微波法辅助提取葡萄叶白藜芦醇及其纯化研究

孙磊磊，康　健（新疆大学生命科学与技术学院，新疆乌鲁木齐830046）

微波法辅助提取葡萄叶白藜芦醇及其纯化研究

孙磊磊，康健*
（新疆大学生命科学与技术学院，新疆乌鲁木齐830046）

以新疆南部巴州地区赤霞珠葡萄叶为原料，采用微波辅助法提取葡萄叶中的白藜芦醇，并NKA-Ⅱ树脂进行纯化。实验表明：微波辅助法提取葡萄叶白藜芦醇的最佳工艺条件为：乙醇浓度40%，微波功率640 W，时间76 s，料液比1∶92，在此条件下提取白藜芦醇为13.52 mg/g；经过静态实验筛选，采用NKA-Ⅱ树脂对白藜芦醇粗品进行纯化，其纯化的最佳工艺参数为：6 BV、浓度3 mg/mL、pH4的白藜芦醇样液以2 BV/h通过树脂，用4倍柱体积90%的乙醇以3 BV/h的流速洗脱效果最佳，纯度由35.7352 mg/g提高到了181.5888 mg/g。结论：虽然微波辅助法的提取率不是最高的，但时间短，有利于工业生产，纯化虽然有一定效果，但仍需进一步研究。

葡萄叶，白藜芦醇，微波，纯化

白藜芦醇是一种生物性很强的天然多酚类物质，又称为芪三酚，具有抗菌［1-3］、抗炎［4］、抗氧化［5-7］、抗癌［8-9］、预防心血管疾病［10-12］等活性，在药品及食品制备上有着重要的应用［13］。新疆是中国第一大葡萄产区，2011年新疆葡萄总种植面积已达到13.33万hm2。葡萄种植期间需要多次除去植株外周叶片，加上葡萄采摘后田间管理需要打叶压藤越冬等操作，葡萄生产中每公顷地可产生数十吨葡萄叶片［14］。目前国内对葡萄叶开发利用尚不多，主要集中在总黄酮的研究上。边梅娜等［15］采用响应面法优化提取赤霞珠葡萄叶总黄酮的工艺条件，当乙醇提取浓度为56%，液料比为40∶1（mL/g），提取时间2.1 h，提取温度80℃时赤霞珠葡萄叶中总黄酮的提取率为5.61%。张纵圆等［16］采用正交实验法研究葡萄叶总黄酮的最佳提取工艺条件，确立了葡萄叶总黄酮最佳提取条件为45%的乙醇为溶剂、液料比为1∶40、提取温度为60℃、提取时间2 h，葡萄叶总黄酮含量为5.329 mg/g。若将葡萄叶作为另一种白藜芦醇的提取新来源，充分利用葡萄叶资源，同时优选出低成本的提取方法进而开发成相应的保健食品、药品等，便可以变废为宝，为新疆葡萄资源的合理利用开辟新途径［12］。

微波是一种波长为0.001～1 m、频率为0.3～300 GHz的电磁波。微波辅助提取中药有效成分具有选择性好、提取纯度高和高效快速的特点［17-18］。本实验拟利用微波辅助提取新疆南部巴州地区赤霞珠葡萄叶中的白藜芦醇，利用紫外分光光度法测定其含量，并与传统溶剂浸提法、超声波辅助提取法进行比较，应用单因素和响应面实验优化获得的最佳微波辅助提取工艺，并从9种树脂中筛选出适宜葡萄叶白藜芦醇纯化的树脂，以期得到纯度高杂质少的白藜芦醇。该研究将为白藜芦醇的快速有效提取提供实验依据。

1　材料与方法

1.1材料与仪器

赤霞珠葡萄叶新疆南部巴州地区；无水乙醇、甲醇等均为分析纯；白藜芦醇标准品（HPLC≥98%） 上海源叶生物科技有限公司；AB-8、ADS-8、D3520、D101、ADS-17、X-5、NKA-9、NKA-Ⅱ、HPD-500天津南开和成科技有限公司。

电子天平梅特勒-托利多仪器（上海）有限公司；HH-S型恒温水浴锅巩义市英峪予华仪器厂；SHB-Ⅲ循环式多用真空泵郑州长城科工贸有限公司；微波炉格兰仕微波炉电器有限公司；Spectrumlab 53紫外可见分光光度计上海棱光技术有限公司；真空冷冻干燥机北京博医康实验仪器有限公司。

