilization of Chinese Medicine Resources， Chengdu 611137，Sichuan）

［Abstract］Bolengguazi is a traditional Tibetan drug in treating liver-disease. The latest research developments of Bolengguazi are reviewed in the paper， including chemical composition， pharmacological effects and technology research. The review is aimed to provide a reference for exploring new chemical composition， further researching on pharmacological effects of Bolengguazi，and promoting the effective use of Tibetan medicinal resources.

［Key words］Bolengguazi； chemical constituents； pharmacological effects； technology research

［中图分类号］R 284

［文献标识码］A

［文章编号］1674-926X（2015）06-030-04

［作者简介］刘 美琳，中药学专业在读硕士研究生，主要从事中药化学研究

［通讯作者］张 梅，教授，博士生导师，主要从事中药化学研

［收稿日期］究 Tel:028-61800231 Email:zhangmei63@126.com2015-03-12