犬冠状病毒病的诊断与治疗

王增辉（山东省诸城市畜牧兽医管理局 262200）

犬冠状病毒病的诊断与治疗

王增辉（山东省诸城市畜牧兽医管理局 262200）

近年来，随着宠物饲养量的迅速增加，类似犬瘟热、犬细小病毒等传染性疾病也日趋增多。如何快速准确诊断治疗患病动物是目前基层兽医工作者面临的亟待解决的难题。在工作期间，遇到犬冠状病毒病病例，对其进行了诊疗，效果良好，现将对患犬犬冠状病毒的诊断和治疗方法作一总结，以期为从事兽医工作的同行能准确诊断和有效治疗该病提供参考。

1 犬冠状病毒病的基本特点

犬冠状病毒（CCV）属于冠状病毒科冠状病毒属，病毒呈圆形或椭圆形，直径在50～150nm左右，有囊膜，囊膜表面有长约20nm的纤突，病毒核酸为单股正链RNA，病毒囊膜内含有不分段的正股RNA，基因组大小为27～32kb，基因5′端的2/3是两个大的开放阅读框（ORF）la和lb，编码两个多聚蛋白诱导病毒复制酶的形成。ORFlb的下游有8～10个小ORF，表达完整的mRNA，并编码结构蛋S（ORF2）、E（ORF4）、M（ORF5）、核蛋白（N）以及大量的假定非结构蛋白。核衣壳呈丝状，直径为9～13nm，螺旋对称。电镜负染可清楚地看到病毒粒子的冠，表面突起。衣壳由糖蛋白（S），膜蛋白（M），小膜蛋白（E）和核蛋白（N）4种结构蛋白组成。作为三聚体的棘突（S）蛋白，分子量180～220kD，主要诱导产生病毒的中和抗体（Gebauer等，1991），形成特有的病毒膜粒，其上有同细胞受体结合的病毒附件，使病毒-细胞融合。

犬冠状病毒不耐热，对乙醚、氯仿、苯酚、去氧胆酸盐、次氯酸盐及β-内酯敏感，易被福尔马林、紫外线等灭活；反复冻融和长期存放易导致纤突脱落，使病毒感染性丧失。但在20～22℃的酸性环境（pH3.0）中不被灭活。在冬季其传染性可持续数月。

病毒可在犬或猫的多种细胞上增殖，包括犬原代肾或胸腺细胞以及犬胸腺、滑液及纤维肉瘤（A72）的细胞系、猫肾原细胞系（CrFK）及胎猫成纤维细胞。通常在感染后2～3d产生细胞病变，但也有不产生者。A72细胞最为稳定，且可产生空斑，细胞病变主要为出现肿大的异形细胞，有的可产生大合胞体。

2 犬冠状病毒病的流行特点

犬冠状病毒感染是由犬冠状病毒引起犬急性胃肠炎的重要原因之一。既可单独致病，也可与犬细小病毒、轮状病毒和魏氏梭菌等病原混合感染，混合感染死亡率大大高于单独感染。犬粪中的病毒是主要传染源，发病率随犬群的密度增加而增加，呈现急性胃肠炎综合症，表现为剧烈呕吐、腹泻、精神沉郁和食欲废绝。

所有品种及年龄的犬都易感，还包括犬科的野生动物，如：郊狼、狐。其他非犬科动物未见感染CCV的报道，有些毒株可感染猪和猫。幼龄警犬（德国牧羊犬）最易感，而成年犬多为无症状感染。2～4月龄发病率最高，2～3日龄仔犬常成窝死亡。CCV感染的发病率较低，据报道，约为30%，其发生和严重程度常与断乳、运输、气温骤变、饲养条件恶化等应激因素和年龄及混合感染有关。病犬和带毒犬的粪便中含有大量CCV，同时也有证据证明显示CCV存在垂直传播的可能性。