1.2实验方法

1.2.1白藜芦醇标准曲线的制作本实验室自制，具体方法见文献［19］。精密称取干燥恒重的白藜芦醇对照品5.9 mg，于50 mL棕色容量瓶中，用甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，即得到0.118 mg·mL-1的对照品溶液。

分别精密吸取对照品溶液0.3、0.6、0.9、1.2、1.5 mL置于10 mL容量瓶中，以甲醇定容至刻度，摇匀，即得浓度分别为3.54、7.08、10.62、14.16、17.70 μg/mL的对照品溶液。以甲醇做参比，分别测定306 nm吸光度，以吸光度对浓度进行线性回归。

1.2.2白藜芦醇的提取称取烘干至恒质量、质量为1.0 g粉碎至40目的葡萄叶粉于锥形烧瓶中，以40%乙醇为提取溶剂，选择不同的微波功率、微波时间和料液比进行处理，真空抽滤，吸取上清液测定浸取液吸光度值，并计算白藜芦醇的含量。

1.2.2.1微波功率对微波提取白藜芦醇的影响准确称取5份葡萄叶粉，分别按微波功率160、320、480、640、800 W，料液比1∶90，微波处理45 s。

1.2.2.2微波时间对白藜芦醇提取的影响准确称取6份葡萄叶粉，按微波功率640 W，料液比1∶90，分别处理15、30、45、60、75、90 s。

1.2.2.3料液比对白藜芦醇提取的影响准确称取5份葡萄叶粉，按微波功率640 W，料液比分别为1∶30、1∶60、1∶90、1∶120、1∶150，微波处理75 s。

1.2.2.4响应面法优化实验设计根据单因素实验的结果，Box-Behnken设计原理，以微波功率、微波时间、料液比3个因子为自变量，分别用A、B、C表示，以白藜芦醇的含量为响应值设计了三因素三水平（如表1所示）共17个实验点的响应面分析实验，17个实验点包括12个析因点和5个零点，以随机次序进行，实验重复3次取均值。

表1　三因素三水平中心组合实验方案Table 1　Results of central composite tests with three factors

1.2.3白藜芦醇的纯化

1.2.3.1树脂的预处理预处理：取一定量的大孔树脂，用95%的乙醇浸泡24 h，用95%乙醇洗涤至流出液体无浑浊，接着用蒸馏水洗涤至无醇味，再依次用0.5%HCl浸泡4 h，用蒸馏水洗涤至pH呈中性，再用2%NaOH浸泡4 h，最后用蒸馏水洗涤至pH呈中性备用［20］。

湿法装柱：装柱前先在柱中加入一定量的蒸馏水，接着将混有蒸馏水的大孔树脂倒入层析柱中。装柱后树脂间不得有气泡且分布均匀。

1.2.3.2静态吸附和静态吸附动力学实验称量9份50 g经预处理的AB-8、ADS-8、D3520、D101、ADS-17、X-5、NKA-9、NKA-Ⅱ和HPD-500树脂于150 mL的具塞锥形瓶中，再加入40 mL的白藜芦醇的浓缩液（浓度为1 mg/mL），用塞子塞好，振荡速度为160次/min，放入常温的恒温振荡器中振荡，每隔一定时间测定锥形瓶溶液的白藜芦醇浓度，测定时间设为：0.5、1、2、3、4、5、6、7、8 h，并按下式计算吸附率（%）和吸附量（mg/g）。绘制静态等温吸附动力曲线。

式中：Q—为吸附量，mg/g干树脂；A—为吸附率，%；C1—为吸附前白藜芦醇溶液浓度，mg/mL；C2—为吸附后溶液中白藜芦醇浓度，mg/mL；V—为溶液体积，mL；W—为树脂重量，g。

1.2.3.3静态解吸实验分别称取5 g吸附有白藜芦醇的的树脂，依次加入50 mL体积分数分别为10%、20%、30%、40%、50%、60%、70%、80%、90%的乙醇溶液和无水乙醇（100%）进行洗脱，放入25℃恒温振荡器中振荡24 h，振荡速度为160次/min，过滤收集滤液，按下式计算解吸率（%）。

