自身抗体在自身免疫性肝病中的诊断价值

赵志钧 鲍舟君 姚燕珍 李翊卫⋆ 刘华生

自身抗体在自身免疫性肝病中的诊断价值

赵志钧 鲍舟君 姚燕珍 李翊卫⋆ 刘华生

目的 探讨自身抗体检测在自身免疫性肝病（AILD）中的诊断价值。方法 对22例自身免疫性肝炎（AIH）患者、21例原发性胆汁性肝硬化（PBC）患者和4例重叠综合征（OS）患者的血清进行自身抗体的检测。采用间接免疫荧光法和免疫印迹法测定抗核抗体（ANA）、抗线粒体抗体（AMA）、抗平滑肌抗体（ASMA）、抗F-肌动蛋白抗体和LKM-1、LC-1、SLA/LP抗体。结果 AIH患者ANA阳性率为81.8%；PBC患者ANA阳性率为81.0%。与乙型肝炎组（HBV）和正常对照组比较差异有统计学意义（P＜0.05）。AIH组和PBC组ANA以高滴度（＞1：320）为主。PBC组AMA和AMA-M2阳性率分别为76.2%和81.0%，与AIH组比较差异有统计学意义（P＜0.05）。结论 自身抗体检测对自身免疫性肝病诊断和鉴别诊断具有重要的意义。

自身抗体 自身免疫性肝病 诊断

自身免疫性肝病（AILD）是一组肝脏免疫耐受机制失衡引起的肝细胞或胆管上皮慢性损伤性炎症疾病，根据其临床表现、生化、免疫学、影像学和组织病理学特点，可分为以肝实质细胞进行性损伤为主的自身免疫性肝炎（AIH），以胆道系统受累为主的原发性胆汁性肝硬化（PBC）和原发性硬化型胆管炎（PSC），以及重叠综合征（OS）。AILD起病隐匿，初期症状与病毒性肝炎相似，而其治疗原则和病毒性肝炎则完全不同。因此早期诊断对AILD的病情监测和预后具有重要价值。本文回顾性分析2012年5月至2014年7月本院收治的47例AILD患者的自身抗体检测结果，以探讨自身抗体检测对AILD的诊断价值。

1 临床资料

1.1 一般资料 47例病例诊断均符合美国肝脏学会的诊断依据及国际自身免疫性肝炎组（IAIHG）修订的评分标准［1］。其中AIH 22例，男1例，女21例；年龄18～69岁，平均（58.0±10.8）岁。PBC 21例，男6例，女15例；年龄40～78岁，平均（56.4±8.0）岁。OS 4例，均为PBC-AIH重叠综合征，女，年龄50～63岁，平均（55.0±6.3）岁。以HBV感染者和健康体检者为对照组。其中HBV感染组38例，男5例，女33例；年龄37～76岁，平均（57.1±10.6）岁。健康体检者30例，其中男6例，女24例；年龄40～72岁，平均（56.0±10.2）岁。所有体检人员肝、肾、心功能正常，并排除自身免疫性疾病。

1.2 自身抗体检测 自身抗体检测包括抗核抗体（ANA）、抗线粒体抗体（AMA）、抗平滑肌抗体（ASMA）、抗F-肌动蛋白抗体。方法为间接免疫荧光法（ⅡF）。试剂由欧蒙（杭州）医学实验诊断有限公司提供。选用HEp-2细胞、猴肝和大鼠肾组织冷冻切片作为抗原，将待测血清1：100倍稀释后同抗原基质孵育30min，经异硫氰酸荧光素标记的羊抗人IgG结合30min后，洗片封片，荧光显微镜下观察，出现黄绿色荧光为阳性。1.3 抗肝抗原谱检测 抗肝抗原谱检测包括抗线粒体抗体-M2亚型（AMA-M2），抗肝肾微粒体1型抗体（LKM-1）、抗肝细胞溶质抗原1型抗体（LC-1），抗可溶性肝抗原/肝胰抗原抗体（SLA/LP）。采用免疫印迹法检测。试剂由德国欧蒙医学实验诊断股份公司提供。将待测血清1：100倍稀释后同抗原基质孵育30min，再用酶标抗人IgG孵育30min，用底物显色10min。观察特定区域是否有阳性条带。

