氘代Rigosertib类似物的合成*

陈　锞，龚　瑜，樊　磊，胥珂馨，陈元伟，(.四川大学生物治疗国家重点实验室，四川成都　6004; .成都海创药业有限公司，四川成都　6004)



氘代Rigosertib类似物的合成*

陈锞1，龚瑜2，樊磊2，胥珂馨2，陈元伟1，2
(1.四川大学生物治疗国家重点实验室，四川成都610041; 2.成都海创药业有限公司，四川成都610041)

摘要:以2，4，6-三羟基苯甲醛为原料制得中间体2，4，6-三甲氧基苯甲醛(2a)和2，4，6-三三氘甲氧基苯甲醛(2b);以4-烷氧基-3-硝基苄硫基乙酸为原料，经氧化、缩合-脱羧、还原、取代和水解5步反应合成了氘代Rigosertib类似物，收率80%～86%，其结构经1H NMR和MS表征。

关键词:2，4，6-三羟基苯甲醛;氘代药物;合成

对先导药物潜在代谢点进行改造，可减慢其在人体内的代谢，达到增强药效的目的。该方法投入小，研发周期短，风险较低，是新药研发的有效思路［1］。碳氘键较碳氢键更稳定［2－3］，将氢替换为氘后，既能最大限度的保留药物分子的原有结构，维持其药理活性，又可能增强药物稳定性，延长其半衰期，从而提高药效，减短药物服用周期［4］。

Rigosertib【2-【(2-甲氧基)-5-{［(E)-2-(2，4，6-三甲氧基苯基)乙烯基磺酰基］甲基}苯基】氨基乙酸(Chart 1)】是PLK1的非ATP竞争性抑制剂［5］，其对骨髓增生异常综合征患者的治疗已进入三期临床实验阶段。

Chart 1

为进一步提高Rigoserti药理活性，增强其代谢稳定性，我们通过分析Rigosertib结构，找到其潜在代谢位点并进行了氘代改造，合成了6个氘代Rigosertib类似物(7a～7c和8a～8c，Scheme 1)。该反应路线较文献［6］方法收率高，条件温和，操作简便。

Scheme 1

1　实验部分

1.1仪器与试剂

Bruker AV 400 MHz型核磁共振仪(CDCl3为溶剂，TMS为内标); LC-MS 12200-6120型质谱仪［Waters X Bridge C18柱(50 mm×4.6 mm×3.5 μm)］; VARIAN Spectr AA 220FS型原子吸收光谱仪。

4-取代-3-硝基苄硫基乙酸(3a和3b)按文献［6］方法合成;其余所用试剂均为分析纯。

1.2合成

(1)2a和2b的合成(以2a为例)

在反应瓶中加入2，4，6-三羟基苯甲醛(1)1.54 g(10 mmol)和碳酸钾7.0 g的DMF(15 mL)溶液，搅拌下滴加碘甲烷2.5 mL，滴毕，于60℃反应过夜。冷却至室温，加水100 mL，用乙酸乙酯萃取，合并有机相，旋干，剩余物经硅胶柱层析［梯度洗脱剂:V(石油醚)∶V(乙酸乙酯)=50∶1～5∶1］纯化得1.14 g黄色固体2a，收率58%。

以氘代碘甲烷替代碘甲烷，用类似的方法合成2b，收率48%，m.p.121℃～122℃;1H NMR δ:10.36(s，1H)，6.07(s，2H)。

(2)4a和4b的合成(以4a为例)

在反应瓶中加入3a 5.1 g(19.6 mmol)和甲醇150 mL，搅拌使其溶解;缓慢滴加过氧硫酸钾26.5 g的水(80 mL)溶液，滴毕，于室温反应10 h。过滤，滤液倒入500 mL水中，用乙酸乙酯萃取，有机层依次用水(100 mL)和饱和食盐水(80 mL)洗涤，用无水硫酸钠干燥，过滤，滤液减压浓缩得黄绿色固体3-硝基-4-三氘代甲氧基苄基磺酰基乙酸(4a)5.6 g，收率98%，m.p.136℃～138℃;1H NMR δ:7.98(s，1H)，7.70(d，J=8.7 Hz，1H)，7.15(d，J=8.7 Hz，1H)，4.53(s，2H)，3.86(s，2H); MS m/z:310.3{［M +NH3］+}。

