张树苗,梁兵宽,张林源,胡德夫,刘艳菊,白加德,陈 星,李夷平,陈 颀
(1.北京麋鹿生态实验中心,北京100076;2.国家林业局调查规划设计院,北京100714;3.北京林业大学自然保护区学院,北京100083)
血清白蛋白是脊椎动物血浆中含量最丰富的蛋白质,能够结合和运输内源性和外源性物质,具有维持血浆胶体渗透压、清除自由基、抑制血小板聚集和抗凝血等生理功能.白蛋白水平是表征机体营养状态的可靠参数[1],有研究发现白蛋白在机体炎症状态时会降低约20%[2-3].白蛋白一定程度上能够反映疾病导致机体营养的消耗程度,可作为预测人类直肠癌术后并发症的指标.低水平的白蛋白与急性心肌梗死、冠心病等动脉粥样硬化的发生有一定的关系[4-5],也是影响慢性心功能衰竭患者早期预防及死亡率的一个独立危险因素[6].血清球蛋白也是一种常见的蛋白,几乎存在于所有的动植物体内,具有免疫作用.Devos等[7]对肝病的研究发现,球蛋白的变化与重型肝炎病情的轻重程度密切相关,可作为诊断肝纤维化的非侵害性指标之一.白蛋白与球蛋白能够组成一对缓冲对,维持血浆胶体的渗透压平衡,并在体内营养物质的运输方面发挥重要作用[8].
麋鹿(Elaphurusdavidianus)是我国特有的鹿科动物,属于国家一级重点保护动物,世界自然保护联盟IUCN红皮书野外灭绝物种,是我国15个重引进成功的物种之一.麋鹿血清中含有多种不同成分的蛋白质,主要为白蛋白和球蛋白,其含量的变化与健康状况密切相关.为了解和监控麋鹿的营养和健康状况,本研究选取不同年龄阶段的麋鹿,测定其血清总蛋白、白蛋白和球蛋白的水平,分析这几个指标随年龄的变化规律.这对于麋鹿各年龄段相关疾病的诊断和预防具有重要参考价值.
选取北京南海子麋鹿苑饲养的健康麋鹿87只,其中幼年23只(雌性10,雄性13)、青年28只(雌性14,雄性 14)、成年 18 只(雌性 10,雄性 8)、老年 18 只(雌性 8,雄性 10).
通过麻醉枪随机对87只健康麋鹿注射陆眠灵进行麻醉保定,在麋鹿完全进入麻醉状态时,分别采集颈部静脉血10 mL,300 r/min离心15 min.取分离后的血清加入质量分数为0.095%的叠氮化钠防腐剂,分装后置于4℃冰箱中保存,用于检测蛋白含量.
1.2.1 血清总蛋白、白蛋白和球蛋白的检测
采用全自动生化仪(TBA 40,日本东芝)对总蛋白、白蛋白和球蛋白的含量进行测定.
1.2.2 年龄阶段的划分
参照文献[9]并结合实际观测,将本研究中不同年龄的麋鹿划分为4个阶段:断奶至1.5岁为幼年期,1.5岁至3.5岁为青年期,4岁至8岁为成年期,9岁以上为老年期.
1.2.3 数据处理方法
应用SPSS16.0统计软件进行数据分析,并进行数据描述.采用Multiple Comparisons对变量进行差异性分析;进行Pearson相关性分析.
本研究中,所有被检测麋鹿的血清白蛋白、球蛋白和总蛋白测定值经1-Sample Kolmogorov-Smirnov检验均呈正态分布,蛋白含量随年龄的变化情况如表1所示.
表1 麋鹿血清总蛋白、白蛋白和球蛋白含量Tab.1 Content of serum total protein,album in and globulin in Père David′sdeer
由表1可以看出,麋鹿在幼年阶段血清总蛋白、白蛋白和球蛋白含量最低.随着年龄增长,至青年和成年期,白蛋白、球蛋白和总蛋白含量达到最大值,2个阶段之间蛋白含量相近,之间的差异没有统计学意义(p>0.05),但显著高于幼年和老年阶段,差异具有统计学意义(p<0.05).随着年龄进一步增长,麋鹿进入老年期,蛋白含量显著下降.白蛋白水平高低能够反映麋鹿的营养状况,表中数据说明麋鹿在幼年阶段由于消化和吸收功能尚未完善,营养状态较差;随着年龄增长,进入青年和成年期后,营养状态最好;而后随着年龄的衰老,其牙齿及各消化器官功能退化,摄入营养的能力下降.球蛋白水平的高低反映机体的免疫能力,表中数据说明麋鹿在青年和成年期的免疫力最好,幼年麋鹿由于免疫功能尚未发育完全,免疫能力较低,而老年麋鹿的衰老也导致免疫功能下降.这种变化趋势也与肝脏合成清蛋白的能力有关[10-11].
对健康正常麋鹿的血清白蛋白、球蛋白、总蛋白含量与年龄和性别进行相关分析,结果如表2所示.
由表2可知,年龄与总蛋白、球蛋白和白/球比的相关性具有统计学意义(p<0.05),性别与三者相关性较小,说明同一年龄段雌、雄个体间的蛋白含量相近.
表2 麋鹿血清总蛋白、白蛋白和球蛋白含量相关性分析Tab.2 Correlations of Père David′sdeer’sserum total protein,album in and globulin
比较各阶段雄性和雌性麋鹿血清蛋白的含量,结果如表3所示.
由表3可以看出,在健康麋鹿的各个年龄阶段,雄性血清总蛋白、白蛋白和球蛋白含量的平均值均高于雌性个体,但差异不具有统计学意义(p>0.05).一方面可能是因为雄性对蛋白质摄入量通常多于雌性,另一方面也可能与雄激素促进蛋白质合成的同化作用有关[12].
表3 雄性和雌性麋鹿的蛋白含量Tab.3 Content of protein of male and female Père David′s deer g/L
本研究测定了不同年龄阶段健康麋鹿的血清白蛋白和球蛋白含量.麋鹿在幼年期的血清白蛋白和球蛋白含量相对较低,可能是由于此时机体发育不成熟,对营养的摄入和吸收能力较差,而且肝功能不完善,合成蛋白能力较低.随着年龄增长,麋鹿进入青年期后发育成熟,血清总蛋白、白蛋白和球蛋白含量都达到最大值.麋鹿进入老年期后,由于机体各器官功能的衰老,其血清总蛋白、白蛋白和球蛋白含量逐渐下降.不同性别之间进行比较,发现雄性麋鹿的血清蛋白含量略高于雌性,这可能与雄性麋鹿的摄食量大和雄激素促进蛋白合成有关.
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