卫舒敏 岳洪源 武书庚张海军 王 晶 齐广海(农业部饲料生物技术重点开放实验室,中国农业科学院饲料研究所,北京100081)
京红蛋鸡对硫酸钠的耐受性研究
卫舒敏 岳洪源 武书庚∗张海军 王 晶 齐广海∗
(农业部饲料生物技术重点开放实验室,中国农业科学院饲料研究所,北京100081)
摘 要:本试验旨在研究京红蛋鸡对饲粮硫酸钠的耐受剂量。采用单因子随机区组设计,选用健康、体重均匀的21周龄京红蛋鸡360只,随机分为5个组(每个组6个重复,每个重复12只鸡)。分别饲喂添加0、0.6%、1.2%、1.8%和3.0%硫酸钠的饲粮,预试期1周,正试期8周。结果显示:试验后期(第5~8周),1.8%和3.0%组产蛋率降低,与0.6%组差异显著(P<0.05)。第4周,硫酸钠对蛋壳强度、蛋白高度、哈氏单位均有显著影响(P<0.05);0.6%组蛋壳强度最佳,极显著高于其他组(P<0.01)。第8周,1.8%和3.0%蛋壳强度极显著低于对照组(P<0.01)。饲粮中添加硫酸钠显著降低血液钾离子含量(P<0.05),并有提高氯离子含量的趋势(P<0.10)。3.0%组红细胞数量极显著高于对照组(P<0.01)。生化指标中,3.0%组的血液总蛋白、白蛋白、葡萄糖含量均显著低于其他各组(P<0.05)。器官切片观察可见,1.8%和3.0%组肾小球水肿、肾小囊萎缩、肾间质发炎,肠道炎症。综上,饲粮中添加硫酸钠≥1.8%,会损害产蛋鸡的健康生长及生产,因此京红蛋鸡对饲粮硫酸钠的耐受剂量为1.2%。
关键词:硫酸钠;京红蛋鸡;耐受性
硫酸钠(Na2SO4)为无机化合物,无水硫酸钠俗称元明粉,十水硫酸钠(Na2SO4·10H2O)又称芒硝,由矿石或海水中得到的矿物质提炼而成。多用于造纸、玻璃、化工、燃料等行业,在家禽生产上的应用较少。
钠(Na)和硫(S)系家禽生长所必需的营养元素[1]。动物机体中的Na多存在于细胞外液,约占其阳离子的90%。Na是维持细胞外液渗透压及其容积的决定性因素,对机体稳态、神经传递、动作电位也有重要的生理作用。S能刺激机体代谢,提高增重、产蛋率,改善肉、蛋品质[2]。虽不能合成蛋氨酸,但硫酸根离子(SO24-)能提供S,在蛋鸡体内合成牛磺酸、硫酸软骨素、胱氨酸、黏多糖类等[3],减少蛋氨酸在提供无机硫及胱氨酸和牛磺酸上的消耗。因此饲粮中含硫氨基酸缺乏时,添加Na2SO4能提高家禽生产性能,可改善产品品质,增加效益。一般认为饲粮中Na2SO4最佳剂量为0.3%~0.6%[4]。因其能影响饲粮离子平衡(DCAB),且在肠内形成高渗溶液,促进胃肠蟠动和增加肠壁细胞水分分泌,因此剂量超过1%会使动物腹泻、影响机体健康,从而影响生产性能[5]。
Na2SO4系《饲料添加剂品种目录(2013)》(2045号公告)允许使用的矿物质元素添加剂,但在《饲料添加剂安全使用规范》(1224号公告)中未给出安全限量。本试验以0.6%为初始剂量,按其倍数设置添加梯度,旨在确定京红蛋鸡饲粮中Na2SO4的安全限量。以期为生产中Na2SO4在京红蛋鸡饲料中的正确使用提供科学依据。
1.1 试验材料
无水Na2SO4(≥99.0%,批号20130923),购自西陇化工有限公司。21周龄体重均匀、身体健康的京红产蛋鸡360只。
1.2 试验方法
根据《饲料和饲料添加剂畜禽靶动物耐受性评价试验指南(试行)》(农牧办[2011]21号),及Na2SO4对家禽营养的特殊性设计京红蛋鸡耐受性试验。试验采用单因子随机区组设计,选取360生产性能相近的21周龄健康京红蛋鸡,随机分为5个组。每个组6个重复,每个重复12只鸡。试验预试期1周,正试验期8周。预试期各组均饲喂基础饲粮;试验期京红蛋鸡分别饲喂在基础饲粮上添加0、0.6%、1.2%、1.8%和3.0%Na2SO4的试验饲粮。
1.3 饲养管理
采用半开放式鸡舍3层立体笼养,每排相连的4个鸡笼(30 cm×30 cm×45 cm)作为1个重复,每笼3只鸡,各重复平均分布在上、中、下3排阶梯式笼养架上。
饲粮为干粉料,自由采食和饮水,每天08:00 和14:30各喂料1次,匀料4次;每日14:30捡蛋1次;光照时间为16 h/d、强度20 lx,室内温度为(12.5±1.5)℃,相对湿度50%~90%,纵向负压通风。每周带鸡消毒1次,每日清理鸡粪1次。
1.4 试验饲粮
基础饲粮(表1)参照NRC(1994)和《鸡饲养标准》(NY/T 33—2004),结合京红蛋鸡饲养手册配制。
