谷红对大鼠脑出血血肿周围NGB和IL-6表达的影响

赵春莉 董志扬 何 洋 刘舒婷 柳 颖 李 纯

（大连市友谊医院重症医学科，辽宁 大连 116001）

谷红对大鼠脑出血血肿周围NGB和IL-6表达的影响

赵春莉 董志扬 何 洋 刘舒婷 柳 颖 李 纯

（大连市友谊医院重症医学科，辽宁 大连 116001）

目的研究谷红对脑出血大鼠的脑保护作用。方法建立大鼠脑出血模型，检测NGB和IL-6在脑出血后血肿周围不同时间的表达。结果药物干预组较出血组神经功能缺损评分明显降低。干预组NGB表达较脑出血组明显增多。脑出血组IL-6阳性表达比干预组明显增加。结论谷红对脑出血所致的神经元损伤有明显的保护作用。

脑出血；脑红蛋白；IL-6；谷红

通过动物实验观察谷红对脑出血（ICH）大鼠血肿周围脑组织脑红蛋白（NGB）和IL-6的表达影响，探讨谷红脑保护的作用机制。

1 材料与方法

1.1 实验材料：雄性SD大鼠72只，兔抗鼠脑红蛋白多克隆抗体，SABC试剂盒，DAB浓缩显色剂，谷红。

1.2 实验方法

1.2.1 SD大鼠随机分为3组（n=24）：对照组，脑出血组，药物干预组。模型建立后12、24、48、72 h各随机分为4个亚组。术后半小时腹腔注射（0.8 mL/kg）。

1.2.2 参照李春岩等的方法[1]建立大鼠自体动脉血脑出血动物模型。动物苏醒后迅速出现行为和神经功能的异常，异常程度与病变严重程度一致。

1.3 统计学处理：实验结果应用SPSS13.0分析软件分析，实验组组间数据采用秩和检验，指标间与组内比较采用t检验，P＜0.05为差异有显著性。

2 结 果

2.1 神经功能评分：出血24 h后按Berderson法行神经功能评价。药物干预组较出血组神经功能缺损评分明显降低（1.792，2.375），差异具有统计学意义（P＜0.05）。

2.2 免疫组化检测：常规石蜡包埋，切片，分别记录NGB、IL-6在血肿周围皮质区阳性细胞数。

2.2.1 NGB的表达：NGB在脑出血12 h后即有表达，24 h达高峰，72 h后逐渐下降，实验组较对照组NGB表达明显增多，P＜0.01；干预组较出血组明显增多，P＜0.01，见表1。

表1 各时间点NGB在血肿周围的表达

2.2.2 IL-6的表达：脑出血12 h后血肿周围皮质区即出现大量IL-6阳性表达，48 h达高峰，后逐渐减少，组内各时间点比较差异显著，P＜0.01。见表2。

表2 各时间点IL-6B在血肿周围表达

3 结 论

脑出血后，NGB在脑出血组较对照组血肿周围皮质表达上调。谷红对脑出血后所致的神经元损伤的保护作用明显，有效减轻神经功能缺损症状，IL-6的表达减少。

4 讨 论

4.1 脑红蛋白对神经元的保护作用：NGB由Burmester等在2000年报道，在缺氧、缺血时以五配体形式存在，与氧的亲和性较高，VEGF等可促进其生成增加[2]。主要通过促进氧扩散入线粒体增加ATP的产生保护中枢神经细胞。NGB通过清除氧自由基、参与信号传导通路的调节、影响凋亡调节蛋白Bcl22、Bax的表达[3]，参与神经细胞缺氧缺血的应激反应[4]，促进脑部正常发育和成熟[5]。本动物实验显示：NGB在脑出血12 h后血肿周围皮质区迅速增高，24 h达高峰，持续至48 h，72 h后开始减少。NGB变化可能为脑组织的保护反应。在出血后的相同时间点，NGB在药物干预组较出血组表达增多，表明谷红通过增加NGB表达，改善脑组织局部缺血缺氧，达到到神经保护作用。

4.2 IL-6对脑出血血肿周围组织的影响：颅内IL-6在生理状态下低表达，具有重要的神经内分泌功能。研究发现，大鼠脑出血后血肿周围很快有IL-6大量产生。高浓度的IL-6可导致脑神经损伤：通过增加内皮细胞与细胞间黏附分子黏附，导致微循环障碍；通过激活补体系统，引起神经组织的二次损伤[6]。本实验显示IL-6在出血组表达明显高于对照组，表明IL-6水平与脑出血病程有关。

本研究通过大鼠脑出血后谷红干预治疗后神经功能缺损、NGB、IL-6表达比较，发现谷红在脑出血急性期有明显的神经保护作用。

[1]李春岩,刘瑞春,胡书超,等.大鼠自体动脉血脑出血动物模型的建立[J].脑与神经疾病杂志,2003,11(6):341-344.

[2]Haines B,Demaria M,Mao X,et a1.Hypoxia inducible factor-1 and neuroglobin expression[J].Neurosci Lett,2012,514(2):137-140.

[3]刘新建,刘丽娜,温慧敏,等.缺氧缺血性脑损伤新生大鼠海马区NGB、凋亡相关蛋白Bcl22、Bax的表达及其相关性[J].细胞与分子免疫学杂志,2010,26(10):1040-1042.

[4]Greenberg DA,Jin K,Khan AA.Neumglobin:an endogenous neuroprotectant[J].Curr Opin Pharmacol,2008,8(1):20-24.

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[6]Shafer LL,McNuty JA,Young MR.Brain activation of monocytelineage cells: involvemen of interleukins-6[J].Neuroimmunomod ulation,2003,10(5):295-304.

Effect of Kingtag on Expression of NGB and IL-6 in Tissue Around Intracerebral Hemorrhage（ICH） Area in Rats

ZHAO Chun-li, DONG Zhi-yang, HE Yang, LIU Shu-ting, LIU Ying, LI Chun
(Department of Critical Care Medicine, Dalian Friendship Hospital, Dalian 116001, China)

ObjectiveTo study protective effect of Guhong on cerebral hemorrhage of rats.MethodICH model was established in SD rats, NGB and IL-6 around haematoma were compared respectively.ResultNeurological deficit score in the drug intervention group was significantly lower than the ICH group. NGB In intervention group increased obviously than ICH group. The positive expression of IL-6 was significantly higher in ICH group than intervention group.ConclusionGuhong had a clear protective effect on neurons damage caused by cerebral hemorrhage.

Cerebral hemorrhage; Neuroglobin; IL-6; Guhong

R743.34

B

1671-8194（2015）07-0044-02