慢性乙型肝炎病毒感染者基因型分布及与HBV M关系的初步探讨

高海彦，张会玲，王文斌，杨 杨，李艳萍

（1.武威市凉州医院，甘肃 武威 733000；2.武威市中心血站，甘肃 武威 733000）

慢性乙型肝炎病毒感染者基因型分布及与HBV M关系的初步探讨

高海彦1，张会玲1，王文斌1，杨 杨2，李艳萍1

（1.武威市凉州医院，甘肃 武威 733000；2.武威市中心血站，甘肃 武威 733000）

目的 探讨慢性乙型肝炎病毒（HBV）感染者基因型分布及与乙型肝炎病毒血清标志物（HBV M）的相互关系。方法采用特异性引物聚合酶链反应PCR（FQ-PCR）法，检测3 400例乙型肝炎患者HBV-DNA，并对1 380例病毒复制大于103copies/ul者，进行ALT、AST、HBV M、HBV基因型检测。结果 1 380份血清中共检出C型1 108例（80.3%），主要分布于乙型肝炎后肝硬化（LC）和原发性肝癌（HCC）患者中；B型247例（17.9%），主要分布于乙型肝炎病毒携带者（ASC）中；B+C混合型25例（1.8%）。不同HBV基因型在HBV-DNA载量、HBeAg、HBeAb上存在显著性差异，ALT、AST比较无显著性差异。结论 武威地区HBV基因型主要以C型为主，C型HBV-DNA、HBeAg阳性率显著高于B型，且与较严重的肝脏损伤有关，是影响疾病进程的重要因素。

慢性乙型肝炎；基因型；乙型肝炎病毒

乙型肝炎病毒（HBV）感染是一个全球公共卫生问题。目前全球大约有4亿HBV感染者，几乎1/3的人曾感染过HBV，这在发展中国家尤为突出。仅我国就有1.5亿HBV感染者，其中2 000万人为慢性乙型肝炎患者，每年因此导致大约50万人死亡。肝细胞癌（HC）在癌症死亡原因中已跃升为第四位，而HBV感染为其主要病因，根据HBV全基因组序列异质性≥8%S基因序列异质性≥4%，将HBV分为A～H8种基因型[1]，不同HBV基因型感染者的临床表现均有差别。本研究旨在了解本地区HBV感染者基因型分布及与乙型肝炎病毒血清标志物（HBV M）、肝脏疾病的关系。

1 材料和方法

1.1 标本来源

选取我院2009—2012年武威籍门诊或住院患者，共3 400例，应用特异性引物聚合酶链反应（PCR）法进行血清HBV-DNA定量检测。选取HBV-DNA大于103copies/ul者1 380例，应用PCR法进行血清基因型检测及HBV M、ALT、AST检测。1 380例患者中乙型肝炎病毒携带者（ASC）300例，慢性乙型肝炎（CHB）488例，乙型肝炎后肝硬化（LC）380例和原发性肝癌（HCC）212例。其中男性705例，女性675例，年龄11～75岁，平均（39.0±2.1）岁，排除其他肝炎病毒导致肝脏病变的疾病。诊断均符合2000年修订的《病毒性肝炎防治方案》。

1.2 仪器和试剂

HBV-DNA测定使用ABI公司的DE-7500荧光定量PCR仪；HBV基因型测定使用美国PE公司生产的基因扩增仪PE9600型；试剂、引物及探针均由上海科华生物工程股份有限公司提供；HBV M检测使用上海荣盛公司生产的试剂；ALT、AST检测使用日立7600-020，试剂由宁波瑞源公司提供。所有操作均按试剂说明书进行。

1.3 统计学处理

使用SPSS 14.0软件进行χ2检验，P＜0.05为有显著性差异。

2 结果

2.1 基因型分布状况

在1 380例HBV感染者中，检出C型1 108例（80.3%），B型247例（17.9%），B+C混合型25例（1.8%），未检出其他型。

2.2 HBV基因型与临床表型的关系

不同临床表型HBV感染者的基因型分布见表1。B和C基因型在不同临床表型中分布差异有显著性（P＜0.01），且随ASC、CHB、LC和HCC病情加重，C基因型的分布逐渐增加，B基因型的分布逐渐下降。在原发性肝癌患者中未检出B+C混合型基因。

表1 不同临床表型HBV感染者的基因型分布[n（%）]

