硫酸多糖类药物含量测定方式探析

钟敏 肖巧请 王珏 赵承兵

硫酸多糖类药物含量测定方式探析

钟敏 肖巧请 王珏 赵承兵

本文综合近几年国内外研究的结果和资料,分析和阐述硫酸多糖类药物含量的测定方式。以5个不同批次的硫酸软骨素为例,对比和阐述部颁标准法与间苯三酚分光光度法在测定硫酸软骨素含量上所产生的不同结果。

硫酸多糖类；含量；测定方式；准确性

硫酸多糖类型的药物内含天然提取的糖胺聚糖以及硫酸多糖等,其中主要涉及到肝素和甘糖酯等［1］。根据我国相关卫生部门的药品检测标准,其内部含量的主要检测方式为将其中的酸水解形成氨基己糖成分［2］。除此之外,其在碱性条件之下,在和乙酰丙酮出现反应的过程中,和对二甲氨基苯甲醛产生显色性转变,并作为其中重要的对照品,其中较为常用的含量测试方法为分光光度方法［3］。本文实验中分析两种不同检验方式在硫酸软骨素含量测定中的不同效果 ,具体报告如下。

1 材料与方法

1.1 材料 提取软骨素原料作为研究对象,硫酸软骨素A为对照品,将五种不同批次的硫酸软骨素原料分为五组,分别为A、B、C、D、E组。其中氨基葡萄糖的对照品来自于上海试剂药厂,另外,乙酰丙酮、间苯三酚以及二甲氨基苯甲醛都属于分析纯。对比和分析五组产品在不同检测方式下的不同效果。运用752型可见紫外分光光度计进行分析。

1.2 方法

1.2.1 形成间苯三酚分光光度法的相关性标准曲线 选取其中经105℃干燥4 h的硫酸软骨素有关的对照品0.2068 g展开实验,并将其全部放入10ml量瓶当中,接着添加适量水,使其发生溶效果,添加水使其达到刻度处的位置,并进行均匀摇晃。分别取0.2、0.6、0.4、0.8、1.0ml量放置在10ml的量瓶当中,并加水使其至1ml。另外,增加3ml间苯三酚溶液,并均匀摇晃,放置在沸水当中浴30min,接着拿出,使用冰水冷却持续5min,添加冰醋酸使其达到刻度,均匀摇晃。另外取出1ml水,运用同样方法进行操作,用于空白对照。在波长处的558cm处测量其吸收程度,并实现线性回归。最后得出其标准曲线方程应为A=0.567C+0.110,r=0.9997,而其中的线性范围应是0.253～1.260mg/ml。

1.2.2 运用间苯三酚分光光度办法对试验品的含量进行测验 提取0.5 g经105℃干燥4 h的硫酸软骨素试验品,进行精密称定。将其放置在50ml的量瓶当中,增加适量水,振动摇晃。放置使其溶,并增加水进行稀释,使其达到刻度处,均匀摇晃。取出1ml并按照上文所述进行操作,测验其本身的吸收程度,以标准曲线为准计算出含量。

1.2.3 运用部颁保准法对试验品进行含量测定 以标准中规定的方式为准,测定其中氨基己糖的有效含量,将其乘以2.82,并最后换算成为硫酸软骨素的有效含量。将两种不同办法得出的含量结果进行对比和分析。

2 结果

运用硫酸软骨素A组作为其中主要的对照品,表现出线性关系较好。但是,当运用在测验其中供试品有效含量的过程中,其检测结果相对部颁标准法明显更高。见表1。

3 讨论

近几年,硫酸多糖类型的药物已经逐渐开始运用在临床治疗过程中,其在抗凝血和抗血栓等方面都发挥重要的作用。多糖在作为药物的情况下,其内部含量的多少直接决定药效,而因为其结构构成不存在均一性,致使不同测量方式可能导致测量结果存在比较大的差异,且不利于药物的运用和研究。因此,如何寻找最为准确地硫酸多糖类型药物含量的测定方式是当前影响相关药物含量鉴定等的重要问题之一。

硫酸软骨素主要来自于猪的喉骨以及鼻中骨等软骨组织当中,属于一种天然性粘多糖［4］。肝素属于其中核心五糖,是促使其发挥抗凝活性的重要组成结构。间苯三酚发在多糖类药物含量测验当中运用较为普遍,主要原理是多糖物质在有关酸性条件之下,降解成为单糖形式,之后再分解成为糠醛,所得到的产物可和间苯三酚发生反应,并显示颜色,且能够在标准波长部位产生紫外吸收情况,间接测验出其多糖含量［5］。这种测验方式操作构成比较简单,且耗费的时间较短,具有操作方面的优势,受到较大范围内的欢迎,且经常运用在实验过程当中。

本文研究结果中发现,当运用硫酸软骨素A组作为其中主要的对照品的过程中,表现出的线性关系较好。但是,当运用在测验其中供试品有效含量的过程中,其检测结果相对部颁标准法明显更高。出现类似情况的主要原因与硫酸软骨素相关部颁标准有关,其主要凭借氨基葡萄糖展示其内部含量。因此,在实际将其转变成为硫酸软骨素含量的过程中,应提前确定该供试药品的基本单位是硫酸乙酰氨基葡萄糖以及葡萄糖醛酸。但是,硫酸软骨素的原始材料一般是硫酸软骨素的A、B组等混合型物品,混合比例相互不一,且其中不同批次的硫酸软骨素中相对的分子量也存在较大差别。因此,在实际测量过程中可能出现转换性误差。

综上所述,间苯三酚法相对来说操作更加迅速而有效,且比较适合运用在掌握一定规律后的内部质量控制当中。

［1］薛依婷,李春霞,管华诗.硫酸多糖类药物含量测定方法研究进展.中国药学杂志,2014(4):271-274.

［2］曾洋洋,韩章润,杨玫婷,等.海洋糖类药物研究进展.中国海洋药物,2013(2):67-75.

［3］隋玉荣.多糖类药物的研究进展.天津药学,2013(2):41-43.

［4］冯优,王凤山,张天民,等.多糖类药物的研究进展.中国生化药物杂志,2008(2):129-133.

［5］胡川梅,郑璐侠,陈钢.多糖类药用辅料的应用及其质量分析进展.中国药品标准,2015(1):31-35.

10.14164/j.cnki.cn11-5581/r.2016.07.216

2015-12-10］

518000 深圳市药品检验研究院