式中：D—为解吸率，%；V—为解吸液体积，mL；C3—为解吸后溶液中白藜芦醇浓度，mg/mL；W—为树脂重量，g；Q—为吸附量，mg/g干树脂。

1.2.3.4树脂的动态吸附实验根据大孔树脂吸附率、吸附量和解吸率综合评价，从AB-8、ADS-8、D3520、D101、ADS-17、X-5、NKA-9、NKA-Ⅱ和HPD-500树脂中筛选最适大孔树脂，预处理后湿法装柱，进行动态吸附、解吸实验。

a.上样流速对吸附白藜芦醇的影响将5份已进行前处理的60 mL最佳树脂分别湿法装柱（2 cm× 60 cm），将浓度为3 mg/L、pH4的上样液60 mL（1 BV）以1、2、3、4、5 BV/h不同流速经过树脂，进行吸附实验并计算吸附率。

b.上样液浓度对吸附白藜芦醇的影响将5份已进行前处理的60 mL最佳树脂分别湿法装柱（2 cm×60 cm），将浓度分别为为1、2、3、4、5 mg/L、pH4的上样液60 mL（1 BV）以2 BV/h的流速经过树脂，进行吸附实验并计算吸附率。

c.动态吸附泄漏曲线将已进行前处理的60 mL NKA-Ⅱ树脂湿法装柱（2 cm×60 cm），将浓度为3 mg/L、pH4的上样液分别以0.5、1、1.5、2、2.5、3、3.5、4、4.5、5、5.5、6、6.5、7、7.5、8倍柱体积、以2 BV/h流速经过树脂，进行吸附实验并计算吸附率。

d.上样液pH对吸附白藜芦醇的影响将5份已进行前处理的60 mL最佳树脂分别湿法装柱（2 cm× 60 cm），将浓度为3 mg/L、pH分别为3、4、5、6、7的6 BV上样液以2 BV/h流速经过树脂，进行吸附实验并计算吸附率。

1.2.3.5树脂的动态解吸实验

a.洗脱流速对解吸白藜芦醇的影响将5份已进行前处理的60 mL最佳树脂分别湿法装柱（2 cm× 60 cm），将浓度为3 mg/L、pH分别为4的6 BV上样液以2 BV/h流速经过树脂，树脂饱和后，用蒸馏水洗至洗脱液无色，再用3 BV的90%乙醇溶液分别以1、2、3、4、5 BV/h不同流速进行洗脱，并计算解吸率。

b.洗脱剂用量对解吸白藜芦醇的影响将已进行前处理的60 mL最佳树脂分别湿法装柱（2 cm× 60 cm），将浓度为3 mg/L、pH4的6 BV上样液以2 BV/h流速经过树脂，树脂饱和后，用蒸馏水洗至洗脱液无色，再用3 BV的90%乙醇溶液以3 BV/h的流速进行洗脱，然后将流出液分段收集，每30 mL（0.5 BV）收集一份并测定其白藜芦醇浓度。

2　结果与分析

2.1测定波长的确定

图1　白藜芦醇标样紫外扫描图Fig.1　Ultraviolet scanning figure of resveratrol standard sample

在Spectrumlab 53紫外可见分光光度计上进行285～320 nm范围内扫描，由图1可知，其最大吸收波长为306 nm，因此确定测定白藜芦醇的波长为306 nm。

2.2白藜芦醇的标准曲线

图2　白藜芦醇标准曲线Fig.2　Resveratrol standard curve

由图2可知，得回归方程y=0.1164x+0.0129（R2= 0.9984，y为吸光度，c为白藜芦醇浓度，单位为μg/mL）。结果表明，白藜芦醇检测浓度在3.5～17.5 μg/mL范围内与吸光度线性关系良好。

2.3白藜芦醇的提取

2.3.1单因素实验

2.3.1.1微波功率对微波提取白藜芦醇的影响微波功率对提取葡萄叶白藜芦醇的影响如图3所示，随着微波功率的增大，白藜芦醇的提取率增加，这是由于微波功率增大时，温度随之升高，白藜芦醇的提取量也随之增大，当功率达到640 W后，液体开始有沸腾现象，此时白藜芦醇的提取量最大，当功率继续增大时白藜芦醇的提取量反而下降，这可能是因为溶液温度过高导致原料中白藜芦醇结构受到破坏，从而导致白藜芦醇提取量降低，所以微波功率选择640 W为宜。

图3　微波功率对微波提取白藜芦醇的影响Fig.3　Effect of microwave power on microwave extraction of resveratrol

