金银花口腔崩解片中绿原酸含量测定

周 莉（江西省抚州市第一人民医院临床药学室，抚州344000）

金银花口腔崩解片中绿原酸含量测定

周 莉
（江西省抚州市第一人民医院临床药学室，抚州344000）

目的建立金银花口腔崩解片中绿原酸含量的测定方法。方法采用HPLC法测定金银花口腔崩解片中绿原酸的含量。HPLC条件乙腈-0.4%磷酸溶液(15∶85)为流动相，流速1.0 ml/min，柱温25℃，检测波长为327 nm。结果绿原酸在0.02096 μg～0.2186 μg范围内与其峰面积呈良好的线性关系(γ2=0.9999，n=10)，平均回收率为100.72%(RSD=1.15%)。结论该测定方法精密度高，重现性好，可用于此药的质量控制。

金银花；绿原酸；高压液相；质量控制

金银花口腔崩解片由金银花、连翘、牡丹皮组成，主要用于青春痘，长痘在不同部位，有不同的临床症状，如：内分泌失调；心悸，胸闷；胃火过盛，消化系统异常；肺功能失调，肝功能不顺畅，热毒；便秘；压力大，脾气差，造成心火和血液循环有问题等。金银花为甘，寒。归肺、心、胃经。具有清热解毒，疏散风热，用于痈肿疔疮，喉痹，丹毒，热血毒痢，风热感冒，温病发热。金银花的现代药理作用：1）抗菌及抗病毒。即对金黄色葡萄球菌、溶血性链球菌、痢疾、伤寒、脑膜炎双球菌、肺炎双球菌、绿脓以及流感病毒等都有明显抑制作用。2）有增强免疫的功能。金银花能促进淋巴细胞转化，增强白细胞的吞噬功能。3）抗炎、解热。金银花能促进肾上腺皮质激素的释放，对炎症有明显抑制作用。为治一切内痈外痈之要药。金银花主要成分是绿原酸，绿原酸是制剂质量控制的指标［1］。金银花口腔崩解片研究采用高效液相色谱法测定金银花口腔崩解片中绿原酸的含量。

1 仪器与试药

LC-10ATVP型(日本岛津公司)；C18柱：5×200 mm，粒度5 μm(大连依利特公司)。德国BP211D Sartorius电子天平(十万分之一)，绿原酸对照品批号：110753-200608（中国药品生物制品检定所），商品药材购自江西省樟树幸福药材行，经广东江门中医药学校郑小吉主任中药师鉴定。乙腈(色谱纯，SIGM A公司)。水为重蒸水，其它实验所用试剂均为分析纯。

金银花口腔崩解片(自制，批号20140320、20140322、20140316)。根据药材理化性质及药理作用，拟将金银花、连翘、牡丹皮提取成浸膏，金银花提取挥发油后加水提取制成浸膏。采用β-环糊精对挥发油进行包合，再与浸膏混合，加入粘合剂，崩解剂，稀释剂，矫味剂，泡腾剂，混匀，加粘合剂制粒，干燥，压片。并以口感（砂砾感、苦感）、崩解时间为主要指标，采用正交实验设计，对辅料加入量进行实验优化。

2 方法与结果

2.1 色谱条件和系统适用性试验乙腈-0.4%磷酸(13∶87)为流动相，流速为1.0 mL/min，检测波长为327 nm。理论塔板数以绿原酸计不低于4000。取供试品溶液10 μL注入液相色谱仪测试，绿原酸的保留时间约为15.6 min，供试品溶液中绿原酸可与其他物质基线分离，且阴性对照供试液无干扰。

图1 绿原酸对照品溶液高效液相色谱图

图2 阴性对照溶液高效液相色谱图

图3 供试品溶液高效液相色谱图

2.2 溶液的制备1）对照品溶液：取绿原酸对照品适量，精密称定，置量瓶中，置棕色量瓶中，用50%甲醇溶解，制成每1 mL中含5 μg的溶液。2）取金银花口腔崩解片，研磨，过四号筛，取0.5 g，精密称重，置具塞三角瓶中，精密加入50%甲醇50 mL，超声处理30 min，放冷，再次精密称重，以50%甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，精密量取5 ml，置25 ml棕色瓶中，加50%甲醇到刻度，摇匀，即得。3）阴性对照液，按同样工艺，制缺金银花的金银花口腔崩解片，并按样品供试液方法制成阴性药液。

