犬乳腺肿瘤病理学观察与分析

夏新萌，刘承军，李海，车晓囡

（1.聊城市动物疫病与控制中心，山东聊城 252000；2.聊城市动物医院）

犬乳腺肿瘤病理学观察与分析

夏新萌1，刘承军2*，李海1，车晓囡2

（1.聊城市动物疫病与控制中心，山东聊城 252000；2.聊城市动物医院）

通过利用石蜡切片制作技术、HE染色技术及显微摄影技术，结合临床资料，对犬乳腺肿瘤进行病例分析，以期能够鉴别诊断犬的良性和恶性乳腺肿瘤。将收集到的10个具有典型病理变化乳腺肿瘤组织制作成病理切片，用HE染液进行染色，并利用光学显微镜进行观察。结合临床资料，对犬乳腺肿瘤进行病例分析，并对犬乳腺肿瘤病例的基本信息进行归纳，发现平均患病年龄为8.5岁老犬，然后对术后切除的肿瘤进行了病理基本的鉴别诊断，发现恶性肿瘤6例，并对所制作乳腺肿瘤切片中具有典型病理变化的切片作了细致的观察和分类描述。

犬；HE染色；组织病理学；手术切除

乳腺肿瘤是母犬发病率最高肿瘤性疾病，约占全部肿瘤性疾病的25%～42%，其中约50%肿瘤是恶性的。恶性肿瘤在母犬乳腺肿瘤疾病中的很大比重使得患犬的健康受到严重威胁，因此需要引起临床医生和动物主人的重视。笔者通过诊断治疗的10例患有肿瘤性疾病的典型病例，经病理学观察，对肿瘤特性及其发病原因进行了分析研究，为临床诊断治疗提供参考。

1 材料和方法

1.1 病例

2014年6月至2014年12月期间，确诊的患有典型的乳腺肿瘤母犬10只，年龄4～14岁，平均年龄8.5岁。

1.2 器材与试剂

手动切片机（英国Shandon）；自动烘片机（英国Shandon）；恒温展片机（英国Shandon）；微波炉（LG公司）；数码显微镜（Olympus公司）；10%中性福尔马林；70%酒精；80%酒精；85%酒精；95%酒精；100%酒精；二甲苯I；二甲苯II；石蜡；蒸馏水；1%盐酸酒精；苏木素染液；1%伊红染液；中性树胶。

1.3 方法

1.3.1 临床诊断。对患犬进行临床诊断。除了常规检查外，对每个乳腺和乳头、腹股沟淋巴结、腋窝淋巴结区域，及腹部都应该进行深入的触诊。在病史中，不明原因的跛行、疼痛、神经症状、呼吸道症状、其它细微的临床症状或者体格检查都是肿瘤疾病的体现（见图1）。

图1 乳腺肿瘤外观观察

1.3.2 手术。初步确定为乳腺肿瘤患犬后，与畜主协商同意实施乳腺肿瘤摘除手术。

1.3.2.1 术前准备。手术当天禁食禁水，术前20min注射阿托品及止血敏，术前15min麻醉。术前5 min，术部剃毛清洗消毒（见图2）。术部用10mL/L普鲁卡因约10mL实施局部浸润麻醉。

图2 将破溃的瘤体包扎好

1.3.2.2 实施手术。选择血管分布稀疏的皮肤组织，沿肿瘤基部用镊子夹起皮肤切至所需大小，可做环形切口，注意止血。然后逐步钝性分离，直至暴露整个瘤体，并结扎肿瘤蒂部的供血动静脉血管。然后完整切除肿瘤（见图3、图4），最后对皮肤进行结扎缝合。闭合皮肤前撒布氨苄青霉素，并确认伤口里毛细血管没有出血后进行缝合，整理皮肤，最后一针安排在身体下方，留适当长度作为引流口。伤口处再次消毒，涂上碘酊。

图3 手术切除肿瘤

图4 摘除的乳腺肿瘤

1.3.3 分别对肿瘤组织病理进行切片观察。将手术摘除的肿瘤组织切割成大小约1mm3的组织块；采取的组织块立即投入10%中性福尔马林固定，制作成石蜡切片，然后在显微镜下观察，进行病理组织学诊断。

2 结果与分析

2.1 病理组织学观察

病理学观察分别如下：肿瘤的组织结构具有多形性，有腺上皮细胞构成的腺管，肌上皮细胞形成的瘤细胞团块或条索，还可有分化成熟的鳞状上皮，间质中常见软骨粘液样区和骨化区，上皮与间质分界不清（见图5、6）。泌乳型腺瘤由密集的、具有妊娠期、哺乳期明显分泌状态的腺泡组成的腺瘤。腺泡腔扩张，内衬上皮细胞胞浆呈空泡状外突，腺泡间质极少（见图7）。腺管上皮因受挤压而成扁平状（见图8）。切面常呈分叶状，光镜下可以是管型或围管型腺纤维瘤的图像，肿瘤间质细胞有时较丰富，上皮细胞也可增生（见图9、10）。乳腺导管上皮增生，形成多个有纤维血管束的乳头状结构，乳头可互相连接成腺样或网状（见图7）。乳头状癌乳头中部常见纤维血管束，表面被覆单层或多层异型上皮细胞，极其紊乱，肌上皮消失，常见核分裂（见图11、12）。鳞状细胞癌组织绝大部分为典型鳞状细胞癌结构，可见细胞简桥或角化（见图13、14）。