1.5 指标测定及方法
1.5.1 生产性能
以重复为单位记录每天产蛋数和蛋重,每2周记录鸡的耗料量1次,计算产蛋率(laying rate,LR)、平均蛋重(average egg weight,AEW)、平均日采食量(average feed intake,ADFI)、料蛋比(the ratio of feed to egg,F/E)等生产性能指标。
1.5.2 蛋品质
第4和8周末,每重复、每次随机选取大小相近的3枚蛋,测定蛋品质。蛋壳强度(eggshell strength,ES)、蛋白高度(albumen height,AH)、蛋黄颜色(yolk color,YC)和哈氏单位(Haugh unit, HU)采用以色列ORKA公司生产的系列鸡蛋品质仪测定;蛋形指数(egg shape index,ESI)采用日本富士坪公司生产的蛋形指数仪测定。
表1 基础饲粮组成及营养水平(风干基础)Table 1 Composition and nutrient levels of the basal diet(air⁃dry basis) %
1.5.3 血液指标
1.5.3.1 血液离子含量
分别于第4和8周末,以重复为单位随机选择1只产蛋鸡,翅静脉采血2 mL,用血气分析仪(PL-2000血气分析仪)分析血液pH和钠离子(Na+)、钾离子(K+)、氯离子(Cl-)含量。
1.5.3.2 血常规
试验结束时,以重复为单位随机选择1只产蛋鸡,翅静脉采血3 mL至抗凝管。采用血细胞计数板法测定新鲜血液中白细胞(WBC)、红细包(RBC)和血小板(PLT)数量。
1.5.3.3 基本生化指标
试验结束时,以重复为单位随机选择1只产蛋鸡,颈动脉采血5 mL,抗凝管存放,3 000 r/min离心10 min制备血浆,上清液分装于1.5 mL ep⁃pendof管中,置-30℃冰箱保存待用。
用半自动生化分析仪(CHEM⁃5)测定血浆中谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、碱性磷酸酶(ALP)活性,尿酸(UA)、总蛋白(TP)、白蛋白(ALB)、肌酐(CRE)、血浆葡萄糖(GLU)、总胆红素(TB)含量。
1.5.4 组织切片
试验结束时,以重复为单位随机选择1只鸡,采集肝脏、肾脏、空肠肠道组织,置4%甲醛中固定,石蜡包埋,切片,苏木精-伊红(HE)染色,观测。组织切片制作与观测在北京吉普滕生物技术有限公司完成。
1.6 统计分析
采用SPSS15.0软件进行单因素方差分析(one⁃way ANOVA)分析,LSD和Duncan氏法进行差异显著性检验,以P<0.05为差异显著性标准,P<0.01为极显著。
2.1 生产性能
由表2可知,试验前期(第1~4周)AEW约59 g,各组差异不显著(P>0.05);后期(第5~8周)约62 g,各组未见显著差异(P>0.05);随周龄增加,AEW增重明显,每周约1 g。各组间ADFI差异不显著(P>0.05)。鸡舍温度较低,后期ADFI较前期有所增长。各组间F/E差异不显著(P>0.05),后期F/E较前期有所增长。后期,1.8%和3.0%组LR降低,与0.6%组差异显著(P<0.05)。试验结果表明,生产性能以0.6%组为最佳,3.0%组为最差。
表2 Na2SO4对京红蛋鸡生产性能的影响Table 2 Effects of Na2SO4on performance of Jinghong laying hens
图1表明,在Na2SO4剂量在0~1.8%,第5~8周京红蛋鸡产蛋率随硫酸钠剂量增加先升高后降低,呈现二次相关。第5~8周和第1~8周,1.8%和3.0%组产蛋率低于对照组。
图1 京红蛋鸡产蛋率和硫酸钠剂量的相关性Fig.1 Correlation between LR of Jinghong laying hens and sodium sulfate levels
2.2 蛋品质
由表3可知,Na2SO4对ESI和YC无显著影响(P>0.05)。第4周Na2SO4对ES、AH、HU均有显著影响(P<0.05)。0.6%组ES最佳,极显著高于其他组(P<0.01)。试验组AH、HU都显著高于对照组(P<0.05)。第8周,1.8%和3.0%组ES极显著低于其他各组(P<0.01)。试验结果表明,1.8%和3.0%组在试验后期显著降低蛋品质,有一定的积累效应。
