我国进出境动物检疫试剂盒的使用现状调查及对策研究

王　勤，刘晓飞，冯春燕，仇松寅，李晓琳，刘丹丹，梅　琳，林祥梅

（中国检验检疫科学研究院动物检疫研究所，北京　100029）

我国进出境动物检疫试剂盒的使用现状调查及对策研究

王勤，刘晓飞，冯春燕，仇松寅，李晓琳，刘丹丹，梅琳，林祥梅

（中国检验检疫科学研究院动物检疫研究所，北京100029）

动物检疫诊断试剂盒是口岸把关所依靠的主要工具，是构建我国生物安全防线的重要组成部分。本文基于全国进出境动物检疫试剂盒的使用情况调查数据（2009—2012年），分析汇总了近年来我国进出境动物检疫试剂盒的使用现状，阐述了目前试剂盒在使用中主要存在的三个问题：依赖进口，自主知识产权试剂盒偏少；缺少质量评价体系，导致试剂盒质量存在隐患；缺少应急储备。有针对性地提出了建立试剂质量评价体系、统筹推动自主知识产权试剂盒的应用、建立应急储备机制的建议。

进出境动物检疫；试剂盒；调查

近年来，随着我国进出口动物数量的急剧增加，检疫试剂盒的种类和使用量也发生了巨大变化。检疫试剂盒在为提升口岸检疫工作效率和检测结果准确性的同时，也暴露出了一些问题。为此我们以问卷调查的形式，对2009—2012年间全国进出境动物检疫试剂盒的使用情况进行了摸底调查。并在此基础上，梳理分析了我国进出境动物检疫试剂盒在使用中存在的问题，提出了相应的对策和建议。

1　试剂盒使用现状

1.1试剂盒使用量大、种类多、发展迅速

从调查结果看，2009年至2012年，使用的试剂盒多达100多种，涉及近20种检测动物（包括牛、羊、猪、鸡、鸭、信鸽、马、猴、猩猩、水貂、企鹅、狐狸等）的37种主要动物疫病。

从检测动物的种类来看（图1），检测牛病的试剂盒使用量最多，占总用量的43% ；其次为猪，占29%，包括检测引进的种猪和供港澳的活猪；第三位是禽类，占总用量的23%，主要为检测鸡，其他的为鸭、信鸽和少量的企鹅等。除此之外，在进境动物检测中也包括了狐狸、水貂等经济动物、马等竞技动物和猴等实验动物。其中灵长类动物的检测用量占2%，主要为猴和少部分的猩猩；马、水生动物以及其他动物（如海象、水貂、狐狸等）检疫试剂盒使用数量各占总量的1%。

图1　不同动物检测试剂盒使用量的占比

这与我国畜牧业的发展方向和整体布局基本一致。当前，畜牧业发展以保障肉、蛋、奶的供应量和品质为主。所以进境动物主要以大中种畜和家禽为主，如牛、猪和鸡。随着奶牛进口数量逐年递增，以及未来随着屠宰牛的进口，检疫牛病的试剂盒数量还会大幅增加。同时我们也应该看到，畜牧业发展越来越多元化。除了解决吃饱、吃好的问题外，其他涉及娱乐、体育、医疗等方面的进口动物种类也越来越多。

从上述分析可以得出，进出境动物检疫试剂盒的种类和数量与我国畜牧业发展密切相关。随着畜牧业产业布局的调整，对外经贸往来的不断加深和国内外疫情的变化，未来进出境动物检疫试剂盒的数量和种类还会有继续增长的趋势。

1.2检测方法仍以免疫学为主导，但分子生物学方法发展迅速

从检测方法来看，涉及ELІSA、荧光定量PCR、琼脂扩散试验、血凝试验、血凝抑制试验、皮内变态反应、补体结合等11种。如图2所示，使用量最多的是ELІSA检测试剂盒，ELІSA检测的疾病范围很广，大部分动物疫病都可采用ELІSA方法检测；其次为荧光定量PCR，主要是诊断禽流感和猪流感的试剂盒，也有少部分诊断猪瘟等疾病的试剂盒；再其次是琼脂扩散试验，主要是用于诊断牛流行性出血热，少量用于检测马传贫和鸡传染性法氏囊病；血凝试验、血凝抑制试验、皮内变态反应等试剂使用量普遍偏少。

