UPLC法测定酮康唑制剂中酮康唑的含量

庞 滂杨晓莉牛建功

（1 西安杨森制药有限公司，陕西 西安 710043；2 陕西省食品药品检验所，陕西 西安 710065）

UPLC法测定酮康唑制剂中酮康唑的含量

庞 滂1杨晓莉2牛建功1

（1 西安杨森制药有限公司，陕西 西安 710043；2 陕西省食品药品检验所，陕西 西安 710065）

目的建立酮康唑系列不同制剂产品含量测定的UPLC方法。方法采用Waters ACQUITY UPLC BEH C18色谱柱（2.1×100 mm，1.7 µm），0.34%硫酸四丁基氢铵溶液-乙腈为流动相，梯度洗脱，流速为0.3 mL/min，检测波长为230 nm，柱温40 ℃。结果酮康唑对照品溶液线性范围为：0.1～150 µg/mL，r=0.9999（n=9）；片剂：回收率为98.33%～99.80%，RSD为0.43%（n=6）；乳膏剂：回收率为99.45%～102.24%，RSD为1.21%（n=6）；2%洗剂：回收率为98.61%～101.24%，RSD为1.08%（n=6）。结论UPLC法简便、灵敏、准确、重复性好，可用于酮康唑系列不同制剂产品的质量控制。

酮康唑；超高效液相色谱法；含量

酮康唑系列产品主要包括酮康唑片剂、酮康唑乳膏和酮康唑洗剂，均为抗真菌类药物，其主要成分都为酮康唑[1-3]。采用超高效液相色谱法（UPLC）同时测定不同制剂的酮康唑产品中酮康唑的含量，结果满意，该法可用于控制制剂的质量。

1 仪器与试药

Waters ACQUITY型UPLC，酮康唑对照品（中国药品生物制品检定所，批号为100294-200602，校正因子：0.999）；硫酸四丁基氢铵（TBAHS，分析纯）；乙腈（色谱纯）；酮康唑片剂（西安杨森制药有限公司，批号为110902514）；酮康唑乳膏（西安杨森制药有限公司，批号为111208542）；酮康唑洗剂（西安杨森制药有限公司，批号为111116945）。

2 方法与结果

2.1 色谱条件。色谱柱：Waters ACQUITY UPLC BEH C18色谱柱（2.1× 100 mm，1.7 µm）；流动相：0.34%硫酸四丁基氢铵溶液-乙腈为流动相，梯度洗脱（梯度表见表1）；柱温：40 ℃；流速：0.3 mL/min；检测波长：230 nm；进样量：5 µL。

表1 梯度表

2.2 溶液制备：取酮康唑对照品适量，精密称定，加甲醇制成100 µg/mL的溶液作为对照品溶液。分别取酮康唑片剂、乳膏剂和洗剂适量，按规格用甲醇制成100 µg/mL的溶液作为酮康唑制剂的供试品溶液。按照处方及工艺制备不含酮康唑的空白样品适量，照上述方法制备成空白辅料溶液。

2.3 方法学考察

2.3.1 专属性试验：阴性对照品溶液测定结果表明，在与酮康唑保留时间相应位置上无吸收，表明其他成分对本品的酮康唑含量测定无干扰，方法专属性良好（图1）。

图1 超高效液相色谱图[1. 片剂（Tablet）；2. 乳膏剂（Cream）；3. 2%洗剂（2% Lotion）；4. 酮康唑（Ketoconazole）；A.对照品（Reference substance）；B. 供试品（sample）；C. 空白辅料（Blank）]

2.3.2 线性关系考察：用甲醇准确配制1 mL中含酮康唑1.25 mg的储备液，然后用甲醇逐步稀释至150、125、100、50、25、10、5、1、0.1 µg/mL系列溶液，进样量5 µL。按照上述色谱条件测定峰面积，以峰面积对溶液质量浓度进行线性回归，得回归方程Y=3×107X+6540.1，r=0.9999（n=9）。结果表明，酮康唑质量浓度在0.1～150 µg/mL与峰面积线性关系良好。

2.3.3 重复性试验：分别取片剂、乳膏、洗剂的供试品溶液各6份，依法测定。测得RSD分别为：片剂0.20%（n=6）；乳膏剂：0.29%（n=6）；2%洗剂：0.69%（n=6），表明方法重复性良好。

2.3.4 稳定性试验：分别取同一份片剂、乳膏、洗剂的供试品溶液，分别在制备后0、2、4、6、8 h时进样测定。测得RSD分别为：片剂0.43%；乳膏剂：0.17%；2%洗剂：0.66%，表明供试品溶液在8 h内基本稳定。

2.3.5 中间精密度试验：分别取片剂、乳膏、洗剂供试品溶液各6份，分别由A、B、C 3人分别在不同的时间用同一台设备，依法测定。测得RSD分别为：片剂0.47%；乳膏剂：0.68%；2%洗剂：0.73%，表明中间精密度良好。

2.3.6 回收率试验：分别取片剂、乳膏、洗剂空白样品各6份，分别精密加入线性储备液6、4、2 mL，加甲醇稀释至刻度，依法测定。测得回收率分别为：片剂为98.33%～99.80%，RSD为0.43%（n=6）；乳膏剂为99.45%～102.24%，RSD为1.21%（n=6）；洗剂为98.61%～101.24%，RSD为1.08%（n=6）。

2.3.7 含量测定：取“2.2溶液制备”下对照品溶液和供试品溶液，按上述色谱条件进样5 µL，按外标法计算其标示含量，测得结果为：片剂97.8%，RSD为0.2%（n=6）；乳膏剂100.4%，RSD为0.3%（n=6）；和2%洗剂103.4%，RSD为0.7%（n=6）。

3 讨 论

3.1 流动相的选择：对流动相的种类和比例进行了系列试验，结果表明选用0.34%硫酸四丁基氢铵溶液和乙腈的梯度比例洗脱最佳。

3.2 检测波长和柱温的选择：经试验表明，酮康唑在230 nm处峰形最好，且在柱温40 ℃时分离度和峰形最佳。

3.3 辅料的影响：专属性试验结果表明，空白辅料对酮康唑制剂的含量测定无影响。

实验表明，采用UPLC方法对酮康唑不同制剂进行含量测定，快速、简便、灵敏、重现性好，利于更好地控制产品质量。

[1]国家药典委员会.中国药典(二部)[M].2010版.北京:中国科技医药出版社,2010:679.

[2]李华侃.茜素红荷移分光光度法测定酮康唑含量[J].理化检验(化学分册),2013,49(4):479-480.

[3]张艳红,孙丽建,李强,等.高效液相色谱法测定缓释微球中酮康唑的含量[J].黑龙江大学工程学报,2012,3(3):42-44.

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1671-8194（2015）03-0058-02