感染肠道病毒71型的手足口病患儿相关免疫状态变化

王成宇

·临床医学·

感染肠道病毒71型的手足口病患儿相关免疫状态变化

王成宇

目的探讨肠道病毒71型(EV71)感染所致的手足口病患儿相关免疫状态变化的情况。方法80例由EV71感染所致的手足口病患儿,根据病情程度分为轻症状组和重症状组,各40例；将同期40例健康体检儿童血液样本作为对照组。三组样本同时检测白介素-10( IL-10)、免疫球蛋白和淋巴细胞亚群,并进行比较。结果轻、重症状组IL-10水平分别为(175.09±6.28)、(287.15±10.58)pg/ml均高于对照组为(58.25±4.36)pg/ml(P<0.01)；重症状组患儿血清细胞因子IL-10明显高于轻症状组(P<0.05)。轻、重症状组患儿血清免疫球蛋白(Ig)G、IgA和IgM水平均显著高于对照组(P<0.05)；重症状组患儿血清IgG、IgA和IgM水平显著高于轻症状组(P<0.05)。重症状组患儿CD4+和CD8+水平显著低于轻症状组和对照组(P<0.05)。结论由感染EV71所致的手足口病患儿有明显免疫功能紊乱,且与疾病严重程度成正相关。

肠道病毒71型；手足口病；免疫

手足口病(Hand-foot-mouth disease,HFMD)属于常见疾病,主要由肠道病毒感染所致,在全球多个国家与地区均暴发和流行［1］,我国近几年多个省份频发,且以儿童为主［2］,需加强重视。阎岩等［3］研究发现EV71是造成手足口病的主要病原体,该病毒是一种细小RNA病毒,有明显嗜神经与嗜皮肤性,诱发疾病后可表现出不同症状。轻度症状仅有疱疹性咽峡炎或自限性手足口病；重度症状则可为脑脊髓炎、脑膜脑炎、神经源性肺水肿和脑干脑炎等［4］。本文就EV71引起的手足口病患儿细胞因子、体液免疫和细胞免疫的变化进行研究,以期发现疾病严重程度与免疫功能状态的关系。具体报告如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料 选取辽宁省本溪市中心医院2012年6月～2016年6月收治的80例确诊为EV71感染所致的手足口病患儿的血液样本作为研究对象,年龄6个月～9岁,患儿均经临床表现、分型和治疗等确诊符合手足口病相关诊断标准［5］,并排除其他慢性疾病史。将患儿根据病情程度分为轻症状组和重症状组,各40例；将同期40例健康体检儿童血液样本作为对照组。轻症状组男19例,女21例。重症状组男16例,女24例。对照组男18例,女22例。三组样本一般资料比较,差异无统计学意义(P>0.05),具有可比性。

1.2 方法 对三组样本分别收集两管静脉血液,一管做抗凝血处理；一管提取血清。采用酶联免疫吸附实验(ELISA法)检测血清IL-10的含量。试剂购自美国Bender MedSystems公司。使用西门子BNP ProSpec 全自动特定蛋白分析仪(免疫散射比浊法)测定血清IgG、IgA、IgM含量,试剂为西门子原装配套试剂。采用EPICL XL型流式细胞仪(美国Beckman公司)检测外周血T淋巴细胞亚群(CD4+和CD8+),每个样本计数淋巴细胞10000个。实验结果使用Cellquest软件进行分析。仪器及试剂均由上海汇中细胞生物科技有限公司提供,严格按其说明书进行操作。

1.3 统计学方法 采用SPSS20.0统计学软件进行数据统计分析。计量资料以均数±标准差(±s)表示,采用t检验；计数资料以率(%)表示,采用χ2检验。P<0.05表示差异具有统计学意义。

2 结果

2.1 三组血清IL-10水平比较 轻、重症状组患儿血清细胞因子IL-10均显著高于对照组(P=0.003<0.01)；重症状组患儿血清细胞因子IL-10明显高于轻症状组(P=0.024<0.05)。见表1。

表1 三组IL-10水平比较(±s,pg/ml)