图2 不同检测方法试剂盒使用量的占比

从整体上看，以ELІSA为代表的基于免疫学方法的检疫试剂盒（包括ELІSA、琼脂扩散试验、血凝试验、血凝抑制试验等）占主导，占总用量的76%；以荧光定量PCR技术为代表的分子生物学检测方法（包括普通PCR、反转录PCR和荧光定量PCR）发展迅猛，成为动物检疫工作中重要的技术手段，其用量占总用量的23.9%。相信今后随着技术的不断成熟，分子生物学方法因其自身特点会有更广阔的应用前景。

1.3进口试剂盒的使用数量较多，国产试剂盒相对较少

从用量上来看，进口试剂盒占绝大多数。进口试剂盒占试剂盒使用总量的62.12%，国产试剂盒占37.88%。如表1所示，排名前十的试剂盒生产商依次为：ІDEXX（美国）、深圳凯杰（外资独资公司，所在地在中国）、VMRD（美国）、SVANOVA（瑞典）、哈尔滨兽医研究所、Biovet（加拿大）、中国兽药药品监察所、ІD-vet（法国）、Prionics（瑞士）。这十家单位每年提供的试剂盒总量占年均试剂盒使用总量的71.73%，其中ІDEXX和深圳凯杰是两个最大的生产商，平均每年供应的诊断试剂盒共占总用量的37.07%。

表1 使用量排名前十的试剂盒生产商

如表2所示，在进口试剂盒中，美国是我国进口试剂盒最大的来源国，占进口试剂盒使用总量的47%，其次是法国，占进口试剂盒的20%，瑞士和瑞典各占9%。

表2 试剂盒进口情况统计

从类型上看，国产试剂盒主要有四类：第一类为禽流感荧光定量试剂盒；第二类为抗体、血清等标准物质；第三类为口蹄疫试剂盒；第四类为猴B病毒抗体检测试剂盒。其中，禽流感荧光定量PCR试剂盒是国产试剂盒中比较成熟的，使用效果较好。如图3所示，国产试剂盒也主要由几个公司生产，主要集中在深圳、北京等地。其中，深圳凯杰高居榜首，远远高于其他国内公司。

图3 不同生产商试剂盒的使用占比

1.4试剂盒的总体使用效果较好

根据调查统计情况，目前进出境动物检疫工作中使用试剂盒总体不错，使用效果“较好”“良好”“准确”的试剂盒占总用量的96.1%，使用效果“一般”的占总用量的3.3%，使用效果较差的仅占总用量的0.6%。

2　存在的问题

2.1过度依赖进口，具有自主知识产权的检疫试剂盒数量偏少

进出境检疫用试剂盒严重依赖进口，进口试剂盒占试剂盒使用总量的62.12%。国产试剂盒中，最大的生产商深圳凯杰，也已被外资收购。如果算上凯杰公司生产的试剂盒，国外公司生产的试剂盒占使用总量的80%。虽然进口试剂盒具有品种齐全、质量相对稳定的优点，但是在没有质控措施的情况下，过度依赖进口试剂盒有很多弊端。特别是由于每个国家的国情、疫病发生和流行情况以及疫病监控措施的不同，检疫对象也千差万别。此外，国外的动物检疫用试剂盒是根据本国检疫需要和疫情流行特点研制的，在我国并不一定适用。

我国在动物检疫试剂的研发上与国外相比并不逊色，但在商品化上明显处于劣势，有自主知识产权的试剂盒偏少。随着分子生物技术的发展，PCR、RT-PCR和荧光定量PCR定会逐渐得到广泛的应用。我国各口岸结合自身实际，也摸索总结出了一些适用于口岸检疫的分子生物学方法。但是由于动物诊断试剂的审批程序复杂，科研成果转化较难，很难拿到国家兽药证书和批号，难以上市销售，得不到很好的推广。