病犬和带毒犬是本病的主要传染源。经呼吸道、消化道随口涎、鼻液、粪便等排毒，污染饲料、饮水、笼具和周围环境，直接或见接地传给易感动物。Keenan等（1976年）的实验表明，CCV在粪便中可存活6～9d，在水中也可保持数日的传染性，因此，一旦发病，很难制止传播流行。CCV主要存在于感染犬的粪便，肠内容物、肠上皮细胞和肠系膜淋巴结内，但在健康犬的心、肺、肝、脾、肾及淋巴结中也发现有冠状病毒样粒子。

病毒非经肠接种并不引致肠道感染，且不排毒，尽管其血清抗体滴度较高，但并不能抵抗经口感染。经口感染的康复犬对同型毒株的再次感染有免疫力，但其血清抗体滴度可能不高，主要靠肠道IgA的保护作用。幼犬经母乳获得的抗体可维持4～5周，一般滴度不高，但可阻断病毒的感染。猪传染性胃肠炎病毒及猫传染性腹膜炎病毒人工感染的犬，并不能获得保护免受本病的感染。

早期病例可见小肠局部发炎臌气，后期病例出现整个小肠炎性坏死，肠系膜淋巴结出血水肿，肠系膜血管呈树枝样淤血，浆膜紫红；肠粘膜脱落，肠内容物呈果酱样，胃粘膜也见有出血；小肠常套叠；脾肿大；多数病犬不发热，白细胞数略有降低，通常可在7～10d内康复。有些犬，特别是幼犬在发病的24～36h死亡。

3 犬冠状病毒病的诊断方法

采用犬冠状病毒抗原快速检测试纸（Antigen Rapid CCV Ag Test Kit）检测CCV。该方法的原理：能以免疫色谱分析法定性地检测犬粪便中的犬冠状病毒抗原。试纸条表面有字母“T”和“C”作为测试纸的控制线。在提供任何样品前，测试线和控制线在结果窗中都不显示。控制线被用作程序控制。如果测试正常地完成，控制线试剂会工作，而且控制线会始终显示。如果在样品中含有足够的犬冠状病毒抗原，1条紫色的测试线会在结果窗中显示。在测试线处绑定了特异性的犬冠状病毒抗体用来捕捉和检测该抗原。这些能使Antigen犬冠状病毒抗原快速检测试纸以高准确度地识别犬粪便中的犬冠状病毒抗原。

试验所用的试纸，迅速、简便和准确。准确率在98%以上。CCV抗原快速检测试纸是定性地检测，不分品种和年龄差异。避开了电镜的负染、病毒的培养等过程，而且也节约了检测用的时间和材料，在临床上应用较广。

3.1 检测试纸

犬冠状病毒抗原快速检测试纸。

3.2 患病宠物犬

前来就诊的12只宠物犬。品种包括：可卡、哈士奇、德国牧羊犬、博美、雪纳瑞、金毛。

3.3 诊断方法

临床检查病犬的精神、体温、呼吸、有无呕吐及腹泻等临床症状，询问了解病犬年龄、是否免疫等情况，对病犬进行初步诊断。

实验室诊断利用犬冠状病毒抗原快速检测试纸进行检测。

测试步骤：用棉签收集犬类的粪便作为样品→将棉签浸入装有1ml反应缓冲液的样品收集管→将棉签上的样品和反应缓冲液充分混匀→取出试纸，将它平放于宽敞和干燥的表面→用提供的滴管取出收集管中的混合液→用滴管向样品孔中缓慢并且精确地加入4滴混合液→当反应进行时，会看到紫色的条带在试纸中间的结果窗中移动。如果1分钟以后仍然没有条带移动，请再往样品孔中加入1滴混合液→5～10min后判断结果。不要超过20min，测试过程图解见图1。

