齐拉西酮血药浓度的测定及其临床应用

吕东升 张 峰 马睿婷 赵美荣 黄小军 王志纲 云晓彬

1.内蒙古精神卫生中心精神四科，内蒙古呼和浩特 010010；2.中南大学湘雅二医院精神卫生研究所精神科，湖南长沙 410011；3.江苏省无锡市精神卫生中心精神科，江苏无锡 214151；4.内蒙古医科大学第一临床医学院检验科，内蒙古呼和浩特 010059

齐拉西酮血药浓度的测定及其临床应用

吕东升1，2张 峰3马睿婷1赵美荣4黄小军2王志纲1云晓彬1

1.内蒙古精神卫生中心精神四科，内蒙古呼和浩特 010010；2.中南大学湘雅二医院精神卫生研究所精神科，湖南长沙 410011；3.江苏省无锡市精神卫生中心精神科，江苏无锡 214151；4.内蒙古医科大学第一临床医学院检验科，内蒙古呼和浩特 010059

目的探讨齐拉西酮的血药浓度测定方法及其临床应用。方法选取2011年10月～2013年7月期间内蒙古精神卫生中心住院的30例蒙古族分裂症患者为研究对象。采用高效液相色谱法分别于齐拉西酮治疗第1、2、4周末测定患者体内齐拉西酮浓度，同时采用阳性与阴性症状量表（PANSS）和治疗时出现的不良反应量表（TESS）来评估临床疗效和不良反应。 结果齐拉西酮血药浓度在40～640 ng/mL范围内与峰面积呈现良好的线性关系（r= 0.99），最低定量浓度为18 ng/mL，日内日间误差均小于10%。第4周周末所测齐拉西酮浓度与相应的PANSS减分率、日平均剂量呈显著正相关（r＞0.4，P＜0.05）。结论 所使用的高效液相色谱法具有简单、稳定和准确的特点，而且患者体内齐拉西酮浓度具有良好的量效关系，能够指导个体化合理治疗。

齐拉西酮；血药浓度；高效液相色谱法；临床疗效

齐拉西酮是由美国辉瑞制药公司生产的新型抗精神病药物，不仅可以减轻精神分裂症阳性症状，还可改善阴性症状和认知症状[1]。目前，通过高效液相色谱法测定人血浆中齐拉西酮浓度来研究血药浓度与用药剂量、临床疗效和不良反应的研究在国内外均有报道[2-5]，但是结论尚存有一定的差异，这可能由于患者间遗传、环境及病理生理因素的不同，所以对治疗反应、剂量的需求及预后会有所不同[6]。内蒙古自治区是蒙古民族聚集地，如果能建立齐拉西酮的血药浓度检测方法并应用于临床，那么就能指导临床合理用药从而达到个体化治疗的目的。

1 材料与方法

1.1 仪器与试药

SHIMADZU高效液相色谱仪（日本岛津公司）和AUW120D分析天平（日本岛津公司），盐酸齐拉西酮片（美国辉瑞制药有限公司，批号：20130078，20 mg/片），齐拉西酮对照品（美国SIGMA公司，批号：Cat#Z485000 Lot#1-MAK-17-1），内标安定对照品（中国药品生物制品检定所，批号：171225-200902），乙醚（分析纯）、甲醇（色谱纯）、四乙二胺（分析纯）均为天津市化学试剂二、三厂生产。

1.2 病例纳入与排除标准

1.2.1 纳入标准 ①来自内蒙古精神卫生中心2011年10月～2013年7月期间的住院患者；②符合《国际精神障碍分类与诊断系统第10版（ICD-10）》精神分裂症诊断标准的患者；③阳性与阴性症状量表（PANSS）总分≥60分的患者；③年龄18～45岁，性别不限，蒙古族的患者；④首发精神分裂症患者（病程＞1个月）；⑤未服用任何抗精神病药物治疗的患者；⑥试验前均签署知情同意书。