1.4 病毒性肝炎检测 病毒性肝炎标志物的检测采用化学发光法，仪器为雅培公司的Abbott-i2000型，试剂和标准品均由雅培公司提供。

1.5 统计学方法 采用SPSS16.0统计软件。计数资料以n或%表示，采用χ2检验，P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 ANA及滴度在AILD患者中检测结果 见表1。

表1 各组ANA抗体滴度检测结果［n（%）］

2.2 AILD组间ANA核型结果 见表2。

表2 AILD各组间ANA核型比较（n）

2.3 各组间自身抗体和抗肝抗原谱检出率 见表3。

表3 各组间自身抗体和抗肝抗原谱检出率的比较［n（%）］

3 讨论

目前AIH、PBC诊断的“金标准”是肝组织的病理学检查，但AILD的肝组织活检特异性不强，受取材标本局限，对检查结果影响较大［2］。随着对自身抗体检测手段的提高和抗体谱的不断完善，自身抗体的检测在AILD患者诊断中的价值越来越受重视。

本资料结果表明，AILD患者以中年女性居多。AILD患者中又以AIH和PBC两类患者数为多，本资料因缺乏PSC病例，故未做这方面的探讨。AIH病因不明、起病隐匿、缺乏疾病特异性临床表现和相应的病原体［3］，而且病情可以轻至无任何临床症状重至急性发作［4］，随着临床实践经验的积累和对AIH认识的提高，人们逐渐认识到AIH相关自身抗体在AIH的诊断与分型中的重要作用，并在AIH的诊疗指南中将AIH相关自身抗体的地位提到与ALP、球蛋白等其他诊断重要指标相同的地位［5］。本资料中，有81.8%的患者ANA为阳性，同时AIH患者ANA抗体滴度高，18例阳性病例中有9例滴度＞1：320。对其中ANA阳性的AIH患者做核型分析显示，有5例为着丝点荧光模式。另外，ANA阳性率和抗体滴度与AIH相似，其核型以着丝点和胞浆颗粒型多见。但进一步分析表明，两组在AMA和AMA-M2的阳性率差异有统计学意义，本资料中AIH组和PBC组AMA阳性率分别为13.6%和76.2%，AMA-M2的阳性率为4.5%和81.0%。且AMA在疾病早期即可出现，从而说明AMA对PBC早期诊断具有重要的意义［6］。

本资料中涉及到4例OS病例，均为AIH-PBC OS，其并非是单纯PBC与AIH在生物化学和病理等方面叠加，正确认识、诊断PBC-AIH OS非常必要。本资料亦显示4例OS病例ANA均阳性，有3例滴度＞1∶100，核型分析有3例为≥2种的荧光模式，自身抗体检测中4例患者均AMA-M2阳性。

1 Czaja AJ, Freese DK． Diagnosis and treatment of autoimmune hepatitis ．Hepatology, 2002, 36(2):479～497．

2 刘燕京． 自身抗体在自身免疫性肝病中的表达及临床价值． 中国实用医药, 2013, 8(28):102～103．

3 Malnick S, Duek G, Melzer E, et al． The treatment of autoimmune hepatitis． Curr Clin Pharmacol, 2012, 7(4):318～327．

4 Peng M, Li Y, Zhang M, et al． Clinical features in different age groups of patients with autoimmune hepatitis． Exp Ther Med, 2014, 7(1):145～148．

5 Rigopoulou EI, Zachou K, Gatselis N, et al． Autoimmune hepatitis in patients with chronic HBV and HCV infections: patterns of clinical characteristics, disease progression and outcome． Ann Hepatol, 2013～2014, 13(1):127～135．

6 蔡晓燕, 董光富, 崔阳． 原发性胆汁性肝硬化63例． 实用医学杂志, 2011, 27(12):2208～2210．

316000 浙江省舟山医院

*通讯作者