结果判定：如果在结果窗的左面出现1根条带说明测试是正常的。这条是控制线。结果窗的右面显示测试结果。如果在结果窗的右面出现另1根条带，这条是测试线。

阴性结果：如果在结果窗中只出现1根条带说明是阴性结果见图2。

图1 犬冠状病毒抗原快速检测试纸步骤

图2 犬冠状病毒抗原快速检测试纸阴性结果

图3 犬冠状病毒抗原快速检测试纸阳性结果

阳性结果：如果在结果窗中出现两根条带（“T”“C”），无论哪条先出现都表明阳性结果见图3。

无效的结果：如果在反应开始后紫色条带看不见，结果可被认为是无效的。可能使用方法不当或者试纸已经变质。推荐重新测试样品见图4。

4 治疗方法

对于犬冠状病毒病，一旦发生本病，按传染病的规定防治措施进行，无特效药物，以对症治疗为主，对患病犬进行静脉输液、止吐、消炎等以防脱水或继发感染引起死亡。根据各患病犬的症状不同，分别对症下药，采用不同的处方，具体见表1。

表1 治疗方法

图4 犬冠状病毒抗原快速检测试纸无效结果

输液治疗疗程一般7～10d，可以控制腹泻和呕吐等基本症状。以后，口服抗生素，一般为Marbocyl片剂，2mg/kg体重，连用10～25d。待饮食欲和大便正常时，可以口服驱虫药（汽巴或普沙）。

5 诊断结果

本病的临床症状和流行病学与轮状病毒感染相似，而且长于轮状病毒，犬细小病毒等混合感染，诊断较为困难。因此，运用实验室检验，如粪便病料的电镜检查，病毒分离或荧光抗体检查对本病的确诊具有重要意义。

临床诊断结果，该病的发生物品种、年龄之分，患病犬幼犬较成年犬症状剧烈。呕吐和腹泻是本病的主要症状，初期先呕吐未消化的食物，后吐黄色酸味粘液。继而出现急性胃肠炎性腹泻。粪便先稠后稀，最后成水样。橙黄色，灰色或绿色。常混有粘液或暗黑色血液。精神沉郁，卧地懒动，强行赶走，步态摇摆。食欲大减或无食欲。鼻镜干燥，迅速消瘦，眼球下陷，脱水症状明显。成年犬症状轻微。见表2。

实验室诊断结果，对12只CCV病犬进行粪便镜检和试纸检测，诊断结果粪便镜检一般无明显变化，试纸检测CCV均呈阳性。具体见表3。

6 治疗结果

12只CCV病犬，经过治疗，死亡6只，成活6只，死亡率为50.0%；单独感染6只，成活4只，死亡率为25%；混合犬细小病毒感染及继发其它疾病的犬有7只，成活3只，死亡率为66.7%。其中（序号9～12）的4只犬是成窝发病，症状很典型。

7 治疗与预后

目前没有犬冠状病毒病的特效药，所以其治疗现在仍以对症和支持疗法为主，主要是进行补液、抗菌、消炎、止吐止泻和维持酸碱平衡等。同时对患病犬要求禁食禁水，防止食物等对胃肠道的进一步刺激而造成病情的恶性循环。治疗过程中，若病犬同时出现呕吐和腹泻症状时，应先以治疗呕吐为主。在应用抗生素进行消炎的同时，应注意不要长时间地使用同一种抗菌素，也不应该从一开始就用最好的抗菌素，否则很容易产生抗药性和依赖性。抗生素一般可建议使用2～3周左右。若病犬脱水极其严重及血常规指标很低时，采取输入犬血的方法是十分有效的。

表2 临床诊断结果

表3 实验室诊断结果

表4 治疗及预后

在病犬的基本症状控制后的恢复阶段要注意：不要饲喂太多或是腐败的食物，以防止其消化道症状复发，特别是幼犬。最好在医生的建议下选择一些专门对犬胃肠道具有保护和调节功能的处方类罐头（i/d），同时食用一些提高免疫力的药物（IgY）。温度尽量保持在26～29℃。病犬未完全康复以前最好不要洗澡，尽量减少出门，以防止继发其他疾病。成年犬的治愈率很高，一般不出现死亡，以上治疗的两只（6、8号）成年犬全部成活，而且预后良好。