注射用硫酸头孢匹罗安全性实验研究

王艳春

·实验研究·

注射用硫酸头孢匹罗安全性实验研究

王艳春

目的探讨注射用硫酸头孢匹罗的安全性。方法配置不同浓度的盐酸头孢匹罗注射液,应用大鼠、大耳白兔等动物进行静脉血管刺激实验、变态反应试验、肌肉刺激实验及溶血实验。结果溶血性实验发现,无絮状沉淀。肌肉刺激性实验及静脉血管刺激性实验发现,无炎症及坏死等病变。经变态反应实验发现,硫酸头孢匹罗注射液对于实验动物均无变态反应影响。结论注射用硫酸头孢匹罗对于红细胞并无溶血性反应及变态反应,对静脉血管及肌肉组织并无刺激反应,值得临床进一步研究应用。

注射用；硫酸头孢匹罗；安全性；实验研究

硫酸头孢匹罗为第四代头孢菌素类药物,为临床针对革兰阳性菌抗菌素新药［1］。在投入到临床使用之前,根据国家有关条例,需要对其安全性进行动物研究［2］。硫酸头孢匹罗具有广谱抗菌活性,此药对于葡萄球菌、肺炎球菌均有显著的抗菌效果,并且此类药物对于绿脓杆菌具有头孢他啶相似的抗菌效果,临床中主要适用于未知病原菌或敏感菌属造成的下呼吸道感染、肾盂肾炎、皮肤或软组织感染等。本研究将注射硫酸头孢匹罗应用于动物实验,具体阐述如下。

1 材料与方法

1.1样本来源 本研究所选实验动物均是中国医科大学附属盛京医院医学实验动物中心提供,所选实验药剂有通化茂祥有限公司和程度生物制品研究所生产。

1.1.1溶血性实验 实验动物为大耳白兔,雌雄各半,药剂包括0.5 g硫酸头孢匹罗、0.9%氯化钠溶液。

1.1.2静脉血管刺激性 实验动物为4只大耳白兔,试剂为5 mg/L硫酸头孢匹罗试剂。

1.1.3变态反应实验 实验动物为18只饲养大鼠,用盐酸头孢匹罗,吸附百日咳、白喉、破伤风联合疫苗疫苗、卵白蛋白、甲醛试剂。吸附百日咳、白喉、破伤风联合疫苗,由成都生物制品研究所生产,生产批号为200504004-5。疫苗中每毫升中有白喉效价多于30 U,百日咳效价多于4.0 U,破伤风效价多于40 U。应用卵白蛋白为1 g/瓶,用氯化钠稀释成1.4 mg/ml、甲醛500 ml。

1.1.4肌肉刺激性实验 实验动物为4只大耳白兔,试剂为5 mg/L硫酸头孢匹罗试剂。

1.2研究方法

1.2.1溶血性实验 实验动物为大耳白兔,应用试剂为硫酸头孢匹罗注射液,取实验动物心脏新鲜血液20 ml,在脱纤维处理后向试管内加入0.9%氯化钠溶液,将其离心处理,设置离心时间为5 min,转速为2500 r/min,离心后去除上清液,多次重复离心,使最后得到溶液无色透明,将余下血细胞做成实验红细胞悬液,按照1：50比例进行稀释。取0.5 g注射用硫酸头孢匹罗,以0.9%氯化钠溶液将其稀释至0.1 g/ml。取7支试管,编号1～7号。分别加入2.5 ml 2%红细胞悬液,其中1～6号试管按照梯度加入0.9%氯化钠溶液,1号试管加入2.0 ml,6号试管加入2.5 ml,7号试管不加入氯化钠溶液,向1～5号试管内加入0.1 g/ml注射用硫酸头孢匹罗,使试管内溶液均达到5 ml,7号试管加入纯化水为空白对照。

1.2.2静脉血管刺激性 实验动物为大耳白兔样本4只,亦采用同体左右对比方法进行实验,每只白兔右侧耳缘静脉滴注注射用硫酸头孢匹罗5 mg/ml,左侧耳缘静脉滴注等容积0.9%氯化钠溶液5 ml/kg,2次/d给药,连续滴注4 d,最后一次给药24 h后进行处死,于注射近心端1.5～3.0 cm剪取耳缘,常规切片染色后镜检,观察有无血栓形成、内皮损伤等病理变化。

1.2.3变态反应实验 实验动物为18只饲养大鼠,分A、B、C三组,每组6只。C组为对照组,A组实验动物分别应用0.1 g/ml注射用硫酸头孢匹罗试剂,B组实验动物注射卵蛋白溶液,C组大鼠注射0.9%氯化钠注射液,以上实验均进行腹腔注射0.5 ml,隔日注射1次,连续注射21 d,观察记录第14、21 d大鼠情况。

1.2.4肌肉刺激性实验 实验动物为4只大耳白兔,以同一只动物左右肢作为对照,将动物左侧肱四头肌注射0.9%氯化钠注射液1 ml,右侧肱四头肌注射盐酸头孢匹罗注射液1 ml,注射后48 h将动物样本处死,解剖白兔取出双侧肱四头肌,观察肱四头肌肌肉组织是否出现刺激反应,之后进行常规染色切片,镜下进行观察。

1.3观察指标 溶血性实验判别结果是以红细胞混悬液变为红色澄清为溶血实验阳性,若溶液出现棕红色絮状沉淀,则代表红细胞凝集,若出现红细胞下沉,上层液体无色澄清,则为溶血实验阴性。肌肉刺激性实验主要对肌肉纤维组织横纹、结构完整性、炎症及其他反应进行探讨。变态反应实验以实验动物是否发生变态反应进行对照观察。

2 结果

研究发现,硫酸头孢匹罗注射液对动物并无显著溶血、变态反应,且对血管、肌肉并无严重刺激性反应,具体溶血性实验发现,1～6号试管均未见溶血反应,红细胞全部下沉,上清液无色澄清,并无絮状沉淀。肌肉刺激性实验及静脉血管刺激性实验发现,组织切片下肌肉组织纹理清晰,结构完整,均无炎症及坏死等病变,静脉血管纹理清晰,血管无损伤,无明显水肿及炎症反应出现,内皮细胞排列整齐,血管壁无增厚且无栓塞形成,总结得出硫酸头孢匹罗注射液对动物并无明显刺激作用。经变态反应实验发现,头孢匹罗注射液对动物无变态反应影响。

3 小结

本次研究属临床新药研制阶段性成果,具体是以小样本作为新药安全性评价的一种应用。硫酸头孢匹罗具有第三代头孢菌素特征并且此类药物与青霉素结合蛋白亲和力较高,能在细菌壁膜间隙中维持较高浓度,对于染色体和质粒介导的β-内酰胺酶亲和力低且稳定［3］。本次研究可知注射用硫酸头孢匹罗对于红细胞并无溶血性反应及变态反应,对静脉血管及肌肉组织并无刺激反应,值得临床进一步研究应用。

［1］张健翔,赵利枝,姚西玲.注射用硫酸头孢匹罗的安全性研究.实用药物与临床,2010,13(3):190-192.

［2］耿武洪.注射用硫酸头孢匹罗安全性实验研究.医药导报,2008,27(3):278-279.

［3］李宝媛,唐晓露.注射用硫酸头孢匹罗含量测定方法研究.黑龙江科技信息,2010(6):195.

10.14164/j.cnki.cn11-5581/r.2016.02.228

2015-10-09］

114032 鞍山市双山医院药剂科