1.2.2 排除标准 ①极度兴奋躁动，需要用抗精神病药物如氟哌啶醇针剂或电休克治疗者；②既往有心、肝、肾、消化道、中枢神经系统疾病以及入组时心电图QTc间期＞440 ms的患者；③肝、肾功能，空腹血糖和血脂、胆固醇指标明显大于正常标准上限的患者；④孕妇或哺乳期妇女；⑤HIV病毒感染者和过敏体质者以及存在语言障碍不能配合完成量表评定者。

1.3 色谱条件

色谱柱SHIMADZU C18（5 μm，150 mm×4.6 mm）；流动相：甲醇-水-四乙二胺-冰乙酸（70︰30︰2.0︰1.6，V/V/V）；流速：1.15 mL/min；柱温：40℃；检测波长：229 nm。

1.4 血药浓度测定方法

1.4.1 对照品和标准液制备 精密称取齐拉西酮对照品5mg，加入甲醇1 mL使齐拉西酮溶解，再加入甲醇定容于5 mL容量瓶中至刻度，配成1 mg/mL作为供试品溶液，置冰箱-20℃保存。内标溶液：内标选用浓度为10.0 μg/mL的安定。

1.4.2 血浆样品处理 取受试者血浆1.0 mL于10 mL带塞离心管中，加内标溶液50 μL，震荡混匀，加2.0 mol/L的NaOH溶液500 μL，震荡混匀，加三氯甲烷4 mL，混合2 min，以3000 r/min的速度，离心5 min，取有机层转入带塞尖底管中，于60℃水浴中氮气吹干，残渣用50 μL流动相复溶，进样20 μL进行色谱分析，记录色谱图，以峰面积和内标峰面积之比代入标准曲线计算血药浓度。

1.5 给药方案

应用盐酸齐拉西酮片治疗，起始剂量为20 mg，bid，早晚与饭同服，由临床医生按病情需要在治疗窗内（80～160 mg/d）确定每位患者用药剂量，连续治疗4周，并在第1、2、4周周末于服药12 h后清晨（6:30～8:00）患者服药前空腹取静脉血4～5 mL，测定血清中齐拉西酮浓度，记录患者日用药量等。

1.6 相关检查、评分及疗效判定

每个患者在入组前和结束时分别测量他们的体重、血脂、血糖，检查肝功能和肾功能，并于入组前和治疗后的第1、2、4周末应用PANSS和治疗时出现的不良反应量表（TESS）对其疗效和不良反应进行评定，同时做心电图检查密切检测患者的Q-Tc间期变化，如果Q-Tc间期＞440 ms[7]，应记录为Q-Tc间期的延长并停止使用齐拉西酮。量表的评分由两位工作＞5年的主治医师评定，内部一致性系数κappa值为0.80。PANSS减分率=（基线分-第n次评分）/（基线分-30）× 100%，以PANSS减分率≥25%为有效。

1.7 统计学方法

采用SPSS 19.0软件对数据进行分析，Spearman非参数等级相关分析用于血药浓度与临床疗效、用药剂量和不良反应的相关性分析，配对t检验用于治疗前后血糖、总胆固醇、三酰甘油、体重、Q-Tc间期差异的比较。所有统计分析取双侧检验，以P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 齐拉西酮的标准曲线

齐拉西酮血清浓度分别为 40.0、80.0、160.0、320.0、640.0 ng/mL时，得到在40.0～640.0 ng/mL范围内标准曲线 （图1）。曲线方程：Y=638.65X+30.991（R2=0.9932）。按信噪比S/n=3计算，齐拉西酮的最低检测浓度为18 ng/mL。

2.2 方法学的专属性

在选定的色谱条件下得到的血清色谱图显示，齐拉西酮及内标完全分离，齐拉西酮和安定的保留时间分别为14.3、11.8 min。

2.3 回收率和精密度试验

把齐拉西酮配成640、320、80 ng/mL三种浓度时，它的萃取回收率分别为51.9%、50.7%、40.4%，日内、日间精密度分别为1.14%、3.43%、3.59%和2.21%、4.34%、8.09%。