以3b替代3a，用类似的方法合成4b。

(3)5a～5c的合成(以5a为例)

在反应瓶中加入4a 2.0 g(6.8 mmol)，2a 1.4 g(7.2 mmol)，冰乙酸15 mL和苄胺100 μL，回流反应7 h。冷却至室温，过滤，滤饼用异丙醇洗涤，干燥得粗品，粗品用异丙醇重结晶得黄绿色固体(E)-1，3，5-三甲氧基-2-［2-(4-三氘代甲氧基-3-硝基苄基磺酰基)乙烯基］苯(5a)300 mg，收率11%，m.p.185℃～188℃;1H NMR δ:7.84(d，J=2.0 Hz，1H)，7.80(d，J=15.6 Hz，1H)，7.63(dd，J=8.7 Hz，2.0 Hz，1H)，7.10(d，J=8.7 Hz，1H)，7.02(d，J=15.6 Hz，1H)，6.09(s，2H)，4.22(s，2H)，3.85(s，3H)，3.84(s，6H); MS m/z:427.2{［M +H］+}。

用类似的方法合成5b和5c。

(4)6a～6c的合成(以6a为例)

在反应瓶中加入5a 300 mg(0.7 mmol)和混合溶剂［V(二氯甲烷)∶V(甲醇)=3∶1］40 mL，搅拌使其溶解;加热至回流，滴加醋酸8 mL，滴毕，缓慢加入铁粉1.3 g，反应8 h。冷却至室温，用硅藻土滤除铁粉，滤液旋蒸除溶，加水析出固体，过滤，滤饼干燥得(E)-2-三氘代甲氧基-5-［(2，4，6-三甲氧基苯乙烯基磺酰基)甲基］苯胺(6a)180 mg; MS m/z:397.2{［M + H］+}。

用类似的方法合成6b和6c。6a～6c均无需纯化，直接投入下一步反应。

(5)7a～7c的合成(以7a为例)

在反应瓶中加入乙酸钾600 mg(39 mmol)和甲醇20 mL，搅拌使其溶解;加入2-溴乙酸甲酯700 μL和6a 160 mg(0.39 mmol)，回流反应6 h。除去溶剂，残余物倒入冰水中，用二氯甲烷萃取，合并有机相，用无水硫酸钠干燥。旋干溶剂，剩余物经硅胶柱层析［梯度洗脱剂:V(石油醚)∶V(乙酸乙酯)=30∶1～4∶1］纯化后用乙醇重结晶得白色固体(E)-2-{ 2-三氘甲氧基-5-［(2，4，6-三甲氧基苯乙烯基磺酰基)甲基］苯胺基}乙酸甲酯(7a)101 mg，收率55%，m.p.186℃～188℃;1H NMR δ:7.64(d，J=15.7 Hz，1H)，7.00(d，J=15.7 Hz，1H)，6.82(d，J=8.1 Hz，1H)，6.68(dd，J=8.1 Hz，1.8 Hz，1H)，6.47(d，J=1.8 Hz，1H)，6.24(s，2H)，4.23(s，2H)，3.87(d，J=3.3 Hz，12H)，3.84(s，2H); MS m/z:469.2{［M + H］+}。

用类似的方法合成7b和7c。

(6)8a～8c的合成(以8a为例)

在反应瓶中加入7a 60 mg(0.128 mmol)，甲醇3 mL和二氯甲烷3 mL，搅拌使其溶解;加入10 mol·L－1氢氧化钠溶液500 μL，反应2 h。旋除二氯甲烷，剩余物用HPLC纯化得白色固体8a 50 mg，收率82%，m.p.203℃～205℃;1H NMR δ:7.12(d，J=15.7 Hz，1H)，6.80(d，J=15.7 Hz，1H)，6.64(d，J=8.0 Hz，1H)，6.52(d，J=8.0 Hz，1H)，6.29(s，1H)，5.85(s，2H)，4.13(s，2H)，3.63(s，3H)，3.55(s，6H)，3.26(s，2H); MS m/z:455.2{［M－Na + H］+} ;钠原子吸收含量(×10－6):Calcd 5.17，found 5.48。

用类似的方法合成白色固体8b和8c。

8b:收率80%，m.p.203℃～204℃;

