Copeptin在动脉瘤性蛛网膜下腔出血患者血浆中的水平测定

黄 锐 李越汉

湖北襄阳市中医院神经外科 襄阳 441000

目前脑血管病已成为危害人类健康的重要因素，随着生活水平的提高及检查技术的进步，发病率逐年提高，疾病严重程度及预后的早期风险评估对于疾病的治疗非常重要。Copeptin是目前认为是自发性脑出血、缺血性脑卒中、炎症反应的机体损伤严重性和预后评估的一个血液标记物，其在血液中较为稳定，而且易于检测，已成为血管加压素释放以及应激反应出现的标志物。本文对Copeptin与蛛网膜下腔出血后血液中的浓度进行检测，探讨其与蛛网膜下腔出血的严重性和预后的关系。

1 资料与方法

1.1 一般资料 本研究收集2009-01-2013-05我科收治的37例动脉瘤性SAH患者的静脉血标本为实验组，20例体检健康的静脉血标本为对照组，2组一般资料见表1。

表1 2组一般资料比较

1.2 评估方法 入院后通过CT进行SAH诊断与Fisher分级，分为2级、4级和3级组，若合并脑内血肿，计算并记录血肿的体积，通过CTA或DSA确诊为动脉瘤。应用GCS昏迷评分对患者意识进行评估，采用Hunt-Hess分级评估患者的级别，均在入院后24h内进行，根据患者情况行经颅多普勒和头颅MRI检查，判断是否存在脑血管痉挛及脑梗死。应用GOS评分对患者的预后进行评估。

1.3 实验方法 血标本在入院后的24h内采集，收集后4 000r／min离心10min，在-70℃的环境下储存，所有标本均采用夹心ELSISA的方法进行检测。加有捕获抗体的反应板置入0.1M碳酸氢钠液中，在4℃下过夜，然后每孔加入300μL的封闭缓冲液（Startingblock T20-TBS），室温下轻微震荡30min，向反应板中每孔标本中加入标准抗原，室温下放置2h，用TBST液冲洗，加入检测抗体，室温下放置1.5 h。冲洗后，加入biotinyl tyramide液，室温下放置15min，冲洗后，加入含有辣根过氧化物酶标记物的PBS-吐温20液和1%的牛血清白蛋白，冲洗后，加入Ultra-TMB ELISA，放置30min，在652nm的96孔分光光度计中读出数值。

1.4 数据分析 所有数据分析均使用SAS 9.2，计量资料进行数据的分布描述，计量资料的比较Mann-Whitney检验，2组或者3组之间的比较采用Kruskal-Wallis检验。

2 结果

实验组Copeptin平均值为（16.28±3.65）pmol／L，对照组为（4.03±1.12）pmol／L。实验组Hunt-Hess分级0～Ⅱ级21例，Ⅲ～Ⅴ级16例；脑实质血肿12例，平均血肿体积（17.34±3.61）mL；其中34例确诊为动脉瘤；前循环28例，后循环6例；出现脑血管痉挛10例，脑梗死7例；GOS分级Ⅰ～Ⅲ级26例，Ⅳ～Ⅴ级11例，Hunt-Hess分级Ⅲ～Ⅴ级、Fisher分级3级、合并ICH、GOS分级Ⅰ～Ⅲ级患者的Copeptin平均水平明显增高，血管痉挛、脑梗死、动脉瘤的位置、性别对Copeptin的浓度无明显影响。见表2。

表2 实验组不同项目Copeptin平均值比较 （±s）

表2 实验组不同项目Copeptin平均值比较 （±s）

项目 分类 n 平均值（pmol／L） P值Hunt-Hess分级0～2／3～5 21／16 6.81±3.12／25.46±7.34 0.006 Fisher分级 2、4级／3级26／11 4.39±1.68／19.13±3.58 0.02脑内血肿 是／否 12／25 31.71±9.72／6.39±1.21 0.02血管痉挛 是／否 10／26 26.73±6.71／7.14±2.05 0.15脑缺血 是／否 7／30 24.19±5.21／16.51±7.02 1.0性别 女／男 12／25 21.31±6.31／7.16±1.22 0.52位置 前／后循环 28／9 17.42±3.26／5.09±2.04 0.38 GOS分级 4～5／1～3 26／11 7.19±2.98／26.09±6.82 0.03