2.3 HBV基因型与HBV-DNA载量、HBeAg、HBeAb、ALT、AST的关系

C型HBV-DNA载量显著高于B型（P＜0.01），HBeAg阳性率显著高于B型；B型HBeAb阳性率显著高于C型；二者ALT、AST虽无显著性差异（P＞0.05），但C型仍高于B型（见表2）。

表2 HBV基因型与HBV-DNA载量、HBeAg、HBeAb、ALT、AST的关系(±s)

表2 HBV基因型与HBV-DNA载量、HBeAg、HBeAb、ALT、AST的关系(±s)

HBV-DNAHBeAgHBeAb基因型 （log值)阳性[n（%）]阳性[n（%）] ALT(u/L) AST(u/L) C型6.98±2.38739（66.7）369（33.3）158±89112±72 B型5.34±1.97151（61.1）89（36.0）147±92102±82 B+C型6.85±1.8714（56.0）11（44.0）151±65107±75

3 讨论

（1）不同地区人群感染HBV的基因型构成存在差异[2]。国外一些资料显示：基因型A、D主要分布在美国和欧洲，基因型B、C主要分布在东亚及东南亚，E型多分布在非洲，F型多分布在南美洲，G型仅在法国与美国有单个病例报道，这种地域分布在一定程度上反映了HBV的起源和传播[3、4]。国内也有资料显示：我国HBV基因型以B、C为主，南方主要是B型，北方主要是C型[5、6]。本研究表明武威地区HBV基因型以C型为主，占80.3%，符合武威地处于我国北方的地理特点，反映了病毒变异后进化的结果。

（2）本研究显示，随着ASC、CHB、LC和HCC疾病程度的加重，C基因型的分布逐渐增加，B基因型的分布逐渐下降；C型HBV-DNA载量显著高于B型；C型HBeAg阳性率显著高于B型；B型HBeAb阳性率显著高于C型。表明：①C型具有较强的致病性，易引起较严重的肝损伤，发展为肝硬化和肝癌的可能性更大。②不同基因型HBV的复制能力、毒力及致病性的强弱不同。③C型HBV复制活跃，易形成持续病毒血症，不易发生e抗原系统血清转换。这与Kao报道的C基因型HBV感染更易发展为肝硬化和肝癌及HBV基因前C区nt1896G→A突变主要见于B基因型相一致[7]。国内也有许多关于C基因型感染对肝脏损伤程度严重的报道。

（3）Zumbika[8]研究发现，B+C混合型在重度慢性乙型肝炎和肝硬化中占有相当大的比例，认为混合型可能和严重的肝脏疾病相关，本研究检测到的B+C混合型都在无症状携带者、慢性肝炎患者中，表明同型基因型在不同地域其致病能力不同。是否将来更容易发展为肝硬化、肝癌有待进一步研究。

综上所述，武威地区乙型肝炎病毒基因型主要以C型为主，C型病毒载量及致病性更强，与较严重的肝脏损伤有关。B+C混合型与严重的肝脏损伤是否相关，有待进一步访研究证实。

[1]殷继明.慢性乙型肝炎患者HBV基因型和亚型分布调查[J].实用肝病杂志，2010，13（1）：19-22.

[2]Kidd Liunggren K，Miyakawa Y，Kidd A H.Genetic variability in hepatitis[J].J Gen Virol，2002（83）：1267-1280.

[3]Yuen M F，Sablon E.Epidemiological study of hepatitis B virus genotypes，core promoter and precore mutations of chronic hepatitis B infection in Hong Kong[J].Hepatololog，2004（41）：119.

[4]Jazayeri M S.Hepatitis B virus genotypes core gene vaiability and ethnicity in the Pacific region[J].J Hepatol，2004（41）：139.

[5]夏国良.乙型肝炎病毒基因型和血清亚型在我国部分地区的分布及其特点[J].中华流行病学杂志，2001，22（5）：348-351.

[6]雷延昌.慢性乙型肝炎病毒基因型与拉米夫定疗效关系的研究[J].中西医结合肝病杂志，2005，13（2）：109-112.

[7]Kao J H.Genotypes and clinicalphenotypes of hepatitisB virus in patients with chronic hepatitisB virus infection[J].J Clin Microbiol，2002，40（4）：1207-1209.

[8]Zumbika E.Hepatitis B virus genotype characterizationg and distribution in patients with HBV related liver diseases in Zhejiang Province，P.R. China：possible association of coinfection with disease prevalence and severity[J].J Hepatobiliary Pancreat Dis Int，2005，34（4）：535-543.

R512.6+2

B

1671-1246（2015）07-0142-02