2.3.1.2微波时间对微波提取白藜芦醇的影响微波时间对提取葡萄叶白藜芦醇的影响如图4所示，随着微波时间的延长白藜芦醇提取量逐渐增加，当时间增加到75 s后随着微波时间的延长白藜芦醇的提取量反而下降。这可能是由于随着微波辐射时间的延长，溶液温度升高，溶液开始沸腾，但考虑到长时间爆沸会导致溶剂挥发较多，并且温度过高会导致白藜芦醇活性降低，所以辐射时间选择75 s为宜。

图4　微波时间对微波提取白藜芦醇的影响Fig.4　Effect of microwave time on microwave extraction of resveratrol

2.3.1.3料液比对微波提取白藜芦醇的影响料液比对提取葡萄叶白藜芦醇的影响如图5所示，当料液比为1∶90时提取白藜芦醇的量最高，当料液比小于1∶90时，由于溶剂较少，无法使白藜芦醇完全浸出，但当提取液使用量较多时，白藜芦醇含量反而降低，可能由于料液的提高虽然会在较大的提高传质推动，但其他物质的溶出也迅速增加，反而阻碍了白藜芦醇的溶解，因此选择料液比为1∶90，即溶剂体积为90 mL。

图5　料液比对微波提取白藜芦醇的影响Fig.5　Effect of solvent ratio on microwave extraction of resveratrol

2.3.2响应面实验采用Design-Expert程序对表2中的实验数据进行回归拟合，分析得到微波功率、微波时间和料液比与白藜芦醇含量之间的二次多项回归方程：

Y=13.48+0.015A＋0.27B＋0.32C－0.012AB＋0.14AC－0.003719BC－1.48A2－1.76B2－1.68C2。

表2　三因素三水平中心组合实验结果Table 2　Results of central composite tests with three factors and three levels

由表3知模型显著，失拟项不显著，表明该方程

表3　回归分析结果Table 3　Results of regression analysis

对实验拟合情况好，实验误差小。回归方程较好地描述了各因素与响应值之间的真实关系，因此，可以用该回归方程代替实验真实点对实验结果进行分析。由该回归方程做出中心组合设计实验所得的3组响应曲面图如图6～图8所示，确定出最佳提取工艺条件，可知白藜芦醇含量的理论最大值为13.50 mg/g，其所对应的提取条件为：微波功率640.76 W、微波时间75.77 s、料液比1∶91.93。

图6　微波功率和时间对微波提取白藜芦醇的影响Fig.6　Effect of microwave power and time on microwave extraction of resveratrol

图7　微波功率和料液比对微波提取白藜芦醇的影响Fig.7　Effect of microwave power and solid-liquid on microwave extraction of resveratrol

图8　微波时间和料液比对微波提取白藜芦醇的影响Fig.8　Effect of microwave time and solid-liquid on microwave extraction of resveratrol

表4　不同方法提取葡萄叶白藜芦醇的比较Table 4　The comparison of different methods to extract grape leaves resveratrol leaves resveratrol

表5　不同树脂的参数以及对白藜芦醇的静态吸附、解吸性能Table 5　Parameter of different resins and their adsorption and desorption properties on resveratrol

2.3.3验证实验根据软件得到的结果，考虑实验的可操作性，将最佳反应条件调整为料液比1∶92，微波时间76 s，微波功率640 W，在此条件下提取白藜芦醇为13.52 mg/g，验证了方程的可靠性。

2.3.4不同方法提取葡萄叶白藜芦醇的比较由表4可知，比较有机溶剂浸提法、超声辅助法提取法和微波辅助提取法，虽然微波辅助提取法的提取率最低，但就提取时间而言，微波辅助提取法所需时间（1.2667 min即76 s）远远低于有机溶剂浸提法时间（240 min）和超声辅助提取法所需时间（59 min），节约时间，适于工厂生产。

2.4白藜芦醇的纯化

2.4.1树脂筛选的结果选择树脂主要考虑树脂的粒径、比表面积、平均孔径、极性等。从表5可以看出，本实验选择了极性不同的树脂，包括非极性、弱极性、中极性与极性树脂。一般来讲，极性稍强的树脂对极性强的分子有较强的吸附作用；非极性树脂对非极性分子的吸附作用较强；孔径较大的树脂易于吸附分子体积较大的物质；树脂的比表面积越大，其吸附容量也越大［18］。白藜芦醇的分子结构中含有酚羟基，显弱极性，但由于羟基数目并不多，只有3个酚羟基，因此有利于弱极性和极性树脂的吸附。从表5可以看出，NKA-Ⅱ的吸附率最高，平衡吸附量最大，综合考虑其吸附效果与解吸效果，选择NKA-Ⅱ作为最佳树脂，来分离纯化葡萄叶中的白藜芦醇。