2.3 线性关系考察精密吸取绿原酸对照品溶液2.5，5.0，7.5，10，12.5，15.0，17.5，20 μl，分别注入色谱仪，测定峰面积，结果绿原酸在0.125 μg～1.000 μg范围，进样量X(μg)与峰面积(A)呈良好的线性关系，其回归方程为：Y=3212714X-60485，γ= 0.9998。

2.4 专属性试验取对照品溶液供试品溶液(20140320)、阴性对照溶液分别进样10 μl，记录色谱图，见图1～3，阴性样品对测定无干扰。

2.5 精密度试验精密吸取对照品溶液20 μL，在“2.1”项条件下平行测定5次，记录绿原酸峰面积。表明仪器精密度良好。

2.6 稳定性试验，取同一供试品溶液，于室温放置0h、4 h、8 h、10 h和24 h后分别取样测定，表明供试品溶液在24 h内稳定。

2.7 重现性试验精密吸取同一批号（201403200）供试品溶液，按“2.1”项下色谱条件进样20 μL，平行操作5份，测定峰面积并计算含量。结果供试品溶液的绿原酸平均含量为0.089552，RSD=1.72%，表明重现性良好。

2.8 回收率试验采用加样回收法，取样金银花口腔崩解片品共6份，精密称定，加入绿原酸对照品，依法制备供试品溶液，照含量测定方法测定，计算回收率。结果见表1。

表1 回收率试验结果

2.9 样品含量测定取金银花口腔崩解片(自制，批号201040320、20140322、20140316)按2.2 1）项下对照品溶液制备方法制备对照品溶液，按2.2 2）项下供试品溶液制备方法，制备供试品溶液，分别进样10 μl，记录峰面积，外标法计算绿原酸的含量，结果见表2。

表2 三批样品中绿原酸的含量结果

3 讨论

不同产地的金银花绿原酸含量不同［2］，因此对成品含量的有影响，实验对不同来源的三批金银花中绿原酸的含量进行测定，均符合《中国药典》2010版一部的标准，暂定金银花中绿原酸含量不低于1.5%。

经实验表明，本含量测定方法简单、准确，可用于金银花口腔崩解片的质量控制。

［1］国家药典委员会.中国药典2010版一部［S］.北京：中国医药科技出版社，2010：205.

［2］彭素琴，刘郁林.不同品种金银花不同花期绿原酸含量比较［J］.安徽农业科学，2008，38(14):7296-7298.

Content Determination of Chlorogenic Acid in Flos Lonicerae Orally Disintegrating Tablets by High Performance Liquid Chromatography

ZHOU Li

(Department of ClinicalPharmacy，FuzhouFirst People'sHospital，JiangxiProvince，Fuzhou344000，China)

Objective To establish a method for content determination of chlorogenic acid in Flos Lonicerae orally disintegrating tablets. Methods Determining the content of chlorogenic acid in Flos Lonicerae orally disintegrating tablets by HPLC method.HPLC acetonitrile and 0.4%phosphoric acid solution(15∶85)as mobile phase，flow rate was 10 ml/min，column temperature was 25℃，the detection wavelength was 327 nm.Results Chlorogenic acid in 0.02096 G～0.2186 g range and peak area showed a good linear relationship(γ= 0.9999 2，n=10)，the average the recovery rate was 100.72%(RSD=1.15%).Conclusion The Method has high precision，good reproducibility，and can be used for quality control of this drug.

Flos Lonicerae；chlorogenic acid；HPLC；quality control

10.3969/j.issn.1672-2779.2015.12.075

1672-2779（2015）-12-0148-02

：张文娟本文校对：张文娟

2015-05-15）