2.2缺少质量评价体系，试剂盒质量有差异

从调查情况看，使用效果上整体较好，但是试剂盒质量安全问题仍不容乐观。整体上，进口试剂盒的使用效果优于国产试剂盒，但一些大公司的产品也出现过严重质量问题，不同品牌的试剂盒间检测结果差异大，使用者不能了解到试剂盒的诊断敏感性和诊断特异性等重要参数。更令人担忧的是，由于没有质控体系，给了一些不法代理商可乘之机，以次充好，以克隆样品代替阳性质控样品，扰乱了正常的检疫工作秩序。因此，加强动物检疫试剂的质量评价技术研究，探索建立检测试剂标准化和准入评价机制，实施对检测试剂的有效监控，是我国进出境动物检疫工作必须要解决的一个瓶颈问题。

2.3缺少检测试剂盒的应急储备

由于没有建立检疫试剂盒的应急储备机制，近年来进出境检疫试剂盒的供需矛盾越来越突出。一方面，由于近年来我国畜牧业发展多元化，进出境动物种类明显增多，一些动物的检疫试剂盒在国内根本没有。另一方面，动物疫病防控形势更加严峻，有很多新发的动物疫病出现，之前的一些动物疫病原也出现变异。而从国外订购试剂，订货周期长、不能按时交货或者订不到货的情况也时有发生，延误了检疫工作正常开展。所以为了应对目前复杂的疫病流行形势，亟待建立动物检疫试剂盒的应急储备机制，加强动物检疫技术和试剂盒的储备。

3　对策及建议

3.1建立科学、有效、经济的质量评价体系

试剂盒质量的好坏直接关系我国生物安全防线是否稳固。如果试剂盒质量出现问题，就会出现漏检和误检，一旦外来动物疫病传入，将直接危害我国的畜牧业生产和人民健康，严重威胁国家生物安全。因此大部分国家都建立了自己的动物诊断试剂盒的质控体系，有专门的机构对试剂盒进行评价和准入。建议尽快建立符合我国实际和法检需求的进出境动物检疫用试剂盒的质量评价体系，立即开展进出境动物检疫试剂评价工作，以确保检疫试剂的质量。

3.2统筹各方力量，推动自主知识产权试剂盒的研发和成果转化

建议协调各方力量，加快已有成果的转化，使之成为口岸把关可以依靠的重要技术力量。集中系统内优势资源，联合各大科研院所的科研力量，建立进出境动物检疫用标准样品库。结合口岸需要，开展快速、准确的诊断方法研究，开发有自主知识产权的诊断试剂盒。

3.3建立试剂盒的应急储备机制

为保证供应，应对突发事件，建议尽快建立试剂盒的应急储备机制。建立应急储备名录，并对名录中的试剂盒进行储备。不但要对口岸急需而一时买不到的试剂盒进行储备，而且对于重要的、常用的试剂盒，也要进行常规储备，防止因供货商原因影响口岸检疫工作的正常进行。

（责任编辑：朱迪国）

Investigation Report on Diagnostic Kits Used in Entry and Exit Animal Quarantine Inspection in China

Wang Qin，Liu Xiaofei，Feng Chunyan，Qiu Songyin，Li xiaolin，Liu Dandan，Mei Lin，Lin Xiangmei
（Іnstitute of Animal Quarantine，Chinese Academy of Іnspection and Quarantine，Beijing 100029）

Commercial diagnostic kits are the important technical supports for the entry-exit animal quarantine inspection and the key part to construct the biological security of our country. An investigation was carried out focused on diagnostic kits used between 2009 to 2012 by means of questionnaires. The current situation and the critical problems of diagnostic kits used in enty-exit animal quarantine inspection were analyzed based on the investigation data. And suggestions were put forward，such as constructing quality assessment system，promoting the use of independent intellectual property kits，and establishing the emergency reserve mechanism.

entry-exit animal quarantine inspection；diagnostic kit；investigation

S851.4

A

1005-944X（2015）11-0057-04

国家质检总局科技计划项目——猪蓝耳病抗体检测试剂盒贝叶斯方法质量评价模型的建立（2014ІK230）；中国检验检疫科学研究院基本科研业务费专项资金资助项目——动物检疫风险分析中关键参数的精准估计（2014JK030）

林祥梅