鸡大肠杆菌对氧氟沙星耐药性试验

张振国（山西省阳高县畜牧兽医服务中心 038100）

鸡大肠杆菌对氧氟沙星耐药性试验

张振国（山西省阳高县畜牧兽医服务中心 038100）

鸡大肠杆菌病是养殖生产中对鸡群危害最严重的疾病之一，由于其血清型复杂，耐药菌株不断增加，给防治工作带来了巨大困难，本研究通过选用速效泰康作为预防和治疗鸡大肠杆菌病的药物，试验通过对大肠杆菌标准菌O78的药敏试验，来比较速效泰康与对照药物甲磺酸左旋氧氟沙星的体外抑菌效果，并进行动物防治试验，对动物相对增重率、保护率、死亡率进行分析，来测试这种药物在防治鸡大肠杆菌病的效果，这对于进一步预防鸡大肠杆菌病具有重要意义。

鸡；大肠杆菌；氧氟沙星

大肠杆菌病对养禽业危害严重，因而对该病的防治尤为重要。防治大肠杆菌病的药物有许多，沈建忠等[1]已做关于氧氟沙星对鸡大肠杆菌病的药效试验，证明氧氟沙星对治疗鸡大肠杆菌病的效果显著，但目前没有报道速效泰康对大肠杆菌病的药效试验。速效泰康该药成分中的氧氟沙星系第三代喹诺酮类药物，又名氟嗪酸，是在喹诺酮类分子结构的基本骨架均为氮双并环结构的基础上，同时增加子并环，由日本第一制药株式会社于1982年开发，属广谱抗菌药物，对细菌、支原体及部分厌氧菌有效。本试验选用速效泰康作为预防和治疗鸡大肠杆菌病的药物，试验通过对大肠杆菌标准菌O78的药敏试验，来比较速效泰康与对照药物甲磺酸左旋氧氟沙星的体外抑菌效果，并进行动物防治试验，来测试这种药物对鸡大肠杆菌病的防治效果，为大肠杆菌病的防治提供依据。

1 材料与方法

1.1 供试药品

速效泰康（4%氧氟沙星及氨基比林和安替比林）；甲磺酸左旋氧氟沙星。

1.2 试验动物

14日龄雏鸡60只，购自山西阳高某鸡场，公母均有，未经鸡大肠杆菌疫苗免疫。试验前按照常规饲养，喂全价饲料，自由采食及饮水，并进行临床观察。试验时随机分为6组。

1.3 抗菌药物的制备

取氧氟沙星溶液1ml溶于1000ml水中配成溶液备用，取甲磺酸左旋氧氟沙星粉末0.01g溶于400ml水中配成溶液备用。含药滤纸片的制备：选择新华1号定性滤纸，用打孔机打成直径为6mm的小圆片，将打成的小圆片包成一纸包，121℃灭菌15min，置100℃干燥箱内烘干备用。将灭菌滤纸片摊布于灭菌平皿中，每50张滤纸片加药液0.5ml（药敏片含氧氟沙星0.4μg、药敏片含甲磺酸左旋氧氟沙星0.25μg），不时翻动滤纸片，使滤纸片将药液均匀吸净，浸泡30min。然后取出含药纸片置于一沙布袋中，置37℃温箱中干燥。干燥后，立即装入无菌的小瓶中加塞，至于干燥箱内保存。

2 试验结果

2.1 体外抑菌试验

2.1.1 细菌计数

大肠杆菌接种于普通营养肉汤培养基中，在37℃培养24h，菌悬液浓度为每毫升含大肠杆菌2.28×108个。

2.1.2 药敏试验结果

试验结果表明，速效泰康（40g/L）和甲磺酸左旋氧氟沙星（24.5g/L）对鸡源大肠杆菌O78平均抑菌直径分别为28.9mm和27.6mm，但治疗剂量的速效泰康的抑菌效果显著（P＜0.05）高于甲磺酸左旋氧氟沙星，详见表1。

2.2 药物治疗结果

表1 药敏试验结果

表2 药物对雏鸡大肠杆菌病的疗效

试验分组死亡率由低到高分别为：速效泰康预防组和速效泰康治疗组（11.26%），甲磺酸左旋氧氟沙星治疗组和免疫激动剂组（21.35%），阳性组（43.56%）；保护率由低到高分别为：阳性组（52.26%），免疫激动剂组、甲磺酸左旋氧氟沙星治疗组（75.38%）和速效泰康预防组、速效泰康治疗组（82.66%）；相对增重率由低到高分别为：速效泰康治疗组（52.97%)，免疫激动剂组（67.80%），速效泰康预防组（70.11%），甲磺酸左旋氧氟沙星治疗组（84.29%）和阳性对照组（114.87%）。

3 讨论

（1）药敏试验表明，治疗剂量的氧氟沙星对鸡大肠杆菌为高度敏感。氧氟沙星与甲磺酸左旋氧氟沙星药理作用均为通过抑制细菌原核细胞DNA旋转酶和DNA复制而发挥作用。治疗剂量的氧氟沙星的抑菌效果显著高于甲磺酸左旋氧氟沙星。分析原因可能为试验中所用的左旋氧氟沙星的浓度远远低于氧氟沙星，所以抑菌效果没有治疗量的氧氟沙星好。

（2）由药效试验结果可见速效泰康预防组、速效泰康治疗组、甲磺酸左旋氧氟沙星治疗组和免疫激动剂组在死亡率和保护率方面都好于阳性对照组。这说明速效泰康预防组、速效泰康治疗组、甲磺酸左旋氧氟沙星治疗组和免疫激动剂组对鸡大肠杆菌病都有一定的疗效。这是由于速效泰康预防组和速效泰康组均使用速效泰康。氧氟沙星为抗菌药具有抗菌谱广、抗菌活性强的特点，对革兰氏阳性菌、阴性菌群均有较强的抗菌作用。甲磺酸左旋氧氟沙星与氧氟沙星均为第三代喹诺酮类药物，杀菌机理同氧氟沙星，但甲磺酸左旋氧氟沙星的抗菌活性比氧氟沙星强2～4倍。免疫激动剂组使用免疫激动剂作为治疗药物，添加于鸡饲料中用于预防和提高免疫力，作用机理为此免疫激动剂在体内可以激活由受体构成的动物生物防御系统，使机体产生一系列的免疫因子如干扰素、白介素、肿瘤坏死因子等，由此激发和调动免疫防御系统以抵御外来病原体的侵袭。