2.4 临床研究

根据入选标准，共入组男女精神分裂症患者36例，其中男20例，女16例。在实验过程共有6例脱落，30例患者完成试验，其中男14例，女16例，年龄（28±7）岁。

2.4.1 血药浓度和临床疗效 将第1、2、4周末所测的血药浓度值和相应的PANSS减分率分别进行Spearman相关性分析，结果发现第2、4周末测得的血药浓度值与减分率呈显著正相关（r=0.529、0.551，均P＜0.01）。见表1、图2a。

2.4.2 血药浓度与服药剂量 将第1、2、4周末所测血药浓度值与相应的服药剂量做Spearman相关性分析，结果发现第1、2、4周末血药浓度与服药剂量呈显著正相关（r=0.392、0.717、0.596，均P＜0.05）。见表1、图2b。

2.4.3 血药浓度与不良反应 同样将第1、2、4周末测得的血药浓度值与相应TESS分值之间进行相关性分析，血药浓度与TESS分值比较差异无统计学意义（P＞0.05）（表1）。本实验研究发现齐拉西酮服药初期会出现兴奋或激越、一过性的头晕和嗜睡、肌强直、静坐不能、恶心呕吐、心动过速。见图3。此外，30例分裂症患者入组前后的血糖、总胆固醇、三酰甘油、体重和Q-Tc间期比较差异无统计学意义（P＞0.05）。

表1 30例精神分裂症患者不同治疗时间的血药浓度、服药剂量、PANSS减分率和TESS值（）

表1 30例精神分裂症患者不同治疗时间的血药浓度、服药剂量、PANSS减分率和TESS值（）

注：PANSS：阳性和阴性症状量表；TESS：不良反应量表

治疗时间 齐拉西酮度（ng/mL）齐拉西酮剂量（mg/d） PANSS减分率 TESS得分（分）1周2周4周53.99±16.94 84.24±39.59 99.87±50.77 71±10 98±23 115±23 0.137±0.128 0.286±0.138 0.415±0.518 6.07±2.81 9.50±3.36 11.57±4.26

图1 齐拉西酮标准曲线

3 讨论

3.1 方法学研究

图2 第4周齐拉西酮血药浓度和临床疗效、用药剂量的关系

图3 第4周末齐拉西酮治疗分裂症患者时不良反应发生的类别和例数

本研究的主要目的之一就是建立用高效液相色谱法测定人血浆中齐拉西酮药物浓度的方法，这种方法具有自动、快速、从复杂成分中检测待测药物浓度的特点，在临床研究中已有广泛的应用[8-9]。本方法采用的是最常见的紫外检测器，在血浆药物监测中，对药物检测有灵敏度强、操作简便的特点[10]。盐酸齐拉西酮含有苯环结构，所以有明显的紫外吸收性能，并且在200～410 nm波段具有3个吸收峰，分别为210、229、320 nm。因为210 nm靠近末端吸收，而且229 nm处灵敏度较320 nm处高，所以本实验选229 nm作为检测波长。

3.2 临床研究

本研究另一个目的就是通过研究蒙古族分裂症患者体内齐拉西酮浓度与临床疗效、用药剂量和不良反应之间的关系，来更好地指导临床用药和判定疗效。结果显示，齐拉西酮治疗蒙古族分裂症患者第4周末的血药浓度和临床疗效、用药剂量呈明显正相关，这说明齐拉西酮浓度具有较好的临床检测价值，能够指导临床合理化用药，这与国内外报道一致[5，12]。而且经过抗精神病药齐拉西酮4周的系统治疗，蒙古族分裂症患者取得了较好的临床疗效，30例患者最终的有效率为83.3%（25/30）（按照PANSS减分率≥25%），这与文献报道基本一致[13]。