图2表明,在Na2SO4剂量在0~1.8%间,第8周蛋壳强度呈现出随硫酸钠剂量增加先升高后降低的二次性相关。第8周,1.8%和3.0%组蛋壳强度均低于对照组。
2.3 血液指标
由表4可知,第4周各组间血液离子含量及pH差异不显著(P>0.05)。第8周,各组间血液Na+含量及pH差异不显著(P>0.05)。试验组血液K+含量显著低于对照组(P<0.05)。K+含量与Na2SO4剂量呈现出二项式关系(y=0.051x-0.428x+4.584,R2=0.914)。与对照组相比,Na2SO4有提高血液Cl-含量的趋势(P<0.10)。试验结果表明,Na2SO4能影响京红蛋鸡血液K+、Cl-含量。
表3 Na2SO4对京红蛋鸡蛋品质的影响Table 3 Effects of Na2SO4on egg quality of laying hens
由表5可知,Na2SO4对京红蛋鸡血液中的WBC数量没有显著影响(P>0.05)。与对照组相比,试验组的PLT数量都显著低于对照组(P<0.05)。各组间RBC数量差异显著(P<0.05),其中3.0%组RBC数量极显著高于对照组(P<0.01)。试验结果表明,3.0%组能够显著增加血液RBC数量,降低PLT数量。
由表6可知,Na2SO4对京红蛋鸡血浆UA、 CRE、TB含量及AKP、ALT、AST活性没有影响(P>0.05)。3.0%组血浆TP、ALB含量都低于其他各组,差异显著或极显著(P<0.05或P<0.01)。血浆GLU含量随Na2SO4添加水平的升高呈线性降低(y=-0.414x+16.49,R2=0.877,P<0.10),3.0%组与对照组相比差异极显著(P=0.006)。试验结果表明,3.0%组降低了血浆GLU、ALB、TP含量。
图2 蛋壳强度和硫酸钠添加水平的相关性Fig.2 Correlation between ES and Na2SO4supplemental levels
2.4 组织切片
由图3可知,各组间肝脏切片组织结构清晰。局部散在肝细胞内可见脂滴(轻度脂肪变),脂肪变明显部位的肝窦隙内可见少量炎细胞散在浸润。
由图4可知,对照组、0.6%、1.2%组肾脏组织结构清晰,未见异常。1.8%和3.0%组局部肾小球肿胀,肾小球间质细胞增生,肾小囊萎缩,肾间质可见散在炎细胞浸润,局部有明显的炎症。
由图5知,各组间空肠结构清晰,1.8%和3.0%组局部肠绒毛间质炎细胞浸润,其余剂量组未见异常。
上述结果表明,1.8%和3.0%组使肾脏和肠道组织出现病理性病变。
表4 Na2SO4对京红蛋鸡血液离子含量和pH的影响Table 4 Effects of Na2SO4on pH and ion concentration in blood of Jinghong laying hens
表5 Na2SO4对京红蛋鸡血常规的影响Table 5 Effects of Na2SO4on blood routine of Jinghong laying hens
表6 Na2SO4对京红蛋鸡血液生化指标的影响Table 6 Effects of Na2SO4on blood biochemical index of Jinghong laying hens
续表6
图3 肝脏病理切片Fig.3 The pathological sections of liver
3.1 Na2SO4对京红蛋鸡生产性能和蛋品质的影响
本试验表明,Na2SO4对前期和全期(第1~8周)京红蛋鸡生产性能没有显著影响。后期1.8% 和3.0%组LR差异显著降低。研究表明高Na+饲粮会显著降低LR[6],可能是由于Na2SO4改变DCAB,影响了京红蛋鸡血液离子平衡,从而影响京红蛋鸡生产性能[5]。
本研究表明,1.8%和3.0%组在第8周显著降低ES。血液Cl-的含量会影响钙离子(Ca2+)的代谢,高Cl-含量会抑制Ca2+的分泌,是影响蛋壳质量的重要因素[7]。推断,高Na饲粮有提高京红蛋鸡血液Cl-含量的趋势(表4),降低蛋壳腺Ca2+分泌,从而降低ES。研究表明,改变饲粮中Na+与Cl-的比例、DCAB,会影响ES[8]。本试验中,饲粮Na+过高会降低蛋壳强度。
综上,高剂量的Na2SO4对生产性能的不良影响,始于试验后期,可能具有累积效应;生产性能及蛋品质0.6%组为最佳,3.0%组为最差。
3.2 Na2SO4对京红蛋鸡血液指标的影响
