晚期先天梅毒诊断中聚合酶链反应技术的应用价值

胡二红 庞新丰

晚期先天梅毒诊断中聚合酶链反应技术的应用价值

胡二红 庞新丰

目的通过试验数据的分析对比,得出聚合酶链反应(PCR)技术在晚期先天梅毒诊断中的意义。方法对梅毒孕妇产后无症状新生儿42例出生时采用PCR技术检测脐血和胎盘组织结果进行对比,采用梅毒螺旋体特异抗体测定(TPPA)和梅毒血清学实验(trust)血清学检测并且进行随访定期复查。结果PCR技术检测梅毒螺旋体选用脐血和胎盘组织检测敏感性对比差异具有统计学意义(χ2=3.91,P＜0.05)。6个月内TPPA 检测阳性例数均多于实际阳性例数；trust法检测4倍于母体例数均少于实际阳性例数。结论TPPA和trust法用于先天梅毒的实验室检测有一定弊端,检测结果不能完全有效的反映新生儿真实情况,出生时选用胎盘组织进行PCR检测,对先天梅毒诊断有积极作用。

聚合酶链反应；胎盘组织；晚期先天梅毒

梅毒传播途径中新生儿先天梅毒主要原因是母婴垂直传播［1］。先天梅毒可治可防,对于新生儿先天梅毒早确诊早治疗最为重要。先天梅毒因为临床症状表现不明显,多为晚期先天梅毒。因此选择有效准确的实验室方法对于婴儿的预后有积极的作用。PCR技术具有敏感性高、特异性强等特点,本文进行回顾性分析,具体报告如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料 选择2012～2013年在本院围生期保健中确诊的梅毒孕妇所产婴儿,出生时无梅毒临床症状42例作为研究对象。6个月最终确认为先天梅毒的23例。

1.2 方法 PCR仪器选用达安7600,试剂原厂配套；trust法试剂由上海荣盛生产；TPPA法试剂由日本富士提供。出生时进行TPPA、trust、PCR法检测。并且在婴儿1、3、6月龄时进行TPPA和trust法复查。

1.3 诊断标准 先天梅毒诊断标准参照2006年美国疾病控制中心制定的诊断标准［2］。

1.4 统计学方法 采用SPSS18.0统计学软件进行统计分析。计数资料以率(%)表示,采用χ2检验。P＜0.05表示差异具有统计学意义。

2 结果

2.1 脐血作为检测标本敏感性60.87%(14/23),胎盘组织作为检测标本敏感性100.00%(23/23)。脐血和胎盘组织检测敏感性对比,差异具有统计学意义(χ2= 3.91,P＜0.05)。见表1。

2.2 6个月内TPPA检测阳性例数均多于实际阳性例数,trust法检测4倍于母体例数均少于实际阳性例数。见表2。

3 讨论

围生期保健中发现的梅毒孕妇进行必要的驱梅药物治疗,但是因人而异,治疗效果不尽相同,新生儿情况也不会一致。实验室检测时不典型的试验表达会因正规治疗后的梅毒活动性不强而增多。抗体含量的高低差异容易影响结果,敏感性较差。PCR技术具有确诊早、特异性高的优点。

先天梅毒患儿出生时2/3症状没有临床表现 ,但在4～8周时会有临床症状出现［3］,出生后2年内出现临床症状的称为早期先天梅毒 ,2年后出现临床症状的称为晚期先天梅毒。诊断先天梅毒的标准是以血清学检测和临床症状结合的方法,对于晚期先天梅毒血清学检测缺点明显。无症状先天梅毒的早期诊断及治疗对于优生有积极意义。

本次研究表1中胎盘组织标本23例阳性与实际情况完全吻合,脐血标本中9例未检出梅毒螺旋体为假阴性,是因为血液中存在梅毒螺旋体的随机性强,一次检出率低［4］。PCR法诊断先天梅毒标本选用胎盘组织敏感性、特异性均高于血液标本,诊断优势明显。