图5 良性混合瘤（HE×200）

图6 混合瘤－上皮与间质分界不清（HE×200）

图7 泌乳型腺瘤－肿瘤由泌乳腺泡构成（HE×200）

图8 分叶型腺纤维瘤（HE×200）

图9 围管型腺纤维瘤（HE×200）

图10 腺纤维瘤－间质细胞较丰富，偶见核分裂象

图11 导管内乳头状瘤（HE×200）

图12 乳头状癌癌组织局限于囊腔内（HE×200）

图13 鳞状细胞癌可见多处角化珠（HE×200）

图14 鳞状细胞癌癌细胞呈浸润性生长（HE×200）

2.2 所收集的肿瘤病例组织病理学分类

根据WHO（世界卫生组织）对肿瘤的分类标准可以将犬乳腺肿瘤分为以下几类：良性混合瘤、基底细胞瘤、腺瘤、纤维腺瘤、导管内乳头状瘤、腺管乳头状癌、浸润性导管癌、梭形细胞癌、骨肉瘤及肉瘤样癌等。其中良性混合瘤、基底细胞瘤、腺瘤、纤维腺瘤、导管内乳头状瘤为良性肿瘤；腺管乳头状癌、浸润性导管癌、梭形细胞癌、骨肉瘤及肉瘤样癌为恶性肿瘤。本试验中良性肿瘤占40%(4/10)，可通过手术摘除术进行治愈；恶性肿瘤占60%(6/10)，可能发生转移或侵袭。

表1 结果统计

预后：良性病例无死亡。恶性病例死亡5例，死亡率83.33%。

3 讨论

根据犬乳腺组织的病理学特性，10例典型病例中有4例良性肿瘤。犬的良性乳腺肿瘤常为复合瘤或混合瘤。由于乳腺被覆上皮细胞在组织发生学过程中可能转化为软骨或骨成分，导致异常的组织学表现，肿瘤组织或正常乳腺组织中出现骨细胞或软骨细胞，这是犬乳腺肿瘤的特征性变化之一。6例恶性肿瘤病例中以实体癌发病率最高，肿瘤常常通过淋巴以及血液通道进行扩散。组织学显示：肿瘤上皮细胞可能浸润到各种组织，包括扩散到骨组织的小叶肿瘤。在组织病理学检查时，由于犬乳腺癌组织的分化程度的差别，所观察的犬乳腺癌病例几乎都有一种以上的癌巢结构特征。同一组织病理学标本上常同时出现髓样癌、乳头状腺癌、管状腺癌等结构特征，并常有坏死、出血等继发性改变。从切面上看，犬乳腺癌大多数不见完整包膜，而向周围组织侵袭性生长，有时可区别出白色、灰白色或奶油色的弥漫性或结节性腺样组织和致密的结缔组织间质，也常见内含黄褐色浆液状或胶样分泌物的囊泡和出血坏死区。犬乳腺肿瘤最常转移到肺部和患部的淋巴结，但是也能转移到其它任何器官，包括骨、脑、肝、脾、肾以及皮肤。这些转移的部位表明，血液循环和淋巴循环都能扩散这种疾病。

从患犬的发病年龄上看：5岁之前的狗，乳腺肿瘤很少发生。之后随着年龄的增长发病率有所增加。笔者通过多年的临床经验发现，犬乳腺肿瘤多发在10～11岁之间。在本实验选择的10例典型病例中，良性肿瘤患犬的平均年龄为8.5岁，恶性肿瘤患犬的年龄为10岁，较资料数据有些提前，可能是病例量较小造成的，不过与饮食以及环境也不无相关。

孕酮激素的使用、动物发情期的增加或延长、假孕以及怀孕期的乳腺的变化等均与犬乳腺肿瘤的早期发生有关。99.5%的乳腺肿瘤发生于母犬，其中80%以上的发生在未去势母犬。据统计，在第一次发情前做了绝育手术的犬，发生乳腺肿瘤的危险率为0.5%，但在第一次及第二次发情以后阉割的母犬，发生乳腺肿瘤的危险率分别上升至8%和26%，2岁半或4个发情周期以后阉割的母犬，则无抑制肿瘤发生的作用。所以，预防犬乳腺肿瘤的最好办法就是在犬性成熟前摘除卵巢。

犬乳腺肿瘤是犬常见的肿瘤性疾病，其病因、组织学特性、药物及手术治疗等都与人类乳腺肿瘤较为相似，乳腺肿瘤严重威胁着人类和犬类的健康，是犬的一种恶性肿瘤性疾病。常见的犬乳腺肿瘤类型是乳腺浸润性导管癌、良性混合瘤和乳腺软骨化化生性癌。浸润性乳腺癌在人类乳腺癌和犬类的乳腺癌中都是一种自然发生的预后最为不良的一种乳腺癌类型，被认为是恶性程度极高、临床病程复杂、存活率极低。本文中，浸润性导管癌病例占全部病例的很大比重，其术后死亡率也较良性肿瘤有所降低。母犬经常表现为复杂的肿瘤结节，只有部分母犬的肿瘤结节是单一性的。有些肿瘤可能在最近才发现，而有些已经存在了很长时间，乳腺摘除是治疗乳腺癌的一种行之有效的方法。因此，兽医临床诊疗中建议宠物主人定期带自己的爱宠进行常规体格检查，及早发现肿瘤进行早期治疗为宜。

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2015-01-20）