图9NKA-Ⅱ树脂的静态吸附曲线Fig.9　Static adsorption curve NKA-Ⅱresin

2.4.2静态实验结果

2.4.2.1NKA-Ⅱ树脂对葡萄叶白藜芦醇的静态吸附曲线从图9可以看出，在吸附开始阶段，NKA-Ⅱ树脂对白藜芦醇的吸附速度很快，曲线斜率较大，0.5 h后吸附速度逐渐减缓，曲线斜率明显减小，1 h后趋于平缓，3 h后接近吸附饱和。从时间与吸附率方面综合考虑，本实验选择3 h作为静态吸附时间。

图10　不同浓度乙醇对NKA-Ⅱ树脂的解吸率的影响Fig.10　Effect of different concentration of ethanol on NKA-II resin desorption rate

2.4.2.2乙醇浓度对NKA-Ⅱ树脂的静态解吸率的影响从图10可以看出，随着乙醇浓度的增加，对白藜芦醇的洗脱效果也越来越好，乙醇浓度为90%时解吸率达到了96%，但之后乙醇浓度再增加，解吸率开始降低，因此选择90%乙醇作为洗脱剂。

2.4.3动态实验结果

2.4.3.1上样流速对NKA-Ⅱ树脂吸附白藜芦醇的影响将已进行前处理的60 mL NKA-Ⅱ树脂湿法装柱（2 cm×60 cm），将浓度为3 mg/L、pH4的上样液60 mL（1 BV）以不同流速经过树脂，得到上样流速与吸附率的关系如图11所示。随着上样流速的逐渐增大，树脂的吸附率相应减少，这是因为流速过快会导致树脂未能达到吸附饱和而降低了树脂的吸附作用，考虑到工作效率，本实验确定最佳的上样流速为2 BV/h。

图11　上样流速对吸附率的影响Fig.11　Effect of sample flow rate on adsorption rate

2.4.3.2上样液浓度对NKA-Ⅱ树脂吸附白藜芦醇的影响将已进行前处理的60 mL NKA-Ⅱ树脂湿法装柱（2 cm×60 cm），将不同浓度、pH为4的上样液60 mL（1 BV）以2 BV/h流速经过树脂，得到上样液浓度与吸附率的关系如图12所示，随着上样液浓度的逐渐增大，树脂的吸附率也相应增加，当浓度为3 mg/mL时吸附率达到最大，之后随着上样液浓度的进一步增大，吸附率下降，这有可能是由于上样液的浓度过大时会导致树脂的微孔堵塞从而降低了树脂的利用率。因此，本实验确定最佳的上样液浓度为3 mg/mL。

图12　上样液浓度对吸附率的影响Fig.12　Effect of sample concentration on adsorption rate

2.4.3.3NKA-Ⅱ树脂的动态吸附泄漏曲线将已进行前处理的60 mL NKA-Ⅱ树脂湿法装柱（2 cm× 60 cm），将浓度为3 mg/L、pH4的上样液分别以不同柱体积、2 BV/h流速经过树脂，结果如图13所示，随上样量的增加，流出液中白藜芦醇的浓度也不断增加，当上样量达到6倍柱体积时，流出液的颜色明显加深，这说明葡萄叶白藜芦醇出现明显泄漏，当达到7倍柱体积时树脂已基本达到饱和状态，为了避免浪费，本实验选择上样量为6 BV。

2.4.3.4上样液pH对NKA-Ⅱ树脂吸附白藜芦醇的影响将已进行前处理的60 mL NKA-Ⅱ树脂湿法装柱（2 cm×60 cm），将浓度为3 mg/L、pH分别为3、4、5、6、7的上样液6 BV以2 BV/h流速经过树脂，得到上样液pH与吸附率的关系如图14所示，在pH4时NKA-Ⅱ树脂对葡萄叶白藜芦醇的吸附率可达到87.84%，因此，本实验确定最佳的上样液pH为4。

图13　葡萄叶白藜芦醇的动态吸附泄漏曲线Fig.13　The dynamic adsorption leakage curve of grape leaf resveratrol

