家兔肝脏铸型透明标本的制作

李方正+杜晟+宫辰+孟德志+牟泽华+崔锡峰

摘要：配制不同颜色环氧树脂填充剂对家兔肝脏各管道进行灌注，然后采用透明处理得到肝脏的铸型透明标本。该标本保留肝脏的实质外形，能够分辨出肝脏各叶和胆囊等结构，能清晰显示后腔静脉、肝静脉和门静脉的分支以及各管道在实质中的位置和走向。

关键词：家兔；肝脏；铸型透明标本；制作

中图分类号：S829.11文献标识号：A文章编号：1001-4942（2015）04-0120-03

家畜解剖学是形态学科学，在教学过程中使用动物标本可以让学生更好地理解和记忆动物有机体的结构特征。解剖学实验中常用的标本类型有骨骼标本、干制标本、浸制标本、断层标本、铸型标本和透明标本等。铸型透明标本是将铸型和透明标本制作过程相结合而制成的能保留器官外形和显示内部管道的标本。铸型透明标本采用铸型剂灌注器官的血管、腔、窦等结构，然后采用药物或物理方法将组织、器官处理后使其折光系数与透明剂折光系数相近，达到透明的效果[1～4]。

环氧树脂是分子中含有两个或两个以上环氧基团的有机高分子化合物，其环氧基团可与多种类型的固化剂发生交联反应而形成硬度高、柔韧性好、对酸、碱及大部分溶剂稳定的固体高聚物[5，6]。我们将环氧树脂E44配制成不同颜色的填充剂，分别对肝脏的血管进行灌注，然后将肝脏实质进行透明处理，得到肝脏铸型透明标本，以期为兽医教学和临床提供好的解剖学依据。

1材料与方法

1.1试验材料

试验材料和药品：新鲜兔肝脏、环氧树脂E44、邻苯二甲酸二丁酯、乙酸乙酯、乙二胺、丙烯颜料、福尔马林溶液、酒精、氢氧化钾、过氧化氢、丙三醇等。

试验器械：手术刀、手术剪刀、镊子、止血钳、注射器、针头、电子天平、烧杯、量筒、标本缸等。

1.2试验方法

1.2.1取材家兔放血致死剖开腹腔，取下肝脏的时候将后腔静脉、门静脉留长些以方便插管。将取下的肝脏用生理盐水冲洗，用注射器吸取血管内残留的血液，将肝脏表面用脱脂棉吸干净。

收稿日期：2015-01-05

基金项目：青岛农业大学大学生科技创新基金项目“动物肝脏铸型透明标本的制作”（0501）

1.2.2填充剂的配制量取50mL环氧树脂E44，加入乙酸乙酯（稀释剂）10mL和邻苯二甲酸二丁酯（增塑剂）15mL；根据灌注不同管道的要求，向配制的填充剂中加入红色或蓝色丙烯颜料；在灌注前加入乙二胺（固化剂）10mL。

1.2.3肝脏血管灌注用玻璃活塞注射器（采用尖端磨成钝圆的16号兽用针头）吸取配制的红色和蓝色填充剂各10mL左右迅速进行灌注，待肝脏膨胀后用手揉搓以使填充剂更好地注入微细血管。

1.2.4透明处理将灌注后的肝脏静置4～5h，然后置入10%福尔马林溶液固定10d以上，清理肝脏标本的韧带、脂肪等。将固定后的肝脏移入蒸馏水洗涤后置入2%过氧化氢溶液漂白10d，以除去血污和色素；漂白后的肝脏依次入梯度酒精脱水（70%酒精2d→80%酒精2d→95%酒精12d→95%酒精Ⅱ2d→无水酒精Ⅰ4d→无水酒精Ⅱ4d）；将脱水后的肝脏置入2%氢氧化钾溶液中软化约20～30d，当肝脏达到半透明效果后移入梯度丙三醇（50%丙三醇、70%丙三醇和100%丙三醇）中进行透明，每级丙三醇的时间约为2d，最后用100%丙三醇保存。

2结果与分析

采用此方法制作的标本表面没有明显的损伤，保留了肝脏的实质外形，能够分辨出左外叶、左内叶、右内叶、右外叶和胆囊等结构。而且能清晰地显示后腔静脉、肝静脉和门静脉的分支以及各管道在实质中的位置和走向，见图1。

3讨论

目前制作铸型标本常用填充剂有明胶、淀粉[3，7]、丙烯腈-丁二烯-苯乙烯塑料（ABS）[2，8]、聚氯乙烯（PVC）、过氯乙烯（CPVC）、自凝牙托材料和环氧树脂等[9]。不同灌注材料符具优缺点，且制作铸型透明标本采用的填充剂还要不溶于后续透明处理用的各种试剂。我们采用的环氧树脂E44是包含环氧基的低分子化合物，在常温下呈液体状态，但因为其粘稠度较大而流动性差，不宜直接灌注微细管道。因此，我们采用乙酸乙酯作为稀释剂对环氧树脂进行稀释以增加其流动性，乙酸乙酯是非活性添加剂，只混合于树脂中，并不与树脂发生固化反应。稀释后的环氧树脂可以一次完成灌注，不需要补充灌注。由于环氧树脂固化后硬度较大而柔韧性不足，铸型细小管道后容易断裂，因此我们加入增塑剂（邻苯二甲酸二丁酯）增加环氧树脂固化后的韧性。配制的填充剂在加入固化剂后要立刻进行灌注，灌注时宜采用玻璃活塞注射器，边注射边用手轻轻揉搓标本，以使填充剂能充满末梢血管。如果灌注的标本过大，填充剂要分次配制，以免时间过长填充剂发生固化。固化后的环氧树脂颗粒小，可以填充到微细血管；而且柔韧性好、支撑力强、收缩率小，是比较理想的灌注材料。

此标本能够在保留肝脏实质外形的基础上显示出门静脉、肝静脉和肝管的走向和分支，可以帮助学生更好地理解和记忆其结构特点，是动物解剖学实验非常好的教具，同时总结出动物器官铸型透明标本的制作程序，可为其它器官的标本制作提供实验依据。

参考文献：

[1]戴正寿，解剖学标本制作技术[M].上海：复旦大学出版社.2008.

[2]冉银松，江润有，王鑫，等.犬肺脏管道铸型透明标本的制作[J].中国兽医杂志，2013（4）：59-60.

[3]赵玉娥，和尔伦桃迪，吉日嘎拉，等，动物透明标本的制作方法[J].畜牧与饲料科学，2012（10）：40.

[4]郑辉，李云峰，徐贵清透明标本材料的选择和处理[J].齐齐哈尔医学院学报，2001（1）：114-115.

[5]黄海龙，晏细元，廖晓明改良环氧树脂在管道铸型中的应用[J].解剖学研究，2004（4）：307.

[6]黄海龙，周立，改良环氧树脂在肢体管道铸型标本中的应用[J].解剖与临床，2006（5）：359.

[7]冯昕炜.一种心脏透明标本的制作方法[J].黑龙江畜牧兽医，2009（13）：91.

[8]李鹏，宋泽龙，刘阳，等.家兔全身动脉铸型标本的制作[J].滨州医学院学报，2010（3）：196-198.

[9]鲁金波，杜立银.改良环氧树脂在羊肺铸型标本巾的应用[J].山东畜牧兽医，2012（4）：12-13.endprint