罕见的B(A)亚型基因鉴定分析1例

·病例报道·

罕见的B(A)亚型基因鉴定分析1例*

**通信作者 E-mail:zengxiaojing@medmail.com.cn

网络出版时间：2015-10-13网络出版地址：http://www.cnki.net/kcms/detail/52.5012.R.20151013.1256.032.html

祝丽丽1， 杨芳2， 曾小菁1**

(1.贵州医科大学附院 输血科, 贵州 贵阳550004； 2.贵州医科大学 检验学院， 贵州 贵阳550004)

[关键词]B(A)亚型； ABO血型； 序列分析； 基因

[基金项目]*贵州省科技厅

[中图分类号]R446.6[文献标识码] B

ABO亚型是导致血型鉴定正反定型不符、血型误判及配血不合的主要原因,是正常ABO抗原以外的抗原性较弱的亚型或变异型，如A2、A3、Ax、Ael、B2、B3、和CisAB等，多由糖基转移酶基因的突变或单碱基缺失导致A或B抗原表达减弱。B(A)亚型是ABO血型系统中比较罕见的ABO亚型[1-2]。笔者工作中遇见经血型、血清学及分子生物学方法鉴定为B(A)亚型血型病例1例，报道如下。

1临床资料

患者，男性，42岁，既往体健，因股骨颈骨折入院。查体：温度36.5 ℃，血压90/60 mmHg，无颈静脉怒张，双肺呼吸音清，未闻及干湿啰音，心率100次/min，肝肋下未及，双下肢无水肿。心电图正常，凝血功能正常，拟行股骨颈修复手术，进行术前备血检查，发现血型正反定型不一致，导致手术备血困难；随后利用人源血清和病人红细胞及H抗原再次鉴定其血型，提取受检测人血中白细胞DNA，设计B(A)01、B(A)02、 B(A)03、 B(A)04、B(A)05亚型、O型和及B型特异性引物，进行聚合酶链式反应(PCR)，采用1.5%琼脂糖凝胶电泳，进一步鉴定该患者的基因型。

2结果

2.1　ABO正反定型

ABO血型鉴定发现患者血型正反定型不符合，疑似AB型，但仅正定型符合，而反定型B抗原

一二次离心鉴定结果均为阴性。见表1。

2．2　人源血清和病人红细胞再次鉴定

采用抗-A、抗-B人源血清与病人红细胞进行鉴定，推测此例标本为ABO亚型。见表2。

表1　ABO血型鉴定结果

表2　人源抗-A、抗-B血清与病人红细胞反应

2.3　H抗原鉴定

抗-H抗体与病人红细胞反应呈3+，与O型细胞反应呈3+，B型细胞反应呈1+，参照《ABO亚型对照表》，高度怀疑为B(A)亚型。

2.4　PCR结果

PCR结果显示，在第5、7及8泳道出现目的条带，说明该患者的基因型为B(A)04/0 ，见图1。

注：1为mark，2为B(A)01,3为B(A)02,4为B(A)03， 5为B(A)04,6为B(A)05，7为B(A)04,8为O，9为B 图1　B(A)04基因型PCR扩增产物电泳结果 Fig.1　Electrophoresis chart of PCR amplification products of B(A)04 genotype

3讨论

B(A)是罕见的AB0亚型，其表现型于1985年被发现[3]。B(A)是遗传学上的B型，其红细胞膜上有少量A抗原和基本正常的B抗原。其H抗原含量较为丰富，几乎与O型细胞上的含量持平。B(A)血清中含有的抗-A抗体,可以跟A1细胞、部分A2细胞发生凝聚反应，导致红细胞抗原表型为AB型(A抗原较弱)，且血清中同时含有抗-A抗体[4]。文献报道，B(A)亚型是B基因上的碱基发生突变,导致B基因产生变异，改变了部分功能活性酶的活性及效力[2]。所以，红细胞膜血清学正定型除了有正常的B抗原以外,还会发现有少量A抗原，因而表现为红细胞膜上H抗原增多[5]。本病例的血型经人源血清和病人红细胞和H抗原再次鉴定高度怀疑为B(A)亚型，最后利用PCR方法鉴定该病例血型为B(A)04/O基因型，即为一个正常的O基因和一个发生突变的B基因组成，因此血清学除表现B特异性，还表现少许A特异性，血清学表现为AB血型。AB型血的人与O型的人不可能生出AB型子代，但这种罕见的B(A)型与O型人，却能生出血清表现为AB型的子代，检测时需高度注意，条件允许的情况下，最好开展家系调查。本病例ABO亚型为B(A)04/O,与李慧敏等[6]报道的B(A)亚型中绝大多数基因型为B(A)/O血型一致，目前国内还报道了B(A)/A1型[7]， B/B纯合型也有见到报道[2]。但四川地区报道最多的是B(A)02/O等位基因[8]，与此次报

道的04型有所差别。该类病人输血时多采用O型或B型洗涤红细胞进行输血治疗。在输血血清学实验中要求严格正反定型，必要时借助对亚型分型更准确的基因分型检测法分析红细胞亚型，使血清学亚型实验结果得到基因学准确验证，确保结果真实可靠。临床中遇到的疑难血型鉴定时，在非急诊的情况下，可以用更准确的分子生物学技术来解决输血治疗问题。

4参考文献

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(2015-08-25收稿，2015-09-30修回)

编辑： 吴昌学