1H NMR δ:7.12(d，J=15.7 Hz，1H)，6.80(d，J=15.7 Hz，1H)，6.64(d，J=8.0 Hz，1H)，6.52(d，J=8.0 Hz，1H)，6.29(s，1H)，5.83(s，2H)，4.12(s，2H)，3.64(s，3H)，3.26(s，2H); MS m/z:416.2{［M－Na + H］+} ;钠原子吸收含量(×10－6):Calcd 5.56，found 6.33。

8c:收率86%，m.p.203℃～204℃;

1H NMR δ:7.12(d，J=15.7 Hz，1H)，6.80(d，J=15.7 Hz，1H)，6.64(d，J=8.0 Hz，1H)，6.52(d，J=8.0 Hz，1H)，6.29(s，1H)，5.83(s，2H)，4.12(s，2H)，3.26(s，2H); MS m/z:464.2{［M－Na +H］+};钠原子吸收含量(×10－6):Calcd 5.19，found 5.68。

2　结果与讨论

合成5a时，由于4a在极性溶剂中的溶解度很小，反应速度慢，反应程度低，加入二氯甲烷后，反应速度加快，反应比较完全。

合成7a时，在柱层析后重结晶，7a纯度大大提高，降低了下一步水解反应后的纯化难度。

合成8a时，由于合成量少，用传统的成盐和重结晶方法不易得到高纯度的8a。我们推测将7a的氢氧化钠水解溶液经低温浓缩后直接用纯水和乙腈进行HPLC制备，可使8a保持羧酸钠盐离子状态。经检测，8a水溶性良好，pH≈9，无无机盐存在，说明8a是羧酸钠盐。另据钠原子吸收含量测定显示，8a分子中仅含一个钠原子，进一步说明8a是以羧酸钠盐的形式存在。

参考文献

［1］Camille G W.The Practice of Medicinal Chemistry ［M］.Academic Press，2008.

［2］Westheimer F H.The magnitude of the primary kinetic isotope effect for compounds of hydrogen and deuterium ［J］.Chem Rev，1961，61(3):265－273.

［3］Robert F，Gautier D，Dubrulle B.The solar system D/H ratio:Observations and theories［J］.Space Sci Rev，2000，92:201－224.

［4］Thomas G.Gant，using deuterium in drug discovery:Leaving the label in the drug［J］.J Med Chem，2014，57(9):3595－3611.

［5］杨臻峥.抗肿瘤药ON.01910.Na［J］.药学进展，2012，36(1):45－46.

［6］M V R Reddy，P Venkatapuram，Muralidhar R，et al.Discovery of a clinical stage multi-kinase inhibitor sodium(E)-2-{2-methoxy-5-［(2'，4'，6'-trimethoxystyrylsulfonyl)methyl］phenylamino}-acetate(ON.01910.Na):Synthesis，structure activity relationship and biological activity［J］.J Med Chem，2011，54:6254－6276.

·制药技术·

Synthesis of Deuterated Rigosertib Analogs

CHEN Ke1，GONG Yu2，FAN Lei2，XU Ke-xin2，CHEN Yuan-wei1，2
(1.State Key Laboratory of Biotherapy，Sichuan University，Chengdu 610074，China; 2.Hinova Pharmaceuticals Inc.，Chengdu 610074，China)

Abstract:Two intermediates，2，4，6-trimethoxybenzaldehyde(2a)and 2，4，6-trideuteromethoxybenzaldehyde(2b)，were prepared from 2，4，6-trihydroxybenzaldehyde.Three deuterated Rigosertib analogs，in yield of 80%～86%，were synthesized by the reaction of oxidization，condensation-decarboxylation，reduction，substitution and hydrolysis from［(4-alkaxy-3-nitrobenyl)-thion］acetic acid.The structures were confirmed by1H NMR and MS.

Keywords:2，4，6-trihydroxybenzaldehyde; deuterated drug; synthesis

通讯作者:陈元伟，教授，E-mail:ywchen@ hinovapharma.com

作者简介:陈锞(1985－)，男，汉族，重庆綦江人，硕士研究生，主要从事有机合成的研究。E-mail:chenke006@163.com

收稿日期:2014-08-25;

修订日期:2015-04-27

DOI:10.15952/j.cnki.cjsc.1005－1511.2015.06.0557 *

文献标识码:A

中图分类号:O625.32; R914.5