饲粮K+、Na+、Cl-含量相互影响,3种离子最佳含量不能被独立确定,京红蛋鸡饲粮Na+含量改变会影响血液K+、Cl-含量[9]。RBC是血液中数量最多的一种血细胞,是动物体内通过血液运送氧气最主要的媒介,还具有免疫功能。本试验中,1.8%和3.0%组京红蛋鸡血液RBC数量急剧升高,可能是高Na2SO4摄入加快体内代谢,需要更多的RBC进行转运。PLT在体内主要参与止血与血栓形成,生理功能非常重要[10]。Na2SO4减少了血液PLT含量,影响京红蛋鸡凝血,危害其健康。血浆AST、ALT的活性被广泛用于判断动物肝脏健康状况[11],本试验中,各组间血浆AST、ALT活性差异不显著,表明Na2SO4未影响京红蛋鸡肝脏健康。血浆ALB含量也是反映肝功的重要指标之一[12],但本试验中3.0%组血浆ALB含量显著降低。非肝原因的低蛋白血症由肾病综合征造成[12],这与肾脏组织切片结果相互印证,且高Na+饲粮会损害肾脏、降低肾功能[13]。饲粮阴阳离子平衡(DCAB)过高、血浆ALB含量降低也会引起TP含量的降低。本试验可看出,3.0%组血浆GLU含量显著降低,可能是由于Na2SO4促进机体代谢,降低了血浆GLU含量。而血浆GLU含量降低会损害大脑,引起脑功能改变,影响机体健康。
图4 肾脏病理切片Fig.4 The pathological sections of kidney
图5 空肠病理切片Fig.5 The pathological sections of jejunum
综上,1.8%和3.0%组显著影响京红蛋鸡血液指标,致使其健康状况发生改变;1.2%组没有显著影响京红蛋鸡血液指标,不影响京红蛋鸡健康。
3.3 Na2SO4对京红蛋鸡肝脏、肾脏及肠道组织的影响
通过肝脏切片观察,各组间京红蛋鸡肝脏健康状况相同,都有轻微的炎症。肾脏切片观察,1.8%和3.0%组肾脏组织出现炎症。研究表明高Na+饲粮会损害肾脏,降低肾功能[13]。因Na2SO4易溶于水又不易被肠壁吸收,对肠黏膜产生机械性刺激,引起肠蠕动和排便反射。所以高剂量的Na2SO4(超过1%)一般用于治疗大肠便秘。推断由于长期食用高剂量Na2SO4饲粮,长期刺激肠道及肠黏膜。因此使损伤肠道组织,使其出现炎症。
结合血液生化指标结果,得出过高的Na+摄入,会加重肾负担,使肾小球水肿;损害肠道健康,致使肠道组织出现炎症。
综上,饲粮添加Na2SO4达到或超过1.8%,可能会超出京红蛋鸡耐受能力范围,导致其健康受损,1.2%组则没有显著影响京红蛋鸡的健康生长与生产。
饲粮添加Na2SO4,1.8%和3.0%组降低试验后期LR和蛋壳质量;影响京红蛋鸡部分血常规和血液生化指标;致使京红蛋鸡肾小球肿大,肠道出现炎症。因此,京红蛋鸡对Na2SO4的耐受剂量为不影响其健康生长及生产的1.2%。
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Study on the Tolerance of Jinghong Laying Hens to Dietary Sodium Sulfate
WEI Shumin YUE Hongyuan WU Shugeng
∗
ZHANG Haijun WANG Jing QI Guanghai
∗
(责任编辑 陈 燕)
(Key Laboratory of Feed Biotechnology of Ministry of Agricultural,Feed Research Insitute,Chinese Academy of Agricultural Science,Beijing 100081,China)
∗Corresponding authors:WU Shugeng,associate professor,E⁃mail:wushugeng@caas.cn;QI Guanghai,professor,E⁃mail:Guanghai_qi@163.com