血清学检测可以作为可靠的检验指标,但在先天梅毒和神经型梅毒、不典型梅毒中效果不好［5］。表2中两种检测方法均出现了不同程度的误差。TPPA法假阳性率高,6个月内TPPA 检测阳性例数均高于实际阳性例数。梅毒特异性抗体血清学检测出现假阳性原因是多样的：IgG抗体可以通过胎盘由母体传入胎儿,会对结果有影响,这也是需要随访确诊的原因；其次是类风湿因子,自身抗体和其他感染的干扰也会有误差出现,特异性较差。

trust法假阴性率高,trust法检测4倍于母体例数均低于实际阳性例数。trust法检测假阴性率过高是因为婴幼儿早期受梅毒螺旋体的侵袭尚未产生足够的反应素表达,母体妊娠期驱梅治疗也会减低梅毒的侵袭力,先天梅毒trust法滴度未能大于母体4倍。trust法检测还会因滴度过高原倍检测时产生假阴性。

晚期先天梅毒的诊断根据梅毒血清学随访结果进行确认,容易错过最佳治疗时机,对于疑似病例积极使用驱梅药物治疗又会造成抗生素的滥用。因此,对于临产前梅毒血清学检测滴度较高,驱梅治疗不积极,效果不太好的孕妇,产后新生儿无临床症状,疑似梅毒感染的,采用出生后处理过的胎盘组织进行PCR技术荧光定量检测诊断先天梅毒可靠有效。通过积极的治疗可以有效预防晚期先天梅毒的发生,对于新生儿先天梅毒PCR技术可以作为确诊试验的首选。

［1］陈涵强.新生儿先天性梅毒52例.实用儿科临床杂志,1999,14(1):22-23.

［2］Marangoni A,Moroni A,Tridapalli E,et al.Antenatal syphilis serology in pregnant women and follow-up of their infants in northern Italy.Clin Microbiol Infect,2008,14(11):1065-1068.

［3］阮光强,陈卫.梅毒检测方法的比较分析.检验医学与临床,2011,8(20):2470-2471.

［4］Abel EA.Diagnosis of drug induced psoriasis.Semin Dermatol,1992,11(4):269-274.

［5］Hollier LM,Cox SM.Syphilis.Semin Perinatol,1998,22(4):323-331.

Application value of polymerase chain reaction technique in diagnosis of late congenital syphilis

HU Er-hong,PANG Xin-feng.Department of Inspection,Jiaozuo City Hospital of Ophthalmology and Otorhinolaryngology,Jiaozuo 454000,China

ObjectiveTo analyze and compare experimental data in order to gain significance of polymerase chain reaction (PCR) technique in diagnosis of late congenital syphilis.MethodsPCR was applied to detect umbilical cord blood and placenta tissue in 42 asymptomatic newborn by syphilis women,and the detection ourcomes were compared.Serological tests were applied through treponema pallidum antibody (TPPA) and tolulized red unheated serum test (trust).Follow-up and regular reexaminations were also applied.ResultsThe difference of detection sensitivity by PCR in treponema pallidum between umbilical cord blood and placenta tissue had statistical significance (χ2=3.91,P＜0.05).TPPA showed more positive cases in 6 months than actual positive cases,and trust method showed less cases with 4 times of matrix than actual positive cases.ConclusionDue to certain disadvantages shown by TPPA and trust method in laboratory detection of congenital syphilis,they can not reveal fully effective condition of newborn.Implement of PCR for placenta tissue detection can provide positive effect in diagnosis of congenital syphilis.

Polymerase chain reaction; Placenta tissue; Late congenital syphilis

10.14164/j.cnki.cn11-5581/r.2016.07.007

2015-12-07］

454000 焦作市五官医院检验科(胡二红)；河南省焦作市妇幼保健院检验科(庞新丰)