注：与对照组比较,aP<0.01；与轻症状组比较,bP<0.05

组别 例数 IL-10轻症状组 40 175.09±6.28a重症状组 40 287.15±10.58ab对照组 40 58.25±4.36

2.2 三组血清IgG、IgA和IgM水平比较 轻、重症状组患儿血清IgG、IgA和IgM水平均显著高于对照组(P<0.05)；重症状组患儿血清IgG、IgA和IgM水平显著高于轻症状组(P=0.036、0.024、0.022<0.05)。见表2。

2.3 三组外周血T淋巴细胞亚群指标比较 重症状组患儿静脉血CD4+和CD8+ T水平均显著低于轻症状组和对照组(P<0.05)；轻症状组患儿静脉血CD4+和CD8+水平低于对照组,但差异无统计学意义(P>0.05)。三组样本CD4+/CD8+水平比较差异无统计学意义(P>0.05)。见表3。

表2 三组免疫球蛋白水平比较(±s,g/L)

注：与对照组比较,aP<0.05；与轻症状组比较,bP<0.05

组别 例数 IgA IgG IgM轻症状组 40 0.98±0.14a 8.29±1.36a 1.42±0.23a重症状组 40 1.46±0.27ab 11.58±1.86ab 1.86±0.32ab对照组 40 0.75±0.11 7.62±1.25 1.07±0.16

表3 三组T淋巴细胞亚群细胞指标比较(±s)

注：与对照组比较,aP<0.05；与轻症状组比较,bP>0.05

组别 CD4+(%) CD8+(%) CD4+/CD8+轻症状组 52.63±6.74a 24.56±4.57a 2.17±0.53重症状组 38.16±4.72ab 19.41±3.52ab 2.05±0.62对照组 56.65±6.29 25.25±4.29 2.15±0.38

3 讨论

EV71多发生于学龄前儿童,尤其以3岁以下年龄组发病率最高,主要引起手、足和口腔等部位的斑丘疹和疱疹,个别患者可引起脑干脑炎、无菌性脑膜炎和脊髓灰质炎性麻痹等神经系统疾病,其中中枢神经系统感染往往会诱发肺出血、肺水肿及心肌炎等,从而引起较高的患儿病死率［6］。儿童属于特殊的一类群体,其免疫系统和功能发育和成人比较相差甚远,不健全的免疫系统使得病原微生物极易感染机体［7］。特别是婴幼儿,固有免疫与适应性免疫能力较差,是6岁以下儿童更易发生手足口病的原因。目前越来越多的研究指出,由EV71感染导致的手足口病可能和患儿免疫功能状态改变有关。

IL-10是一种具有调节免疫作用的细胞因子,它能抑制Th1细胞产生和释放白介素-2(IL-2)、干扰素-γ(IFN-γ)等促炎因子,具有很强的抗炎及免疫抑制活性；IL-10可刺激B细胞的增殖、分化以及抗体的产生,是体内少有的双向免疫调节因子。通过对IL-10浓度、作用时间等因素的限制来对免疫细胞发挥免疫抑制和免疫刺激的双向调节［8,9］。本研究发现患儿血清中IL-10的水平随病情的加重而明显升高,说明血清IL-10可用于评估患儿病情的严重程度和预后。

有研究认为,手足口病患儿的病情严重程度与患儿免疫球蛋白水平、T细胞亚群水平密切相关［10］。临床通常根据T细胞亚群判定机体免疫细胞的功能；IgG、IgA和IgM水平反应了机体体液免疫系统功能。本研究发现轻、重症状患儿IgG、IgA和IgM水平显著提高,并与疾病的严重程度成正相关。重症状患儿CD4+和CD8+ T淋巴细胞亚群水平显著低于轻症状组和对照组(P<0.05)；轻症状组CD4+和CD8+ T淋巴细胞亚群水平与对照组比较差异无统计学意义(P>0.05),与邹前锋等［11］的研究不同,这可能与轻症状患儿的样本采集时间有关。

综上所述,EV71感染能够引起的手足口病患儿明显免疫功能紊乱。临床检测血清IgG、IgA和IgM水平、T淋巴细胞亚群和相关细胞因子将有助于早期识别轻、重症病例和评估预后效果。

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10.14164/j.cnki.cn11-5581/r.2016.23.009

2016-10-31］

117000 辽宁省本溪市中心医院遗传基因室