3 讨论

目前，对动脉瘤性蛛网膜下腔出血的脑损害严重性进行评估，临床常用的是临床分级标准，如GCS评分和Hunt-Hess分级，但这些分级易受到癫痫、脑积水、镇静药物等因素的影响，对预后的判断仍不很准确，Copeptin由39个氨基酸组成，分子量为5 000D是目前认为是自发性脑出血、缺血性脑卒中、炎症反应的机体损伤严重性和预后评估的一个血液标记物，其与血管加压素来自同一个前体蛋白，并以等比率释放，与AVP的关系类似于C肽与胰岛素之间的关系。血管加压素是在不同的应激因子的刺激下由下丘脑释放的一类激素，其可以激活促肾上腺皮质激素，后者直接导致ACTH的释放，从而促进皮质醇的产生［1］。因为其在血液中较为稳定，而且易于检测，Copeptin成为血管加压素释放以及应激反应出现的标志物。有很多关于对出血性脑卒中早期对患者预后进行评估，一些以确认的影响因素，如出血量、血肿的形成、持续的高血压，而生物标志物作为一种有潜在价值的预测因子，近年来开始受到人们的关注。当前的一些研究认为［2］，Copeptin能够早期反映动脉瘤性蛛网膜下腔出血的严重性，其对1a后病死率及神经功能的不良结局的判断价值同改良Fisher分级评分相似，目前的文献报道［3］的出血性脑卒中的平均值为16.3pmol／L，缺血性脑卒中的平均水平为11.6pmol／L，正常人的Copeptin血液浓度为3.7～4.2pmol／L。许多研究认为，伴ICH的SAH患者的Copeptin浓度明显增高。Zweifer［4］认为，Copeptin的增加与ICH的体积和不良预后有关，这与我们在SAH患者中的研究结果相似，Copeptin的水平增加与蛛网膜下腔出血的量明显相关，但由于预后不佳的SAH患者一般都伴有ICH，因此我们的结果需要进一步的研究，以减少偏倚因素，一般来说，ICH的出现能够影响SAH患者的预后，我们的结果显示Copeptin的浓度与血管痉挛、动脉瘤的位置与迟发型缺血无明显相关，但与影响神经功能不良结局的预后有一定关系。

迟发性的血管痉挛是不良预后的影响因素，往往导致严重的缺血性症状，以及神经功能的损害，但迄今为止，仍未发现可靠的标志物能够在发病早期对迟发型脑血管事件进行预测，我们的结果表明Copeptin虽然未能在早期对脑血管痉挛进行预测，但一系列的实验表明，其与预后存在一定的关联，Zhu等［5］研究表明，Copeptin与血管痉挛之间存在重要的联系，与我们的研究结果一致，虽然数据提示两者之间有关，当仍不能成为脑血管痉挛预测的标记物，而且相比之下，临床分级更加有准确性。Copeptin的释放是蛛网膜下腔出血的特异性表现还是一般的应激反应，目前仍不是很清楚，Copeptin有下丘脑产生伴随血管加压素一起释放，在蛛网膜下腔出血的患者中，Copeptin的增加可能是在应激情况下由于下丘脑-垂体-肾上腺素-的反应轴的激活，不仅缺血性脑卒中能够引起，而且呼吸道感染、心衰、休克等均可引起，但这并不能排除Copeptin是蛛网膜下腔出血预后评估的潜在标志物的可能性［6］。

Copeptin在发病早期血液浓度和蛛网膜下腔出血的严重性有关，而且在预后差的患者中表达更高，其很有可能成为一个对蛛网膜下腔出血有诊断价值的的标记物。

［1］Morgenthaler NQ，Struck J，Alonso C，et al.Assay for the measurement of copeptin，a stable peptide derived from the precursor of vasopressin［J］.Clin Chem，2006，52（1）：112-119.

［2］Molyneux A，Kerr R，Stratton I，et al.International Subarachnoid Aneurysm Trial（ISAT）of neurosurgical clipping versus endovascular coiling in 2143patients with ruptured intracranial aneurysms：a randomised trial［J］.Lancet 2002，360（9342）：1 267-1 274.

［3］Katan M，Fluri F，Morgenthaler NG，et al.Copeptin：a novel，independent prognostic marker in patients with ischemic stroke［J］.Ann Neurol，2009，66（6）：799-808.

［4］Zweifel C，Katan M，Schuetz P，et al.Copeptin is associated with mortality and outcome in patients with acute intracerebral hemorrhage［J］.BMC Neurol，2010，10：34.

［5］Zhu XD，Chen JS，Zhou F，et al.Detection of copeptin in peripheral blood of patients with aneurysmal subarachnoid hemorrhage［J］.Crit Care，2011，15（6）：288.

［6］Muller B，Morgenthaler N，Stolz D，et al.Circulating levels of copeptin，a novel biomarker，in lower respiratory tract infections［J］.Eur J Clin Invest，2007，37（2）：145-152.