由于本药与食物同服时生物利用度为60%，比空腹服药提高1倍，高脂肪餐食可使齐拉西酮的生物利用度提高至97%[14]。因此，在实验过程中所有的患者均与食物同服。对齐拉西酮血药浓度与临床疗效分析结果显示在第4周末所测的稳态血药浓度中，浓度较高的患者PANSS总分改善也较明显。其他研究表明，稳态有效血药浓度与PANSS分的改善呈显著正相关[5，12]。以前的研究报道称齐拉西酮的血药浓度不仅在个体间，而且个体内不同时间点所测的浓度值也有很大的差异。本研究发现第4周所测稳态有效血药浓度最高值是最低值的6倍，与文献报道一致[2]，但未发现个体内部的差异。

此外，本研究结果表明齐拉西酮具有较好的耐受性，经过4周的治疗，患者的血脂、血糖、胆固醇及体重没有明显的增高，这也是齐拉西酮优于其他新型抗精神病药物的显著特点[15-16]。尽管有许多文献报道[17-18]齐拉西酮有延长心电图Q-Tc间期的危险，但本研究结果未发现由齐拉西酮诱发心律失常以及Q-Tc间期＞440 ms的患者，也可能与研究的样本量小、时间短有关。

综上所述，本试验已基本建立反相高效液相色谱法测定人血浆中齐拉西酮浓度的方法学研究，并分析了齐拉西酮血药浓度与临床疗效的关系。但未来仍需增加患者例数及民族种类，进一步探讨齐拉西酮治疗精神分裂症患者的血药浓度、用药剂量和临床疗效是否存在民族差异。

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Determination of ZiPrasidone Plasma concentration and its clinical aPPlication

LU Dongsheng1,2ZHANG Feng3MA Ruiting1ZHAO Meirong4HUANG Xiaojun2WANG Zhigang1YUN Xiaobin1

1.Fourth Subject of Psychiatric Department,Mental Health Center of Inner Mongolia Autonomous Region,Huhhot 010010,China;2.Department of Psychiatry,Mental Health Institute of Xiangya Second Hospital,Zhongnan University, Hu'nan Province,Changsha 410011,China;3.Department of Psychiatry,Mental Health Center of Wuxi,Jiangsu Province,Wuxi 214151,China;4.Department of Laboratory Medicine,the First Affiliated Hospital of Inner Mongolia Medical University,Inner Mongolia Autonomous Region,Huhhot010059,China

Objective To investigate determination method of Ziprasidone plasma concentration and its clinical application.Methods 30 cases of Mongolian patients with schizophrenia hospitalized in Mental Health Center of Inner Mongolia Autonomous Region from October 2011 to July 2013 were selected,Ziprasidone plasma concentration in patients was determined by HPLC at first,second,fourth weekend after Ziprasidone treatment respectively.Meanwhile, clinical efficacy and side effects were evaluated by positive and negative syndrome scale(PANSS)and treatment emergent symptom scale (TESS).Results A good linearity was obtained from 40 to 640 ng/mL plasma concentration with peak area(r=0.99).The quantitation limit was 18 ng/mL,with errors less than 10%for both intra-day and inter-day determinations.The Ziprasidone plasma concentration determined at fourth week had significant positive correlation with PANSS reductive ratio and daily dose (r＞0.4,P＜0.05).Conclusion The used HPLC method has the characteristics of simple,stable and accurate,and Ziprasidone plasma concentration in patients has good concentration-response relationship,which can guide individualized treatment.

Ziprasidone;Plasma concentration;High performance liguid chromatography;Clinical efficacy

R914.1

A

1673-7210（2015）11（a）-0017-05

2015-07-20本文编辑：赵鲁枫）

内蒙古自治区自然科学基金资助项目（2009MS 1156）。

吕东升（1982.5-），男，中南大学湘雅二医院精神卫生研究所2013级精神病学在读博士；研究方向：精神药理及影像学。

云晓彬（1964.4-），男，教授，主任医师，硕士研究生导师；研究方向：精神药理学。