Abstract:The current study was conducted with the aim to explore the tolerant dosage of dietary Na2SO4in laying hens.Three hundred and sixty 21⁃week⁃age Jinghong laying hens were randomly assigned to 5 groups and were fed based diet with 0(control),0.6%,1.2%,1.8%,3.0%Na2SO4for 8 weeks,respectively.Each group consisted of 6 replicates per group and 12 hens per replicate.The pre⁃test lasted for 1 week,and the test lasted for 8 weeks.The results showed as follows:in the later stage(from 5 to 8 week),layers fed 1.8%or 3.0%Na2SO4diet had significantly increased ratio of feed to egg compared with those fed 0.6% Na2SO4(P<0.05).On week 4 of experiment,dietary 0.6%Na2SO4significantly increased the eggshell strength,albumen height and Haugh unit than other groups(P<0.01).On week 8 of experiment,layers in 1.8%,3.0%Na2SO4group had significantly decreased eggshell strength(P<0.01).Dietary Na2SO4markedly reduced the content of K+in blood(P<0.05),and partially increased the content of Cl-in blood(P<0.10)on week 8 of experiment.Compare with the control group,3.0%Na2SO4group significantly increased the count of red blood cell.The concentration of blood total protein,albumin,glucose were significantly decreased by the supplementation of 3.0%Na2SO4(P<0.05).The morphology assay of different organs showed that lay⁃ers fed 1.8%or 3.0%Na2SO4diet had glomerular atrophy,inflammatory cells immersed in villous stroma of kidney and in intestine.In conclusion,it is damaged to health,growth and production of hens when diet adding with 1.8%Na2SO4,so the tolerant dose of the Na2SO4to Jinghong laying hens can be recommended as 1.2% in diet.[Chinese Journal of Animal Nutrition,2015,27(8):2493⁃2501]
Key words:Na2SO4;laying hens;tolerance
通信作者:∗武书庚,副研究员,硕士生导师,E⁃mail:wushugeng@caas.cn;齐广海,研究员,博士生导师,E⁃mail:Guanghai_qi@163.com
作者简介:卫舒敏(1988—),女,山西运城人,硕士研究生,动物营养与饲料科学专业。E⁃mail:weishuminwin@sina.com
基金项目:现代农业产业技术体系(CARS⁃41⁃K13);家禽产业技术体系北京市创新团队(CARS⁃PSTP);国家科技支撑计划(2011BAD26B03)
收稿日期:2015-03-12
doi:10.3969/j.issn.1006⁃267x.2015.08.022
文章编号:1006⁃267X(2015)08⁃2493⁃09
文献标识码:A
中图分类号:S831.1