图14　上样液pH对吸附率的影响Fig.14　Effect of sample solution pH on adsorption rate

2.4.3.5洗脱流速对NKA-Ⅱ树脂解吸白藜芦醇的影响将6 BV浓度3 mg/mL、pH4的白藜芦醇样液以2 BV/h通过NKA-Ⅱ树脂（60 mL），先用蒸馏水洗至洗脱液无色，再用3 BV的90%乙醇溶液以不同流速进行洗脱，洗脱流速与解吸率的关系如图15所示，随流速的增加解析率下降，这是由于乙醇流速过快时，树脂与乙醇的接触时间较短，不利于解吸，同时考虑到流速过慢时，时间延长，增加生产成本，因此，综合考虑本实验确定最佳的洗脱流速为3 BV/h。

图15　洗脱流速对解吸率的影响Fig.15　Effect of elution velocity on desorption rate

2.4.3.6洗脱剂用量对NKA-Ⅱ树脂解吸白藜芦醇的影响将6 BV浓度3 mg/mL、pH4的白藜芦醇样液以2 BV/h通过NKA-Ⅱ树脂（60 mL），先用蒸馏水洗至洗脱液无色，再用90%的乙醇以3 BV/h的速率进行洗脱，然后将流出液分段收集，每30 mL（0.5 BV）收集一份并测定其白藜芦醇浓度，结果如图16所示，4 BV的90%乙醇基本可以将白藜芦醇洗脱下来。

图16　解吸曲线Fig.16　The desorption curve

2.4.4白藜芦醇纯度测定结果将上样液真空浓缩后进行冷冻干燥，紫外分光光度法测定其含量为35.7352 mg/g；6 BV浓度3 mg/mL、pH4的白藜芦醇样液以2 BV/h通过树脂，用4倍柱体积90%的乙醇以3 BV/h的流速洗脱，再将洗脱液真空浓缩后进行冷冻干燥，紫外分光光度法测定其含量可达到181.5888 mg/g，纯度提高了5.08倍。

3　结论

采用微波辅助法提取葡萄叶中的白藜芦醇，其最佳工艺条件为：料液比1∶92，微波时间76 s，微波功率640 W，在此条件下提取白藜芦醇为13.52 mg/g；并通过比较大孔树脂的物理参数、静态吸附率和解吸率，筛选出NKA-Ⅱ树脂作为纯化葡萄叶白藜芦醇的树脂。纯化的最佳条件为：上样流速为2 BV/h、上样浓度3 mg/mL、上样量为6 BV、上样液的pH为4、用4倍柱体积90%的乙醇以3 BV/h的流速洗脱白藜芦醇，其虽然纯度由35.7352 mg/g提高到了181.5888 mg/g，但其他杂质成分较多，纯化效果不太理想，需进一步研究从葡萄叶分离纯化白藜芦醇的工艺条件。

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［21］孙磊磊，康健.响应面实验优化超声波法提取葡萄叶白藜芦醇工艺［J］.食品工业，2015，36（5）：16-19.

Study on microwave assisted extraction and purification of resveratrol from grape leaves

SUN Lei-lei，KANG Jian*
（College of Life Science and Technology，Xinjiang University，Urumqi 830046，China）

Cabernet Sauvignon grape leaves collected from Bazhou area in southern Xinjiang were used as the subjects to extract resveratrol through microwave assistant method，and NKA-Ⅱ resin for purification. Experiments showed that the optimum technological conditions for extraction of resveratrol from grape leaves assisted by microwave method were ethanol concentration 40%，microwave power 640 W，extraction time 76 s，ratio of solid to liquid 1∶92.Under these conditions，the extraction of resveratrol was 13.52 mg/g.Through the static test screening，resveratrol the crude product was purified using NKA-II resin.The optimum technological conditions were as follows：the sample solution volume was 6 BV，the concentration of resveratrol 3 mg/mL，the pH of absorbing stock solution was 4，the dynamically absorbing rate of flow was 2 BV/h，with four times the column volume of，90%ethanol solution as desorption agent under flow rate 3 BV/h.And the purity increased from 35.7352 mg/g to 181.5888 mg/g.Conclusion：Although the extraction rate of microwave assisted method was not the highest，but the time was short，and was suitable for industrial production，purification although had certain effect，but still need further research.

grape leaves；resveratrol；microwave；purification

TS201.1

B

1002-0306（2015）20-0271-08

10.13386/j.issn1002-0306.2015.20.048

2015-03-09

孙磊磊（1988-），女，硕士研究生，研究方向：食品加工技术，E-mail：sunleilei1988@126.com。

康健（1959-），男，副教授，博士，研究方向：食品加工技术，E-mail：kangjian505@sina.com。

“十二五”农村领域国家科技支撑计划项目（2011BAD27B02-04-02）。