饲料中黄曲霉毒素危害及常见检测方法

2015-12-26 10:07张富刚孙书刚李建伟陈国信苏瑞
畜牧兽医科技信息 2015年9期
关键词:黄曲霉色谱法毒素

张富刚,孙书刚,李建伟,陈国信,苏瑞

(河北省沧州青县农业局,河北沧州 062650)

饲料中黄曲霉毒素危害及常见检测方法

张富刚,孙书刚,李建伟,陈国信,苏瑞

(河北省沧州青县农业局,河北沧州 062650)

黄曲霉毒素主要是由黄曲霉、寄生曲霉产生的次生代谢产物,是目前发现的毒性、致癌性较强的天然有毒物。本文主要从黄曲霉毒素的化学性质、对畜、禽的危害、以及常见检测方法进行了阐述。

黄曲霉毒素;饲料;危害;检测方法

黄曲霉毒素是一种毒性非常强的物质,它能够破坏人及动物的肝脏组织,严重时可导致肝癌甚至死亡。黄曲霉毒素主要是由黄曲霉、寄生曲霉产生的次生代谢产物,是目前发现的毒性、致癌性较强的天然有毒物。随着人们生活水平的提高,黄曲霉毒素的危害也逐渐引起老百姓的关注。专家、学者对黄曲霉毒素的研究也越来越深入,本文从黄曲霉毒素的来源、化学性质、对畜禽的危害以及检测方法四方面进行了阐述。

1 黄曲霉毒素的主要来源

黄曲霉毒素是由黄曲霉、寄生曲霉等霉菌产生的代谢产物。如果粮食未能及时晒干或存储不当,则较易被黄曲霉污染,产生黄曲霉毒素。黄曲霉毒素最易污染玉米、花生等制品,其次是小麦、高粱,豆粕较不易被黄曲霉污染。

2 黄曲霉毒素的化学结构及理化性质

黄曲霉毒素,英文缩写AFT,分子式为C17H12O6,是一类毒性非常强的二氢呋喃香豆素衍生物,能够溶于很多种有机溶剂,但不溶于正己烷、石油醚、乙醚,微溶于水。黄曲霉毒素化学结构稳定,加热至268~269℃时,才会发生分子结构的变化。

黄曲霉毒素化学结构式

目前,黄曲霉毒素已经发现并确定的有20余种,饲料遭受黄曲霉毒素污染后,检测可见黄曲霉毒素B1、B2、G1和G2四种。其中两种黄曲霉毒素B1、B2被饲喂家禽和家畜后,经过生理代谢转化,转变成的黄曲霉毒素M1和M2主要从尿液和乳汁中排出,也有部分残留在畜、禽肉中。在受黄曲霉毒素污染的饲料中,以黄曲霉毒素B1的毒性最大,同时其含量也最多,故将黄曲霉毒素B1作为饲料质量监管中黄曲霉毒素项目的主要监测指标。

3 黄曲霉毒素对畜、禽的危害

饲喂畜、禽含有黄曲霉毒素的饲料后,常见畜、禽的采食量减少但体重增加,其对动物的危害程度与饲喂畜、禽的品种、日龄、接触黄曲霉毒素的剂量、时间长短密切相关。黄曲酶毒素能够在畜、禽体内蓄积,长期摄入会产生严重的影响。有学者给1d肉鸡饲喂黄曲霉毒素含量为0.75mg/kg的日粮,28d后发现其体重增加但采食量明显下降。同时,肉鸡饲喂黄曲霉毒素含量为1mg/kg的日粮,7d后,肉鸡生长未发现显著变化,21d后,肉鸡体重增加但采食量明显下降。猪对黄曲霉毒素非常敏感。当饲喂黄曲霉毒素含量为20~200mg/t的饲料时,猪的采食量明显下降,生产性能降低。当饲喂黄曲霉毒素含量为1000~5000mg/t,会发生黄曲霉毒素严重中毒,产生包括呼吸在内的严重影响,有研究显示,当饲料中黄曲霉毒素含量为2.0mg/kg时,猪体重减少到29.7kg,而对照组为33.7kg。黄曲霉毒素可以透过胎盘屏障转移到胎儿,引起胎儿畸形,导致产仔数减少、死胎等。个别母畜饲喂黄曲霉毒素饲料会引起急性中毒发生流产。就反刍动物方面,饲喂奶牛的饲料中黄曲霉毒素的含量要非常低,这是因为黄曲霉毒素不仅会降低奶牛的生产性能和体质,还会经过奶牛的生理代谢,使牛奶中产生代谢产物黄曲霉毒素M1,威胁人体健康。肉牛采食黄曲霉毒素污染严重的饲料,会使其生长速度下降,同时使成年牛得肝脏受损。

4 黄曲酶毒素的检测

检测黄曲霉毒素的方法有很多种,有薄层色谱法、高效液相色谱法、酶联免疫法等。

4.1 薄层色谱法

薄层色谱法常用于半定量测定黄曲霉毒素实验。由于黄曲霉毒素具有荧光性,将样品经过提取、浓缩后,采用单向或双向展开法,使其在薄层板上分离,设置波长365nm的紫外光照射,会产生蓝紫色荧光,据此定量。薄层色谱法操作简单易行、仪器试剂来源方便,但是由于样品中可能含有其他荧光物质的干扰会造成测定误差。

4.2 高效液相色谱法

高效液相色谱法可以分离分析各种黄曲霉毒素,该此方法具有灵敏度高、分离能力强、特异性好、测定结果准确可靠等优点。目前己广泛地用于黄曲霉毒素的测定。高效液相色谱法虽然具有快速、灵敏度高、准确、自动化等优点,但仪器价格较贵、操作繁琐,难以在基层推广。

4.3 酶联免疫法

酶联免疫法是检测黄曲霉毒素最常用的方法,它具有检测灵敏、操作简单、耗时较短、测定结果较为准确的优点,常用于半定量实验。通常黄曲霉毒素酶联免疫试剂盒采用固相直接竞争性酶联免疫原理。即微孔中包被对黄曲霉毒素具有高亲和力的抗体,黄曲霉毒素酶标物与标准品或样品中的黄曲霉毒素竞争结合微孔中包被的抗体。孵育一定的时间后,倾倒微空中的液体,并进行洗涤。加入底物,溶液变为蓝色,加入酸性终止液,溶液变为黄色。使用酶标仪在450nm下检测OD值。根据试剂盒中标准品的OD值、样品OD值来计算含量。

5 小结

随着人们对食品安全的认识逐渐提高,食品中黄曲霉毒素的危害已广泛被大家接受,而饲料是否含有黄曲霉毒素在一定程度上直接影响了食品的安全。饲料一旦遭到黄曲霉毒素的污染,不仅影响饲料本身的营养价值,还影响畜、禽的生产性能,同时黄曲霉毒素还会在畜、禽体内残留,导致畜、禽中毒,人们误食此类肉食将严重影响身体健康。因此,在饲料安全生产中,黄曲霉毒素所带来的危害及检测方法应引起我们兽医工作者严密的关注。

[1]于炎湖主编.饲料毒物学附毒物分析.农业出版社,1992.

[2]冯建蕾.黄曲霉毒素的危害和防制.中国畜牧兽医,2005(12).

[3]卿全中.黄曲酶毒素对家禽生产性能和健康的影响.中国饲料,2000(3)∶35~37.

[4]魏金涛,等.饲料中霉菌的生长和产毒.饲料工业,2005(19)∶53~55.

10.3969/J.ISSN.1671-6027.2015.09.007

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